中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-14页 |
第1章 前言 | 第14-24页 |
·干扰素简介 | 第14-15页 |
·III 型干扰素 | 第15-22页 |
·III 型干扰素简介 | 第15-17页 |
·III 型干扰素的表达模式 | 第17-19页 |
·III 型干扰素的受体及信号通路 | 第19-20页 |
·III 型干扰素的抗病毒活性 | 第20-21页 |
·III 型干扰素的优势和前景 | 第21-22页 |
·本课题的目的意义和设计思路 | 第22-24页 |
·目的意义 | 第22-23页 |
·设计思路 | 第23-24页 |
第2章 新型重组人干扰素类似物表达载体的构建 | 第24-44页 |
·序言 | 第24-25页 |
·实验流程 | 第24页 |
·重叠 PCR 技术原理 | 第24页 |
·T-A 克隆方法原理 | 第24-25页 |
·蓝白斑筛选原理 | 第25页 |
·实验材料 | 第25-28页 |
·材料 | 第25-26页 |
·仪器 | 第26-27页 |
·溶液的配制 | 第27-28页 |
·实验方法 | 第28-34页 |
·设计合成引物 | 第28页 |
·重叠 PCR | 第28-30页 |
·T-A 克隆 | 第30-31页 |
·提取质粒 DNA | 第31-32页 |
·酶切、连接反应 | 第32-33页 |
·提取质粒 DNA | 第33-34页 |
·基因测序 | 第34页 |
·转化 BL21 感受态细胞 | 第34页 |
·结果讨论 | 第34-42页 |
·重叠 PCR | 第34-35页 |
·T-A 克隆菌落 PCR 鉴定 | 第35-39页 |
·酶切、连接反应及菌落 PCR 鉴定 | 第39-42页 |
·基因测序 | 第42页 |
·本章小结 | 第42-44页 |
第3章 新型重组人干扰素类似物的表达纯化 | 第44-57页 |
·序言 | 第44-45页 |
·实验流程 | 第44页 |
·IPTG 诱导蛋白表达原理 | 第44页 |
·蛋白复性简介 | 第44页 |
·蛋白纯化简介 | 第44-45页 |
·实验材料 | 第45-47页 |
·试剂 | 第45页 |
·仪器 | 第45-46页 |
·溶液的配制 | 第46-47页 |
·实验方法 | 第47-50页 |
·小体系诱导蛋白表达、保藏菌种 | 第47-48页 |
·蛋白诱导表达 | 第48-49页 |
·收集、溶解包涵体 | 第49页 |
·蛋白复性 | 第49页 |
·蛋白纯化 | 第49-50页 |
·结果讨论 | 第50-56页 |
·IPTG 诱导重组蛋白表达 | 第50-51页 |
·蛋白纯化 | 第51-56页 |
·本章小结 | 第56-57页 |
第4章 新型重组人干扰素类似物抗病毒活性的测定 | 第57-69页 |
·序言 | 第57-58页 |
·实验流程 | 第57页 |
·MTT 比色法原理 | 第57页 |
·荧光定量 PCR(SYBR Green I 法)原理 | 第57-58页 |
·Mx 和 OAS | 第58页 |
·实验材料 | 第58-61页 |
·材料 | 第58-59页 |
·仪器 | 第59页 |
·溶液的配制 | 第59-61页 |
·实验方法 | 第61-65页 |
·细胞培养 | 第61页 |
·蛋白样品处理细胞 | 第61-62页 |
·收集细胞 | 第62-63页 |
·MTT 比色法 | 第63页 |
·提取细胞总 RNA | 第63-64页 |
·荧光半定量 PCR(SYBR Green I 法) | 第64页 |
·荧光半定量 PCR 数据分析 | 第64-65页 |
·结果讨论 | 第65-68页 |
·MTT 比色法 | 第65页 |
·细胞总 RNA 提取 | 第65-66页 |
·荧光半定量 PCR | 第66-68页 |
·本章小结 | 第68-69页 |
第5章 结论 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-77页 |
附录 | 第77-79页 |
作者简介 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |