摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
1 引言 | 第15-29页 |
·犬瘟热病毒概况 | 第15-16页 |
·犬瘟热病原 | 第15页 |
·犬瘟热病毒的分离培养 | 第15-16页 |
·犬瘟热病毒结构蛋白及其功能 | 第16-19页 |
·血凝蛋白(Hemagglutinin Protein,H) | 第16-17页 |
·融合蛋白(Fusion Protein,F) | 第17-18页 |
·核衣壳蛋白(Nucleocapsid Protein,N) | 第18页 |
·其它结构蛋白及功能 | 第18页 |
·抗原表位 | 第18-19页 |
·犬瘟热病毒的检测方法 | 第19-20页 |
·形态学观察 | 第19页 |
·免疫学方法 | 第19-20页 |
·核酸检测 | 第20页 |
·犬瘟热的防治 | 第20-22页 |
·疫苗免疫 | 第21页 |
·临床治疗 | 第21-22页 |
·环介导等温扩增(LAMP) | 第22-24页 |
·LAMP原理 | 第22-23页 |
·LAMP方法特点 | 第23页 |
·LAMP的应用 | 第23-24页 |
·卵黄抗体 | 第24-27页 |
·卵黄抗体的形成 | 第24页 |
·卵黄抗体的结构 | 第24-25页 |
·卵黄抗体的特点 | 第25-26页 |
·IgY的提取、分离和纯化 | 第26页 |
·卵黄抗体的应用 | 第26-27页 |
·研究目的与意义 | 第27-29页 |
2 材料与方法 | 第29-40页 |
·实验材料 | 第29-30页 |
·细菌菌株、质粒载体、病毒株 | 第29页 |
·病料来源 | 第29页 |
·实验动物及细胞系 | 第29页 |
·主要试剂 | 第29-30页 |
·主要仪器 | 第30页 |
·实验方法 | 第30-40页 |
·CDV分离鉴定 | 第30-32页 |
·CDV H基因克隆及序列分析 | 第32-33页 |
·CDV N基因LAMP检测方法的建立 | 第33-35页 |
·串联表位卵黄抗体中和效力评价 | 第35-40页 |
3 结果 | 第40-67页 |
·CDV分离鉴定 | 第40-43页 |
·细胞病变 | 第40-41页 |
·病毒形态学鉴定 | 第41页 |
·RT-PCR鉴定 | 第41-42页 |
·间接免疫荧光鉴定 | 第42页 |
·胶体金试纸条检测 | 第42-43页 |
·CDV H基因克隆及序列分析 | 第43-52页 |
·CDV H基因扩增 | 第43页 |
·CDV H重组质粒的PCR及酶切鉴定 | 第43-46页 |
·H基因核苷酸序列分析 | 第46-48页 |
·H基因氨基酸序列分析 | 第48-50页 |
·抗原表位差异性分析 | 第50-52页 |
·CDV N基因LAMP检测方法建立 | 第52-56页 |
·LAMP扩增产物的检测 | 第52-53页 |
·LAMP反应温度的筛选 | 第53页 |
·LAMP反应时间的筛选 | 第53-54页 |
·LAMP特异性试验 | 第54页 |
·RT-PCR、犬瘟热病毒抗原快速检测试纸、LAMP灵敏度比较 | 第54-56页 |
·临床样本检测 | 第56页 |
·串联表位卵黄抗体中和效力评价 | 第56-67页 |
·合成质粒及串联表位酶切鉴定 | 第56-58页 |
·4F-3L-6His-TAA重组表达质粒酶切鉴定 | 第58页 |
·表位串联蛋白的诱导表达、纯化及Western blot鉴定 | 第58-62页 |
·卵黄抗体效价检测 | 第62-63页 |
·卵黄抗体结合试验 | 第63-64页 |
·卵黄抗体中和效力评价 | 第64-67页 |
4 讨论 | 第67-71页 |
·犬瘟热病毒分离培养细胞系 | 第67页 |
·CDV流行毒株遗传变异 | 第67-68页 |
·LAMP技术 | 第68-69页 |
·表位串联策略 | 第69-70页 |
·串联表位卵黄抗体中和效力评价 | 第70-71页 |
5 结论 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-81页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第81页 |