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谷氨酸棒状杆菌S9114基因组规模代谢网络模型的构建及能量代谢基因amn生理功能的解析

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 绪论第8-16页
   ·谷氨酸棒状杆菌的概述第8-10页
     ·谷氨酸棒状杆菌作为细胞工厂的研究进展第8-10页
     ·谷氨酸棒状杆菌生理功能解析的研究进展第10页
   ·基因组规模代谢网络模型的概述第10-13页
     ·基因组规模代谢网络模型的研究进展第10-11页
     ·基因组规模代谢网络模型的构建过程第11-12页
     ·基因组规模代谢网络模型的模拟分析第12-13页
     ·谷氨酸棒状杆菌基因组规模代谢网络模型的研究进展第13页
   ·谷氨酸棒状杆菌的研究中存在的科学问题第13-15页
   ·本文的主要研究内容第15-16页
第二章 实验材料与方法第16-23页
   ·代谢网络模型的构建方法第16-17页
     ·GSMM构建过程中使用的数据库和软件第16页
     ·代谢粗模型的自动化构建第16页
     ·代谢网络模型的手动精炼第16-17页
     ·C. glutamicum S9114 生物量方程的构建第17页
     ·数学模型的建立和调试第17页
     ·模拟和分析方法第17页
   ·实验材料第17-19页
     ·菌种、质粒和引物第17-18页
     ·工具酶和试剂第18-19页
     ·实验仪器第19页
     ·培养基第19页
   ·实验方法第19-23页
     ·敲除质粒pK18mobSacB/amn-LR的构建第19-20页
     ·E. coli感受态的制备和转化第20页
     ·C. glutamicum感受态的制备和电转化第20-21页
     ·谷氨酸发酵参数测定第21页
     ·胞内ATP水平测定第21页
     ·胞内关键酶活水平的测定第21-22页
     ·胞内ROS水平测定第22页
     ·胞内蛋白质羰基化水平测定第22-23页
第三章 实验结果与讨论第23-43页
   ·谷氨酸棒状杆菌基因组规模代谢网络模型的构建及其特点第23-28页
     ·谷氨酸棒状杆菌基因组代谢网络模型的构建流程第23-26页
     ·谷氨酸棒状杆菌基因组代谢网络模型iJM658 的特点第26-28页
   ·应用iJM658 解析谷氨酸棒状杆菌的生理功能第28-37页
     ·谷氨酸棒状杆菌碳源和氮源的代谢分析第28-32页
     ·谷氨酸棒状杆菌必需基因和必需反应分析第32-33页
     ·谷氨酸合成途径的注释及分析第33-34页
     ·生物素限量对谷氨酸分泌的影响第34页
     ·谷氨酸合成途径的代谢流分布第34-35页
     ·谷氨酸合成的关键的代谢节点分析第35页
     ·溶氧对谷氨酸合成的影响第35-36页
     ·提高 γ-氨基丁酸和L-异亮氨酸产量的靶点分析第36-37页
   ·谷氨酸棒状杆菌中能量代谢基因amn生理功能的研究第37-43页
     ·谷氨酸棒状杆菌中与能量代谢相关的非必需基因分析第37-38页
     ·突变菌株△amn和回补菌株pDXW8amn的构建第38-39页
     ·amn基因缺失对C. glutamicum发酵生产谷氨酸的影响第39-40页
     ·amn基因缺失对C. glutamicum胞内ATP水平和关键酶活性的影响第40-41页
     ·amn基因缺失对谷氨酸棒状杆菌酸耐受性的影响第41-43页
主要结论与展望第43-45页
致谢第45-46页
参考文献第46-53页
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第53-54页
附表一 基本培养基上生长必需基因第54-58页
附表二 不同溶解氧条件下核心代谢途径流量变化第58-63页

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