| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-35页 |
| 1 转基因棉田害虫种类的变化 | 第11页 |
| 2 苏云金芽孢杆菌的研究史、分类及结构 | 第11-14页 |
| ·苏云金芽孢杆菌的研究简史 | 第11-12页 |
| ·Bt杀虫晶体蛋白的分类 | 第12页 |
| ·Bt杀虫晶体蛋白的结构 | 第12-14页 |
| 3 主要的Bt受体种类 | 第14-20页 |
| ·氨肽酶N | 第14-15页 |
| ·钙粘蛋白 | 第15-18页 |
| ·碱性磷酸酶 | 第18-19页 |
| ·肌动蛋白 | 第19-20页 |
| ·糖脂 | 第20页 |
| 4 Bt毒素的作用机理 | 第20-24页 |
| ·肠道细胞穿孔假说 | 第20-21页 |
| ·细胞死亡途径假说 | 第21-23页 |
| ·两种假说的比较 | 第23-24页 |
| ·两种假说的不足 | 第24页 |
| 5 害虫对Cry毒素的耐受性 | 第24-32页 |
| ·中肠蛋白酶活性与幼虫对Cry毒素的耐受性 | 第24-28页 |
| ·中肠围食膜与幼虫对Cry毒素的耐受性 | 第28-30页 |
| ·肠道微生物对Bt作用的影响 | 第30-31页 |
| ·Bt毒素特异受体的差异 | 第31-32页 |
| 6 本试验研究的目的和意义 | 第32-35页 |
| 第二章 钙粘蛋白与甜菜夜蛾和棉铃虫对Cry1Ac和Cry1Ca的敏感性差异相关 | 第35-65页 |
| 摘要 | 第35-37页 |
| 1 材料与方法 | 第37-49页 |
| ·供试昆虫 | 第37页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第37-38页 |
| ·Cry1Ca和Cry1Ac对甜菜夜蛾和棉铃虫毒力的生物测定 | 第38页 |
| ·甜菜夜蛾钙粘蛋白全长的克隆 | 第38-44页 |
| ·棉铃虫和甜菜夜蛾钙粘蛋白表达载体的构建 | 第44-45页 |
| ·rSeCad2p和rHaBtRp蛋白诱导表达、纯化及浓度测定 | 第45-47页 |
| ·Cry1Ac和Cry1Ca毒素的生物素标记 | 第47页 |
| ·蛋白印记 | 第47-48页 |
| ·点杂交 | 第48页 |
| ·rSeCad2p和rHaBtRp分别对Cry1Ca或Cry1Ac的增效作用 | 第48-49页 |
| ·数据分析 | 第49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-63页 |
| ·Cry1Ca和Cry1Ac对甜菜夜蛾和棉铃虫的毒力 | 第49-50页 |
| ·钙粘蛋白序列分析 | 第50-54页 |
| ·重组表达质粒的构建与鉴定 | 第54-57页 |
| ·重组菌pET-rSeCad2p和pET-rHaBtRp的诱导表达和蛋白纯化 | 第57-60页 |
| ·纯化蛋白rSeCad2p和rHaBtRp与Cry1Ca或Cry1Ac的互作分析 | 第60-62页 |
| ·rSeCad2p和rHaBtRp分别对Cry1Ca或Cry1Ac的增效作用 | 第62-63页 |
| 3. 讨论 | 第63-65页 |
| 第三章 膜结合性碱性磷酸酶的分子克隆与特性分析 | 第65-77页 |
| 摘要 | 第65-66页 |
| 1. 材料和方法 | 第66-70页 |
| ·供试昆虫及材料收集 | 第66页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第66页 |
| ·甜菜夜蛾ALP基因的全长克隆 | 第66-67页 |
| ·甜菜夜蛾ALP1基因序列分析及系统发育分析 | 第67页 |
| ·甜菜夜蛾ALP1基因的时空表达 | 第67-69页 |
| ·甜菜夜蛾ALP1表达载体的构建 | 第69页 |
| ·SeALP1肽的原核表达及蛋白纯化 | 第69-70页 |
| ·蛋白印迹 | 第70页 |
| ·点杂交 | 第70页 |
| ·数据分析 | 第70页 |
| 2 结果与分析 | 第70-75页 |
| ·序列分析 | 第70-72页 |
| ·甜菜夜蛾ALP1基因的时空表达 | 第72-73页 |
| ·甜菜夜蛾ALP1基因的原核表达及蛋白纯化 | 第73-74页 |
| ·SeALP1肽与Cry1Ca/Cry1Ac的互作分析 | 第74-75页 |
| 3 讨论 | 第75-77页 |
| 第四章 中肠蛋白酶对Cry毒素活性的影响 | 第77-85页 |
| 摘要 | 第77页 |
| 1 材料与方法 | 第77-79页 |
| ·供试昆虫 | 第77-78页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第78页 |
| ·棉铃虫和甜菜夜蛾中肠蛋白酶液的提取及浓度测定 | 第78页 |
| ·棉铃虫和甜菜夜蛾中肠蛋白酶液对Cry1Ac和Cry1Ca的消化 | 第78-79页 |
| ·蛋白酶抑制剂对Cry1Ab和Cry1Ca毒力的影响 | 第79页 |
| 2. 结果与分析 | 第79-83页 |
| ·棉铃虫和甜菜夜蛾中肠蛋白酶对Cry1Ac的消化 | 第79-80页 |
| ·棉铃虫和甜菜夜蛾中肠蛋白酶对Cry1Ca的消化 | 第80-81页 |
| ·蛋白酶抑制剂对Cry晶体蛋白毒力的影响 | 第81-83页 |
| 3 讨论 | 第83-85页 |
| 第五章 青霉素影响甜菜夜蛾幼虫耐受几种苏云金杆菌晶体蛋白的能力 | 第85-91页 |
| 摘要 | 第85-86页 |
| 1 材料与方法 | 第86-87页 |
| ·供试虫源 | 第86页 |
| ·实验材料及方法 | 第86页 |
| ·数据分析 | 第86-87页 |
| 2 结果与分析 | 第87-88页 |
| ·摄食青霉素影响甜菜夜蛾幼虫对晶体毒素的耐受性 | 第87-88页 |
| ·含青霉素累代饲养对甜菜夜蛾幼虫耐受能力的影响 | 第88页 |
| 3 讨论 | 第88-91页 |
| 全文总结 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-101页 |
| 攻读硕士学位期间学术论文的发表情况 | 第101-103页 |
| 致谢 | 第103页 |
