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新型重组人干扰素类似物的表达、纯化及活性测定

中文摘要第1-6页
Abstract第6-14页
第1章 前言第14-24页
   ·干扰素简介第14-15页
   ·III 型干扰素第15-22页
     ·III 型干扰素简介第15-17页
     ·III 型干扰素的表达模式第17-19页
     ·III 型干扰素的受体及信号通路第19-20页
     ·III 型干扰素的抗病毒活性第20-21页
     ·III 型干扰素的优势和前景第21-22页
   ·本课题的目的意义和设计思路第22-24页
     ·目的意义第22-23页
     ·设计思路第23-24页
第2章 新型重组人干扰素类似物表达载体的构建第24-44页
   ·序言第24-25页
     ·实验流程第24页
     ·重叠 PCR 技术原理第24页
     ·T-A 克隆方法原理第24-25页
     ·蓝白斑筛选原理第25页
   ·实验材料第25-28页
     ·材料第25-26页
     ·仪器第26-27页
     ·溶液的配制第27-28页
   ·实验方法第28-34页
     ·设计合成引物第28页
     ·重叠 PCR第28-30页
     ·T-A 克隆第30-31页
     ·提取质粒 DNA第31-32页
     ·酶切、连接反应第32-33页
     ·提取质粒 DNA第33-34页
     ·基因测序第34页
     ·转化 BL21 感受态细胞第34页
   ·结果讨论第34-42页
     ·重叠 PCR第34-35页
     ·T-A 克隆菌落 PCR 鉴定第35-39页
     ·酶切、连接反应及菌落 PCR 鉴定第39-42页
     ·基因测序第42页
   ·本章小结第42-44页
第3章 新型重组人干扰素类似物的表达纯化第44-57页
   ·序言第44-45页
     ·实验流程第44页
     ·IPTG 诱导蛋白表达原理第44页
     ·蛋白复性简介第44页
     ·蛋白纯化简介第44-45页
   ·实验材料第45-47页
     ·试剂第45页
     ·仪器第45-46页
     ·溶液的配制第46-47页
   ·实验方法第47-50页
     ·小体系诱导蛋白表达、保藏菌种第47-48页
     ·蛋白诱导表达第48-49页
     ·收集、溶解包涵体第49页
     ·蛋白复性第49页
     ·蛋白纯化第49-50页
   ·结果讨论第50-56页
     ·IPTG 诱导重组蛋白表达第50-51页
     ·蛋白纯化第51-56页
   ·本章小结第56-57页
第4章 新型重组人干扰素类似物抗病毒活性的测定第57-69页
   ·序言第57-58页
     ·实验流程第57页
     ·MTT 比色法原理第57页
     ·荧光定量 PCR(SYBR Green I 法)原理第57-58页
     ·Mx 和 OAS第58页
   ·实验材料第58-61页
     ·材料第58-59页
     ·仪器第59页
     ·溶液的配制第59-61页
   ·实验方法第61-65页
     ·细胞培养第61页
     ·蛋白样品处理细胞第61-62页
     ·收集细胞第62-63页
     ·MTT 比色法第63页
     ·提取细胞总 RNA第63-64页
     ·荧光半定量 PCR(SYBR Green I 法)第64页
     ·荧光半定量 PCR 数据分析第64-65页
   ·结果讨论第65-68页
     ·MTT 比色法第65页
     ·细胞总 RNA 提取第65-66页
     ·荧光半定量 PCR第66-68页
   ·本章小结第68-69页
第5章 结论第69-71页
参考文献第71-77页
附录第77-79页
作者简介第79-80页
致谢第80页

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