| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-28页 |
| 1 miRNA 简介 | 第14-23页 |
| ·miRNA 的特征、产生与作用机制 | 第14-16页 |
| ·miRNA 的生物学特征 | 第14页 |
| ·miRNA 的加工和作用机制 | 第14-16页 |
| ·miRNA 与疾病的关系 | 第16页 |
| ·miRNA 及靶基因研究方法 | 第16-23页 |
| ·生物信息学 | 第16-18页 |
| ·生物学实验方法 | 第18-23页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第19-22页 |
| ·Western blot 方法 | 第22-23页 |
| 2 多功能 miRNA— miR155 | 第23-24页 |
| ·miR155 参与炎症反应 | 第23页 |
| ·miR155 对肿瘤发生的作用 | 第23-24页 |
| ·miR155 与白血病 | 第24页 |
| 3 有关 UHRFl 的研究 | 第24-25页 |
| 4 分子毒理学 | 第25-28页 |
| ·分子毒理学与基因表达研究 | 第25页 |
| ·农药 | 第25-27页 |
| ·氟虫腈 | 第26-27页 |
| ·斑马鱼 | 第27-28页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第28-30页 |
| 1 研究目的和意义 | 第28页 |
| 2 研究主要内容 | 第28-29页 |
| 3 实验流程图 | 第29-30页 |
| 第三章 材料与方法 | 第30-42页 |
| 1 材料与试剂 | 第30-34页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·主要仪器及材料 | 第30-31页 |
| ·反转录茎环引物及 PCR 引物 | 第31-32页 |
| ·试剂及其来源 | 第32-34页 |
| 2 方法 | 第34-42页 |
| ·样本处理 | 第34页 |
| ·斑马鱼总 RNA 的提取 | 第34-35页 |
| ·总 RNA 的定量和完整性检测 | 第34-35页 |
| ·总 RNA 的 DNase I（RNase free）消化处理 | 第35页 |
| ·斑马鱼 miR155 靶基因筛选 | 第35-36页 |
| ·miRNA 茎环引物及 PCR 引物设计 | 第36-37页 |
| ·miRNA 茎环引物设计 | 第36页 |
| ·PCR 引物设计 | 第36-37页 |
| ·miRNA 和 mRNA 表达的检测和分析 | 第37-38页 |
| ·cDNA 第一链的合成（RT） | 第37-38页 |
| ·荧光定量 | 第38-39页 |
| ·miRNA 的表达的定量分析 | 第38页 |
| ·mRNA 的表达定量分析 | 第38页 |
| ·荧光定量 PCR 过程 | 第38-39页 |
| ·数据处理及统计分析 | 第39页 |
| ·蛋白提取、蛋白定量及 western blot | 第39-42页 |
| ·全鱼总蛋白提取 | 第39页 |
| ·斑马鱼蛋白定量（BCA 法测定蛋白浓度） | 第39-40页 |
| ·Western blot 具体步骤 | 第40-42页 |
| 第四章 结果与分析 | 第42-57页 |
| 1 总 RNA 样本质量的检测 | 第42页 |
| 2 miR155 靶基因预测 | 第42-51页 |
| ·miR155 生物学分析 | 第43-44页 |
| ·UHRF1 生物信息学分析 | 第44-51页 |
| ·斑马鱼 UHRF1 基因序列 | 第44页 |
| ·UHRF1 蛋白卷曲螺旋预测 | 第44-45页 |
| ·UHRF1 蛋白保守结构域预测 | 第45页 |
| ·UHRF1 蛋白二级结构预测 | 第45-46页 |
| ·UHRF1 蛋白氨基酸疏水性/亲水性预测 | 第46-47页 |
| ·UHRF1 蛋白信号肽预测 | 第47-49页 |
| ·斑马鱼 UHRF1 蛋白同源性的分析与进化树的构建 | 第49-50页 |
| ·UHRF1 蛋白定位预测 | 第50-51页 |
| ·miR155 结合位点预测 | 第51页 |
| 3 miR155 及其潜在靶基因 UHRF1 荧光定量结果 | 第51-54页 |
| ·不同处理斑马鱼 miR155，UHRF1 的差异性表达分析 | 第52-54页 |
| ·miR155 和及其潜在靶基因 UHRF1 的相对表达变化量软件分析 | 第54页 |
| 4 UHRF1 蛋白表达的检测与分析 | 第54-57页 |
| ·蛋白定量标准曲线绘制 | 第54-55页 |
| ·斑马鱼样本蛋白浓度测定 | 第55页 |
| ·UHRF1 蛋白化学发光显影结果及软件分析 | 第55-57页 |
| 第五章 讨论和分析 | 第57-59页 |
| 第六章 总结与展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 附录一 重要试剂的配制 | 第63-68页 |
