摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 引言 | 第13-27页 |
·艾滋病及其流行现状 | 第13页 |
·HIV 研究概述 | 第13-18页 |
·HIV 的发现 | 第13-14页 |
·HIV 的分子生物学特征 | 第14-15页 |
·HIV 的生活周期和致病机制 | 第15-16页 |
·HIV-1 感染受体及其细胞亲嗜性 | 第16页 |
·HIV 起源 | 第16-17页 |
·HIV-1 假病毒感染系统 | 第17-18页 |
·艾滋病动物感染模型的研究进展 | 第18-20页 |
·鼠模型 | 第18-19页 |
·黑猩猩与长臂猿 | 第19页 |
·猴模型 | 第19页 |
·SHIV 动物感染模型 | 第19-20页 |
·TRIM5α研究进展概述 | 第20-26页 |
·TRIM5α的发现过程 | 第20-21页 |
·TRIM5α与TRIM 蛋白家族 | 第21-23页 |
·TRIM5α限制HIV-1 感染的机理 | 第23-25页 |
·TRIMCyp | 第25-26页 |
·本研究的目的与意义 | 第26-27页 |
2 材料和方法 | 第27-41页 |
·试验所用菌种及细胞 | 第27页 |
·试验所用猴血样本来源 | 第27页 |
·试验所用质粒 | 第27-29页 |
·引物设计与测序 | 第29-30页 |
·主要试剂与工具酶 | 第30-31页 |
·主要酶类与生化制剂 | 第30页 |
·主要试剂的配制 | 第30-31页 |
·本论文中所使用的试剂盒 | 第31页 |
·主要仪器与设备 | 第31-32页 |
·PCR 方法筛选中国TRIMCyp 基因型旧大陆猴 | 第32-33页 |
·血液DNA 的小量提取 | 第32页 |
·以血液DNA 为模板进行PCR 检测 | 第32-33页 |
·RT-PCR 方法筛选TRIMCyp 基因型旧大陆猴 | 第33-34页 |
·血液RNA 的小量提取 | 第33页 |
·cDNA 合成 | 第33-34页 |
·以cDNA 为模板进行PCR 检测 | 第34页 |
·TRIM5 及TRIMCyp cDNA 的克隆与序列分析 | 第34-36页 |
·TRIM5 及TRIMCyp 全cDNA 的扩增 | 第34页 |
·凝胶回收目的DNA 片段 | 第34-35页 |
·目的片段与克隆载体的连接 | 第35页 |
·感受态细胞制备(TSS 一步法) | 第35页 |
·连接产物的转化 | 第35页 |
·重组子的筛选与鉴定 | 第35-36页 |
·阳性重组质粒测序与分析 | 第36页 |
·中国恒河猴TRIM5 基因组序列分析 | 第36-38页 |
·目的片段的扩增 | 第36页 |
·目的片段的克隆 | 第36-37页 |
·阳性质粒测序与序列分析 | 第37-38页 |
·重组表达载体构建与鉴定 | 第38-39页 |
·目的片段的扩增 | 第38页 |
·目的片段与载体的连接 | 第38页 |
·重组表达载体的鉴定与测序 | 第38-39页 |
·目的基因在293T 细胞上的瞬时表达 | 第39页 |
·HIV 伪病毒的构建与鉴定 | 第39-41页 |
·EGFP 标记的HIV 伪病毒的构建 | 第39页 |
·假病毒包装 | 第39-40页 |
·假病毒反转录酶活性检活性检测 | 第40-41页 |
3 结果 | 第41-53页 |
·中国旧大陆猴的TRIMCyp 的DNA 检测 | 第41-43页 |
·DNA 检测引物的设计 | 第41页 |
·广州与四川恒河猴的DNA 检测 | 第41页 |
·四川地区藏酋猴的DNA 检测 | 第41页 |
·广州食蟹猴与云南恒河猴的检测 | 第41-43页 |
·中国部分旧大陆猴的RNA 检测 | 第43-45页 |
·部分旧大陆猴的RNA 检测 | 第43-44页 |
·TRIM5 与TRIMCyp cDNA 的克隆与序列分析 | 第44-45页 |
·旧大陆猴TRIMCyp 基因的转录状态 | 第45-46页 |
·中国未突变恒河猴TRIM5 DNA 分析 | 第46-49页 |
·各目的片段的克隆与鉴定 | 第47-49页 |
·重组真核表达载体的构建与表达 | 第49-50页 |
·HIV-1 伪病毒的构建与鉴定 | 第50-53页 |
·EGFP 标记的HIV-1 伪病毒的鉴定 | 第50-51页 |
·HIV-1 伪病毒的活性检测 | 第51-53页 |
4 讨论 | 第53-56页 |
·HIV-1 易感旧大陆猴筛选 | 第53页 |
·几种 TRIM5α 和 TRIMCyp 蛋白的表达 | 第53-54页 |
·对 TRIM5α 和 TRIMCyp 的测序分析 | 第54页 |
·HIV 假病毒的构建与意义 | 第54-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-67页 |
附录 | 第67-68页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第68页 |