| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-23页 |
| ·国内外植物病毒研究现状 | 第12-13页 |
| ·植物病毒的研究历史 | 第12页 |
| ·植物病毒的形态及分类研究 | 第12-13页 |
| ·进境植物中常见的六种检疫性病毒简介 | 第13-16页 |
| ·南芥菜花叶病毒 | 第13页 |
| ·烟草环斑病毒 | 第13-14页 |
| ·番茄环斑病毒 | 第14页 |
| ·凤仙花坏死斑病毒 | 第14-15页 |
| ·鸢尾花黄斑病毒 | 第15页 |
| ·番茄斑萎病毒 | 第15-16页 |
| ·植物病毒检测的前处理技术 | 第16-18页 |
| ·植物病毒不同检测技术及研究进展 | 第18-23页 |
| ·血清学检测 | 第18页 |
| ·PCR检测 | 第18-20页 |
| ·荧光定量PCR | 第18-19页 |
| ·多重PCR | 第19-20页 |
| ·液相芯片检测 | 第20-23页 |
| 第二章 植物病毒前处理方法的建立和比较 | 第23-33页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·试剂 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-28页 |
| ·ELISA-酶联免疫吸附法 | 第24-25页 |
| ·引物的设计和合成 | 第25页 |
| ·RNApreppure植物总RNA提取 | 第25-26页 |
| ·反转录合成cDNA | 第26页 |
| ·PCR扩增条件 | 第26页 |
| ·SYBRGreen I 实时荧光RT-PCR反应 | 第26-27页 |
| ·PEG前处理 | 第27页 |
| ·免疫磁珠前处理 | 第27-28页 |
| ·灵敏度比较 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-31页 |
| ·ELISA初筛 | 第28页 |
| ·普通RT-PCR检测 | 第28-30页 |
| ·SYBRGreenI实时荧光RT-PCR检测 | 第30页 |
| ·不同处理方法的灵敏度的比较 | 第30-31页 |
| ·不同处理方法对进境百合样品的检测 | 第31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 百合常见病毒的多重检测 | 第33-48页 |
| ·材料与设备 | 第33-34页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·仪器设备 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-37页 |
| ·病毒接种 | 第34页 |
| ·RNA的提取 | 第34页 |
| ·引物的设计 | 第34-35页 |
| ·反转录体系 | 第35-36页 |
| ·PCR检测 | 第36页 |
| ·单一和多重SYBR- Green RT-PCR检测 | 第36-37页 |
| ·特异性和灵敏度分析 | 第37页 |
| ·数据分析 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-46页 |
| ·引物的特异性和融解曲线分析 | 第37-38页 |
| ·95%置信区间的确定 | 第38-39页 |
| ·三种病毒的多重检测 | 第39-42页 |
| ·RT-PCR灵敏度实验 | 第42-44页 |
| ·SYBRGreenIReal-timePCR的灵敏度 | 第44-46页 |
| ·结论 | 第46-48页 |
| 第四章 三种番茄斑萎病毒属病毒的液相芯片检测 | 第48-56页 |
| ·材料与方法 | 第49页 |
| ·试剂 | 第49页 |
| ·仪器设备 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-52页 |
| ·提纯血清 | 第49-50页 |
| ·抗体与微球偶联 | 第50页 |
| ·抗体的生物素标记 | 第50页 |
| ·阴性对照池(pool)的制备方法 | 第50-51页 |
| ·液相蛋白芯片单一病毒检测程序 | 第51页 |
| ·最佳试验条件的确定 | 第51页 |
| ·检测2种病毒的Plex检测体系建立 | 第51页 |
| ·液相蛋白芯片检测方法阴阳性临界值——阈值的计算 | 第51页 |
| ·液相蛋白芯片特异性检测 | 第51页 |
| ·液相蛋白芯片技术的与ELISA方法的比较 | 第51-52页 |
| ·结果 | 第52-54页 |
| ·最佳试验条件的确定 | 第52页 |
| ·液相蛋白芯片检测方法阴阳性临界值 | 第52页 |
| ·液相蛋白芯片特异性检测 | 第52-53页 |
| ·液相芯片的多重检测 | 第53页 |
| ·灵敏度比较 | 第53-54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 附录 | 第60-65页 |
| 致谢 | 第65页 |