| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 第一部分 综述 | 第11-25页 |
| ·胞内劳森氏菌病原学 | 第12-14页 |
| ·胞内菌形态学与分类 | 第12页 |
| ·培养 | 第12-13页 |
| ·流行病学 | 第13-14页 |
| ·致病性 | 第14-15页 |
| ·病理变化 | 第15-16页 |
| ·致病机理 | 第16-19页 |
| ·免疫反应 | 第19-20页 |
| ·诊断 | 第20-22页 |
| ·临床诊断 | 第20页 |
| ·剖检诊断 | 第20-21页 |
| ·活体诊断 | 第21-22页 |
| ·预防与控制 | 第22-23页 |
| ·抗菌药物 | 第22页 |
| ·疫苗免疫 | 第22-23页 |
| ·目的与意义 | 第23-24页 |
| ·研究线路 | 第24-25页 |
| 第二部分 实验研究 | 第25-85页 |
| 研究一 猪胞内劳森氏菌抗原候选蛋白的原核表达及重组蛋白的纯化与复性 | 第25-64页 |
| 1 主要材料、试剂与仪器 | 第25-29页 |
| ·材料、菌种及载体 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26页 |
| ·引物合成与序列测定 | 第26页 |
| ·主要试剂和培养基的配制 | 第26-29页 |
| 2 实验方法与步骤 | 第29-39页 |
| ·抗原候选蛋白的筛选 | 第29-31页 |
| ·引物 | 第31页 |
| ·DNA的抽提 | 第31-32页 |
| ·PCR扩增与目的基因回收 | 第32-33页 |
| ·目的基因克隆 | 第33-34页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·重组表达质粒转化表达宿主菌 | 第35页 |
| ·诱导表达及鉴定 | 第35-37页 |
| ·重组蛋白的纯化及复性 | 第37-39页 |
| 3. 结果 | 第39-59页 |
| ·猪胞内劳森氏菌的诊断 | 第39-40页 |
| ·抗原候选蛋白原核表达载体的构建 | 第40-43页 |
| ·重组蛋白的表达与鉴定 | 第43-54页 |
| ·重组蛋白的纯化与复性 | 第54-59页 |
| 4. 讨论 | 第59-62页 |
| ·间接ELISA检测方法建立意义 | 第59页 |
| ·胞内劳森氏菌外膜蛋白的抗原性 | 第59-60页 |
| ·抗原候选蛋白的选择 | 第60页 |
| ·原核表达系统的选择 | 第60页 |
| ·原核表达质粒的构建 | 第60-61页 |
| ·重组蛋白的表达形式 | 第61-62页 |
| ·重组蛋白的获得 | 第62页 |
| ·包被抗原的确定 | 第62页 |
| 5. 小结 | 第62-64页 |
| 研究二 猪胞内劳森氏菌间接ELSIA检测方法的建立及初步应用 | 第64-85页 |
| 1. 材料、试剂与仪器 | 第64-65页 |
| ·主要试剂 | 第64页 |
| ·主要仪器 | 第64-65页 |
| 2. 方法与步骤 | 第65-69页 |
| ·间接ELISA的基本步骤 | 第65页 |
| ·间接ELlSA的优化 | 第65-67页 |
| ·间接ELISA阴阳性临界值 | 第67页 |
| ·LI-1024b-ELSIA特异性实验 | 第67-68页 |
| ·重复性试验 | 第68页 |
| ·LI-1024b间接ELISA检测方法的初步应用 | 第68-69页 |
| 3 结果 | 第69-81页 |
| ·ELISA反应条件的优化结果 | 第69-76页 |
| ·LI-1024b间接ELISA阴阳性临界值的确定 | 第76-77页 |
| ·LI-1024b-ELSIA特异性试验 | 第77-79页 |
| ·重复性试验 | 第79-80页 |
| ·临床样品的检测 | 第80-81页 |
| 4. 讨论 | 第81-84页 |
| ·间接ELISA的优点 | 第81页 |
| ·间接ELISA反应条件的优化 | 第81-82页 |
| ·LI-1024b间接ELISA的特异性 | 第82-83页 |
| ·临床血清样品检测结果 | 第83-84页 |
| 5. 小结 | 第84-85页 |
| 第三部分 全文结论 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-95页 |
| 附录：英文缩写对照表 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 | 第97页 |
