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戊型肝炎病毒ORF2蛋白与猪肝细胞蛋白相互作用的研究

主要中英文缩写词第1-5页
中文摘要第5-6页
Abstract第6-8页
一 前言第8-12页
   ·HEV 的基本病毒学特性第8-9页
   ·HEV 基因型及不同基因型的地理分布第9-10页
   ·HEV 在动物中的流行、传播途径及跨种属感染的潜在可能第10-11页
   ·本课题的研究目的和内容第11-12页
二 实验材料、试剂和仪器第12-19页
   ·材料第12-16页
     ·酵母双杂交系统第12-14页
     ·化学发光免疫共沉淀系统第14-16页
   ·试剂及配制第16-18页
     ·试剂第16-17页
     ·试剂配制第17-18页
   ·仪器第18-19页
三 实验技术第19-21页
   ·分裂‐泛素酵母双杂交实验技术第19页
   ·化学发光免疫共沉淀技术第19-21页
四 实验方法第21-36页
   ·酵母双杂交实验第21-29页
     ·诱饵质粒的构建及扩增第21-23页
     ·诱饵质粒转化酵母报告株 NMY51第23-24页
     ·酵母双杂交诱饵质粒功能性验证第24-25页
     ·酵母双杂交筛选压力的确定第25-26页
     ·酵母双杂交筛选猪肝脏 cDNA 文库第26-27页
     ·阳性克隆的确认以及捕获质粒的提取第27-29页
     ·酵母双杂交共转化实验第29页
     ·对 pPR3N-Prey 中的捕获基因进行测序和序列分析第29页
   ·化学发光免疫共沉淀实验第29-35页
     ·pAcGFP1‐Bait 和 pProlabel‐Prey 质粒的构建第29-34页
     ·AcGFP1‐Bait 和 ProLabel‐Prey 共转染 293FT 细胞第34页
     ·化学发光免疫共沉淀实验第34-35页
   ·ORF2 蛋白与肝细胞相互作用蛋白的生物信息学分析第35-36页
五 实验结果第36-50页
   ·酵母双杂交筛选实验结果第36-45页
     ·酵母双杂交诱饵质粒大量提取后鉴定及定量第36页
     ·酵母报告株 NMY51 转化诱饵质粒后菌落 PCR 鉴定第36页
     ·诱饵质粒功能性验证第36-37页
     ·酵母双杂交文库筛选压力选择第37-39页
     ·酵母双杂交筛选与 HEV ORF2 相互作用的猪肝细胞文库第39-44页
     ·捕获蛋白亚细胞定位第44-45页
   ·化学发光免疫共沉淀第45-50页
     ·化学发光免疫共沉淀质粒的构建第45页
     ·化学发光免疫共沉淀质粒表达鉴定第45-46页
     ·化学发光免疫共沉淀结果第46-47页
     ·相互作用蛋白功能富集聚类分析第47-48页
     ·捕获蛋白与基因 1 型、4 型 HEV ORF2 结合力的比较第48-50页
讨论第50-53页
小结第53-54页
参考文献第54-59页
论文综述第59-68页
 参考文献第65-68页
致谢第68-69页

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