摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-15页 |
第一章 鸡MD抗性育种研究进展 | 第15-25页 |
·MDV及MD简介 | 第15-17页 |
·鸡抗MD育种的研究进展 | 第17-19页 |
·表型选择 | 第17-18页 |
·DNA分子标记 | 第18页 |
·转基因育种 | 第18-19页 |
·鸡MD抗性相关基因 | 第19-24页 |
·鸡MHC基因 | 第19-22页 |
·MHC基因结构 | 第19-20页 |
·MHC的功能 | 第20-21页 |
·MHC基因与MD抗性 | 第21-22页 |
·非MHC基因 | 第22-24页 |
·鸡生长激素基因 | 第22-23页 |
·数量性状位点(QTL) | 第23页 |
·细胞因子 | 第23页 |
·磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶(PEPCK) | 第23-24页 |
·一氧化氮合成酶(iNOS)和NO | 第24页 |
·本研究的背景、目的和意义 | 第24-25页 |
第二章 不同BF遗传背景广西三黄鸡MDV攻毒试验 | 第25-37页 |
摘要 | 第25-26页 |
·材料与方法 | 第26-30页 |
·材料 | 第26页 |
·试验动物 | 第26页 |
·生化试剂 | 第26页 |
·仪器 | 第26页 |
·病毒 | 第26页 |
·方法 | 第26-30页 |
·MDV-1强毒株细胞毒的制备 | 第26-27页 |
·广西三黄鸡攻毒试验 | 第27页 |
·试验鸡外周血淋巴细胞的采集分离 | 第27页 |
·外周血淋巴细胞基因组总DNA的提取 | 第27页 |
·外周血淋巴细胞总RNA的抽提 | 第27-28页 |
·攻毒鸡单纯感染MD的PCR检测 | 第28-29页 |
·Meq基因的克隆与测序 | 第29-30页 |
·结果与分析 | 第30-35页 |
·MD攻毒后试验鸡PCR抽检 | 第30-32页 |
·试验鸡肿瘤发生和死亡情况 | 第32-33页 |
·BF基因外显子7和MD肿瘤发生情况统计 | 第33-35页 |
·MDV-1毒株120015 meq蛋白基因测序 | 第35页 |
·讨论与小结 | 第35-37页 |
第三章 不同BF遗传背景鸡BF基因的克隆、序列及遗传进化分析 | 第37-53页 |
摘要 | 第37页 |
·材料与方法 | 第37-41页 |
·材料 | 第37-38页 |
·鸡外周血淋巴细胞 | 第37页 |
·试剂 | 第37-38页 |
·仪器 | 第38页 |
·方法 | 第38-41页 |
·BF基因的克隆 | 第38-40页 |
·BF基因序列的生物信息学分析 | 第40-41页 |
·结果 | 第41-51页 |
·BF基因PCR电泳图 | 第41-42页 |
·BF蛋白信号肽和跨膜区预测结果 | 第42-43页 |
·BF基因的序列和系统发育分析 | 第43-51页 |
·BF基因的序列分析 | 第43-49页 |
·BF基因核苷酸的系统发育分析 | 第49-51页 |
·讨论与小结 | 第51-53页 |
第四章 不同BF遗传背景鸡BF基因可变剪切外显子7 qPCR技术的建立与应用 | 第53-68页 |
摘要 | 第53-54页 |
·材料与方法 | 第54-57页 |
·材料 | 第54页 |
·鸡外周血淋巴细胞 | 第54页 |
·试剂和仪器 | 第54页 |
·引物 | 第54页 |
·方法 | 第54-57页 |
·鸡外周血淋巴总RNA的提取 | 第54-55页 |
·目的基因的克隆转化 | 第55页 |
·重组质粒的抽提及浓度、纯度的检测 | 第55-56页 |
·标准品的实时荧光定量PCR | 第56页 |
·BF基因可变剪切外显子7样本的mRNA表达水平检测 | 第56-57页 |
·结果与分析 | 第57-65页 |
·重组质粒的PCR鉴定 | 第57-58页 |
·重组质粒测序分析 | 第58页 |
·标准品OD值测定 | 第58页 |
·标准曲线的构建 | 第58-60页 |
·标准曲线的分析 | 第60-64页 |
·融解曲线分析 | 第60页 |
·实时荧光定量PCR产物电泳分析 | 第60-61页 |
·重复性分析 | 第61-63页 |
·标准曲线和回归方程的建立 | 第63-64页 |
·BF基因可变剪切外显子7 mRNA表达水平分析 | 第64-65页 |
·讨论与小结 | 第65-68页 |
第五章 快速检测BF基因可变剪切外显子7 PCR技术的建立和应用 | 第68-74页 |
摘要 | 第68页 |
·材料和方法 | 第68-69页 |
·材料 | 第68页 |
·cDNA样品 | 第68页 |
·试剂和仪器 | 第68页 |
·引物 | 第68页 |
·方法 | 第68-69页 |
·灵敏度检测 | 第68页 |
·退火温度优化 | 第68-69页 |
·引物比例优化 | 第69页 |
·克隆与测序分析 | 第69页 |
·结果与分析 | 第69-71页 |
·灵敏度检测结果 | 第69页 |
·退火温度优化结果 | 第69页 |
·引物比例优化结果 | 第69-70页 |
·最终优化结果 | 第70-71页 |
·快速检测BF基因可变剪切外显子7 PCR方法的应用 | 第71-72页 |
·讨论和小结 | 第72-74页 |
第六章 结论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
个人简历 | 第81页 |
攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第81页 |
攻读硕士学位期间参与研究的课题 | 第81页 |