| 目录 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-41页 |
| ·引言 | 第13页 |
| ·生殖隔离研究进展 | 第13-17页 |
| ·生殖隔离的基本概念 | 第13-15页 |
| ·生殖隔离的基本模型和研究近况 | 第15-17页 |
| ·水稻生殖隔离基因研究进展 | 第17-21页 |
| ·洲栽培稻的分类和起源 | 第17页 |
| ·水稻的籼粳杂种不育 | 第17-18页 |
| ·水稻籼粳亚种间杂种不育的遗传模型和基因克隆 | 第18-20页 |
| ·水稻籼粳杂种胚囊育性基因S5的研究进展 | 第20-21页 |
| ·植物天冬氨酸蛋白酶研究进展 | 第21-24页 |
| ·植物天冬氨酸蛋白酶的结构和功能 | 第21-23页 |
| ·拟南芥和水稻中天冬氨酸蛋白酶的研究进展 | 第23-24页 |
| ·植物细胞程序性死亡研究进展 | 第24-30页 |
| ·植物细胞程序性死亡与抗病反应 | 第24-25页 |
| ·植物细胞程序性死亡与植物有性生殖 | 第25-27页 |
| ·植物细胞程序性死亡与内质网胁迫 | 第27-30页 |
| ·细胞程序性死亡鉴定方法 | 第30页 |
| ·植物胼胝质研究进展 | 第30-34页 |
| ·胼胝质概述 | 第30-31页 |
| ·胼胝质的合成 | 第31-32页 |
| ·胼胝质的降解 | 第32页 |
| ·植物胼胝质的生物学功能 | 第32-34页 |
| ·植物的分泌途径与内吞途径 | 第34-39页 |
| ·传统的分泌途径 | 第34-35页 |
| ·“非传统的”分泌途径 | 第35-37页 |
| ·内吞作用 | 第37-39页 |
| ·植物蛋白质亚细胞定位研究方法 | 第39-40页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第40-41页 |
| 2 材料和方法 | 第41-54页 |
| ·材料 | 第41-43页 |
| ·本研究涉及的基因和表述方法 | 第41页 |
| ·植物材料和细胞系 | 第41页 |
| ·载体和菌株 | 第41-42页 |
| ·实验试剂 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-50页 |
| ·基因、蛋白质的结构和功能预测、亚细胞定位预测 | 第43页 |
| ·苏木精整体染色法组织切片 | 第43页 |
| ·免疫组织化学检测ORF5蛋白的原位表达 | 第43-44页 |
| ·免疫电镜实验方法 | 第44-45页 |
| ·烟草BY-2细胞原生质体瞬时表达 | 第45页 |
| ·水稻原生质体瞬时表达 | 第45-46页 |
| ·烟草BY-2稳定表达细胞系构建 | 第46页 |
| ·BFA、wortmannin处理和FM4-64内吞 | 第46页 |
| ·水稻农杆菌转化 | 第46-47页 |
| ·RNA原位杂交方法 | 第47页 |
| ·TUNEL法检测PCD | 第47页 |
| ·荧光染色检测胼胝质沉积 | 第47-48页 |
| ·表达谱芯片取样和分析 | 第48页 |
| ·小样法水稻基因组DNA抽提和转基因植株阳性检测 | 第48-49页 |
| ·蛋白抽提,SDS-PAGE和Western Blot | 第49页 |
| ·ORF4+的毕赤酵母分泌表达 | 第49-50页 |
| ·载体构建 | 第50-54页 |
| ·载体构建时用到的引物 | 第50-51页 |
| ·瞬时表达亚细胞定位载体构建 | 第51-53页 |
| ·稳定转化BY-2细胞的载体构建 | 第53页 |
| ·水稻农杆菌转化载体构建 | 第53页 |
| ·RNA原位杂交探针载体构建 | 第53-54页 |
| ·ORF4+酵母表达载体构建 | 第54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-94页 |
| ·ORF3、ORF4和ORF5的基因差异和蛋白差异 | 第54-57页 |
| ·ORF5蛋白的亚细胞定位 | 第57-59页 |
| ·ORF5蛋白在NJ、BL、02428的雌蕊表达 | 第57-58页 |
| ·免疫电镜法确定ORF5的亚细胞定位 | 第58-59页 |
| ·ORF5蛋白加工 | 第59-62页 |
| ·ORF3和ORF4蛋白的亚细胞定位 | 第62-67页 |
| ·BY-2细胞瞬时表达研究ORF3和ORF4蛋白的亚细胞定位 | 第62-65页 |
| ·水稻原生质体系统研究ORF3和ORF4的亚细胞定位 | 第65-67页 |
| ·用水稻转基因植株研究亚细胞定位的尝试 | 第67-69页 |
| ·ORF4+蛋白性质的初步研究 | 第69-74页 |
| ·ORF4+毕赤酵母表达 | 第74-76页 |
| ·BLORF5+与BL(BL/NJ)不同的胚囊败育模式 | 第76-80页 |
| ·ORF3与ORF4的表达模式 | 第80-83页 |
| ·ORF4+与ORF5+表达谱芯片研究 | 第83-89页 |
| ·ORF5+表达谱芯片的研究 | 第83-87页 |
| ·ORF4+表达谱芯片的研究 | 第87-89页 |
| ·ORF4+与ORF5+引起PCD | 第89-91页 |
| ·BLORF5+胚珠胼胝质异常积累 | 第91-94页 |
| 4 讨论 | 第94-98页 |
| ·表达模式决定S5位点控制水稻籼粳杂种胚囊育性 | 第94页 |
| ·ORF3,ORF4和ORF5可能的生物学功能 | 第94-97页 |
| ·ORF3可能的生物学功能 | 第95页 |
| ·ORF4可能的生物学功能 | 第95-96页 |
| ·ORF5可能的生物学功能 | 第96-97页 |
| ·研究展望 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-112页 |
| 附录 | 第112-132页 |
| 附录Ⅰ：部分实验操作步骤 | 第112-131页 |
| Protocol 1：苏木精整体染色法组织切片 | 第112-116页 |
| Protocol 2：烟草BY-2细胞原生质体瞬时表达 | 第116-117页 |
| Protocol 3：水稻原生质体瞬时表达 | 第117-119页 |
| Protocol 4：RNA原位杂交方法 | 第119-126页 |
| Protocol 5：SDS-PAGE和Western Blot配方 | 第126-127页 |
| Protocol 6：毕赤酵母表达操作步骤 | 第127-131页 |
| 附录Ⅱ：作者简介 | 第131-132页 |
| 致谢 | 第132页 |
