| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-23页 |
| 1 西尼罗病毒流行学特点 | 第12-14页 |
| 2 西尼罗病毒的分类及病原学特征 | 第14页 |
| ·西尼罗病毒的分类 | 第14页 |
| 3 西尼罗病毒病原学特性 | 第14-18页 |
| ·WNV基因型分类 | 第14页 |
| ·WNV形态及基因结构 | 第14-18页 |
| 4 西尼罗热临床表现 | 第18-19页 |
| 5 西尼罗病毒的鉴别诊断 | 第19-20页 |
| 6 西尼罗病毒病的预防和治疗现状 | 第20-22页 |
| 7 JE血清群病毒交叉保护研究进展 | 第22页 |
| 8 本实验研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 西尼罗病毒E基因的原核表达与鉴定 | 第23-32页 |
| 1 材料和方法 | 第23页 |
| ·材料 | 第23页 |
| 2 方法 | 第23-27页 |
| ·WNV E蛋白基因的克隆与鉴定 | 第23-24页 |
| ·PCR产物胶回收 | 第24页 |
| ·E蛋白原核表达载体的构建 | 第24页 |
| ·pMAL-E的鉴定与测序 | 第24-25页 |
| ·pMAL-E蛋白的诱导与表达 | 第25页 |
| ·pMAL-E蛋白的纯化 | 第25页 |
| ·E蛋白原核表达的SDS-PAGE分析 | 第25-26页 |
| ·间接ELISA检测方法的建立 | 第26页 |
| ·原核表达重组E蛋白的抗原性鉴定 | 第26-27页 |
| 3 实验结果 | 第27-30页 |
| ·WNV E基因的PCR扩增 | 第27页 |
| ·pMAL-E重组质粒的鉴定 | 第27-28页 |
| ·WNV E蛋白的SDS-PAGE电泳分析 | 第28-29页 |
| ·融合E蛋白的间接ELISA检测效价 | 第29页 |
| ·E蛋白的Western-blot检测 | 第29-30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 西尼罗病毒E基因的真核表达与鉴定 | 第32-37页 |
| 1 材料和方法 | 第32页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| 2 实验方法 | 第32-34页 |
| ·目的片段E基因的扩增及胶回收 | 第32页 |
| ·目的基因WNV E与表达载体的连接转化 | 第32-33页 |
| ·PCI-E质粒的鉴定与测序 | 第33页 |
| ·阳性血清抗E基因蛋白的IFA鉴定 | 第33-34页 |
| 3 结果 | 第34-35页 |
| ·重组质粒PCI-E的鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组质粒PCI-E的细胞转染 | 第35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 西尼罗病毒E蛋白重组腺病毒的构建及鉴定 | 第37-46页 |
| 1 材料和方法 | 第37-42页 |
| ·菌种、基因、病毒、载体和细胞株 | 第37-38页 |
| ·试剂 | 第38页 |
| ·重组腺病毒的构建与鉴定 | 第38-40页 |
| ·pAd-WNV-E转染及rAd-WNV-E纯化 | 第40页 |
| ·Western blot鉴定 | 第40-41页 |
| ·IFA鉴定 | 第41页 |
| ·TCID50毒价测定 | 第41-42页 |
| 2 实验结果 | 第42-45页 |
| ·pAd-WNV-E细胞外的构建及鉴定 | 第42页 |
| ·rAd-WNV-E的制备及病毒滴度的测定 | 第42-43页 |
| ·E蛋白在细胞内的表达 | 第43-44页 |
| ·rAd-WNV-E的制备及病毒滴度的测定 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-46页 |
| 第五章 WNVE重组腺病毒对Balb/c小鼠的免疫效力评估 | 第46-50页 |
| 1 材料和方法 | 第46-48页 |
| ·用毒和使用动物 | 第46页 |
| ·浓缩和纯化重组病毒rAd-WNV-E | 第46页 |
| ·JEV的繁殖与TCID50的测定 | 第46-47页 |
| ·小鼠的免疫和攻毒实验 | 第47页 |
| ·观察攻毒后各组小鼠体重平均变化 | 第47-48页 |
| 2 结果 | 第48-49页 |
| ·rAd-WNV-E和JEV的毒力滴度值 | 第48页 |
| ·E蛋白抗体的检测结果 | 第48页 |
| ·攻毒JEV后小鼠的体重变化观察 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 中英文缩略表 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |