| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| ·PPAR基因研究进展概述 | 第13-17页 |
| ·PPAR的类型和组织特异性表达 | 第13-14页 |
| ·PPARγ的结构和调控机制 | 第14页 |
| ·PPARγ在肥胖程度不同的个体中的表达规律 | 第14-15页 |
| ·PPARγ的配体 | 第15页 |
| ·PPARγ在脂肪形成的作用 | 第15-16页 |
| ·鸡PPARγ的调控模式 | 第16-17页 |
| ·CRISPR/Cas9技术 | 第17-22页 |
| ·CRISPR/Cas的免疫获得和分类 | 第18-19页 |
| ·CRISPR/Cas9的作用机理 | 第19-20页 |
| ·CRISPR/Cas9的应用 | 第20-21页 |
| ·CRISPR/Cas9的脱靶效应 | 第21-22页 |
| ·电穿孔转染技术 | 第22-23页 |
| ·SSA-RPG筛选报告系统 | 第23-24页 |
| ·目的与意义 | 第24-25页 |
| 第二章 CRISPR/Cas9系统的建立 | 第25-36页 |
| ·试验材料 | 第25-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第25-26页 |
| ·主要试剂与试剂配置 | 第26页 |
| ·菌株和质粒 | 第26页 |
| ·引物序列 | 第26-27页 |
| ·试验方法 | 第27-32页 |
| ·PPARγ靶位点的选择 | 第27-28页 |
| ·CIRSPR-Cas9表达载体的构建 | 第28-30页 |
| ·RPG-PPARγ报告载体的构建 | 第30-32页 |
| ·试验结果 | 第32-34页 |
| ·CIRSPR-Cas9表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·RPG报告载体的构建 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| ·小结 | 第35-36页 |
| 第三章 利用CRIPSR/Cas9系统敲除鸡DF1细胞系中PPARγ基因 | 第36-44页 |
| ·试验材料 | 第36-37页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·主要试剂及试剂配制 | 第36页 |
| ·菌株，细胞系，质粒 | 第36-37页 |
| ·试验方法 | 第37-39页 |
| ·DF-1 细胞的培养 | 第37页 |
| ·DF-1 细胞的转染 | 第37页 |
| ·DF-1 阳性细胞的筛选与富集 | 第37-38页 |
| ·DF-1 细胞基因组水平的检测 | 第38-39页 |
| ·脱靶检测 | 第39页 |
| ·试验结果 | 第39-42页 |
| ·载体水平的检测 | 第39-40页 |
| ·阳性细胞的筛选与富集 | 第40页 |
| ·基因组水平的检测 | 第40-42页 |
| ·脱靶检测结果 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第四章 利用CRIPSR/Cas9系统敲除鸡前脂肪细胞中PPARγ基因 | 第44-52页 |
| ·试验材料 | 第44页 |
| ·试验器材 | 第44页 |
| ·主要试剂及试剂配制 | 第44页 |
| ·试验方法 | 第44-46页 |
| ·鸡前脂肪细胞的分离和培养 | 第44-45页 |
| ·电穿孔法转染鸡前脂肪细胞 | 第45-46页 |
| ·前脂肪细胞嘌呤霉素的筛选 | 第46页 |
| ·前脂肪细胞基因组的检测 | 第46页 |
| ·试验结果 | 第46-50页 |
| ·前脂肪细胞的分离与培养 | 第46-47页 |
| ·CRISPR/Cas9在前脂肪细胞中报告载体水平的检测 | 第47-48页 |
| ·阳性前脂肪细胞嘌呤霉素的筛选 | 第48-49页 |
| ·基因组水平检测 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·前脂肪细胞的转染 | 第50页 |
| ·利用CRIPSR/Cas9系统敲除鸡前脂肪细胞中PPARγ基因 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 结论和创新点 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-62页 |
| 附录 | 第62-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
