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广西三黄鸡MD抗性相关基因的筛选研究-BF基因可变剪切外显子7 qPCR技术的建立和应用

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-15页
第一章 鸡MD抗性育种研究进展第15-25页
   ·MDV及MD简介第15-17页
   ·鸡抗MD育种的研究进展第17-19页
     ·表型选择第17-18页
     ·DNA分子标记第18页
     ·转基因育种第18-19页
   ·鸡MD抗性相关基因第19-24页
     ·鸡MHC基因第19-22页
       ·MHC基因结构第19-20页
       ·MHC的功能第20-21页
       ·MHC基因与MD抗性第21-22页
     ·非MHC基因第22-24页
       ·鸡生长激素基因第22-23页
       ·数量性状位点(QTL)第23页
       ·细胞因子第23页
       ·磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶(PEPCK)第23-24页
       ·一氧化氮合成酶(iNOS)和NO第24页
   ·本研究的背景、目的和意义第24-25页
第二章 不同BF遗传背景广西三黄鸡MDV攻毒试验第25-37页
 摘要第25-26页
   ·材料与方法第26-30页
     ·材料第26页
       ·试验动物第26页
       ·生化试剂第26页
       ·仪器第26页
       ·病毒第26页
     ·方法第26-30页
       ·MDV-1强毒株细胞毒的制备第26-27页
       ·广西三黄鸡攻毒试验第27页
       ·试验鸡外周血淋巴细胞的采集分离第27页
       ·外周血淋巴细胞基因组总DNA的提取第27页
       ·外周血淋巴细胞总RNA的抽提第27-28页
       ·攻毒鸡单纯感染MD的PCR检测第28-29页
       ·Meq基因的克隆与测序第29-30页
   ·结果与分析第30-35页
     ·MD攻毒后试验鸡PCR抽检第30-32页
     ·试验鸡肿瘤发生和死亡情况第32-33页
     ·BF基因外显子7和MD肿瘤发生情况统计第33-35页
     ·MDV-1毒株120015 meq蛋白基因测序第35页
   ·讨论与小结第35-37页
第三章 不同BF遗传背景鸡BF基因的克隆、序列及遗传进化分析第37-53页
 摘要第37页
   ·材料与方法第37-41页
     ·材料第37-38页
       ·鸡外周血淋巴细胞第37页
       ·试剂第37-38页
       ·仪器第38页
     ·方法第38-41页
       ·BF基因的克隆第38-40页
       ·BF基因序列的生物信息学分析第40-41页
   ·结果第41-51页
     ·BF基因PCR电泳图第41-42页
     ·BF蛋白信号肽和跨膜区预测结果第42-43页
     ·BF基因的序列和系统发育分析第43-51页
       ·BF基因的序列分析第43-49页
       ·BF基因核苷酸的系统发育分析第49-51页
   ·讨论与小结第51-53页
第四章 不同BF遗传背景鸡BF基因可变剪切外显子7 qPCR技术的建立与应用第53-68页
 摘要第53-54页
   ·材料与方法第54-57页
     ·材料第54页
       ·鸡外周血淋巴细胞第54页
       ·试剂和仪器第54页
       ·引物第54页
     ·方法第54-57页
       ·鸡外周血淋巴总RNA的提取第54-55页
       ·目的基因的克隆转化第55页
       ·重组质粒的抽提及浓度、纯度的检测第55-56页
       ·标准品的实时荧光定量PCR第56页
       ·BF基因可变剪切外显子7样本的mRNA表达水平检测第56-57页
   ·结果与分析第57-65页
     ·重组质粒的PCR鉴定第57-58页
     ·重组质粒测序分析第58页
     ·标准品OD值测定第58页
     ·标准曲线的构建第58-60页
     ·标准曲线的分析第60-64页
       ·融解曲线分析第60页
       ·实时荧光定量PCR产物电泳分析第60-61页
       ·重复性分析第61-63页
       ·标准曲线和回归方程的建立第63-64页
     ·BF基因可变剪切外显子7 mRNA表达水平分析第64-65页
   ·讨论与小结第65-68页
第五章 快速检测BF基因可变剪切外显子7 PCR技术的建立和应用第68-74页
 摘要第68页
   ·材料和方法第68-69页
     ·材料第68页
       ·cDNA样品第68页
       ·试剂和仪器第68页
       ·引物第68页
     ·方法第68-69页
       ·灵敏度检测第68页
       ·退火温度优化第68-69页
       ·引物比例优化第69页
       ·克隆与测序分析第69页
   ·结果与分析第69-71页
     ·灵敏度检测结果第69页
     ·退火温度优化结果第69页
     ·引物比例优化结果第69-70页
     ·最终优化结果第70-71页
   ·快速检测BF基因可变剪切外显子7 PCR方法的应用第71-72页
   ·讨论和小结第72-74页
第六章 结论第74-75页
参考文献第75-80页
致谢第80-81页
个人简历第81页
攻读硕士学位期间所发表的学术论文第81页
攻读硕士学位期间参与研究的课题第81页

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