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犬瘟热病毒LAMP检测方法建立及其串联表位卵黄抗体中和效力初步研究

摘要第1-12页
Abstract第12-15页
1 引言第15-29页
   ·犬瘟热病毒概况第15-16页
     ·犬瘟热病原第15页
     ·犬瘟热病毒的分离培养第15-16页
   ·犬瘟热病毒结构蛋白及其功能第16-19页
     ·血凝蛋白(Hemagglutinin Protein,H)第16-17页
     ·融合蛋白(Fusion Protein,F)第17-18页
     ·核衣壳蛋白(Nucleocapsid Protein,N)第18页
     ·其它结构蛋白及功能第18页
     ·抗原表位第18-19页
   ·犬瘟热病毒的检测方法第19-20页
     ·形态学观察第19页
     ·免疫学方法第19-20页
     ·核酸检测第20页
   ·犬瘟热的防治第20-22页
     ·疫苗免疫第21页
     ·临床治疗第21-22页
   ·环介导等温扩增(LAMP)第22-24页
     ·LAMP原理第22-23页
     ·LAMP方法特点第23页
     ·LAMP的应用第23-24页
   ·卵黄抗体第24-27页
     ·卵黄抗体的形成第24页
     ·卵黄抗体的结构第24-25页
     ·卵黄抗体的特点第25-26页
     ·IgY的提取、分离和纯化第26页
     ·卵黄抗体的应用第26-27页
   ·研究目的与意义第27-29页
2 材料与方法第29-40页
   ·实验材料第29-30页
     ·细菌菌株、质粒载体、病毒株第29页
     ·病料来源第29页
     ·实验动物及细胞系第29页
     ·主要试剂第29-30页
     ·主要仪器第30页
   ·实验方法第30-40页
     ·CDV分离鉴定第30-32页
     ·CDV H基因克隆及序列分析第32-33页
     ·CDV N基因LAMP检测方法的建立第33-35页
     ·串联表位卵黄抗体中和效力评价第35-40页
3 结果第40-67页
   ·CDV分离鉴定第40-43页
     ·细胞病变第40-41页
     ·病毒形态学鉴定第41页
     ·RT-PCR鉴定第41-42页
     ·间接免疫荧光鉴定第42页
     ·胶体金试纸条检测第42-43页
   ·CDV H基因克隆及序列分析第43-52页
     ·CDV H基因扩增第43页
     ·CDV H重组质粒的PCR及酶切鉴定第43-46页
     ·H基因核苷酸序列分析第46-48页
     ·H基因氨基酸序列分析第48-50页
     ·抗原表位差异性分析第50-52页
   ·CDV N基因LAMP检测方法建立第52-56页
     ·LAMP扩增产物的检测第52-53页
     ·LAMP反应温度的筛选第53页
     ·LAMP反应时间的筛选第53-54页
     ·LAMP特异性试验第54页
     ·RT-PCR、犬瘟热病毒抗原快速检测试纸、LAMP灵敏度比较第54-56页
     ·临床样本检测第56页
   ·串联表位卵黄抗体中和效力评价第56-67页
     ·合成质粒及串联表位酶切鉴定第56-58页
     ·4F-3L-6His-TAA重组表达质粒酶切鉴定第58页
     ·表位串联蛋白的诱导表达、纯化及Western blot鉴定第58-62页
     ·卵黄抗体效价检测第62-63页
     ·卵黄抗体结合试验第63-64页
     ·卵黄抗体中和效力评价第64-67页
4 讨论第67-71页
   ·犬瘟热病毒分离培养细胞系第67页
   ·CDV流行毒株遗传变异第67-68页
   ·LAMP技术第68-69页
   ·表位串联策略第69-70页
   ·串联表位卵黄抗体中和效力评价第70-71页
5 结论第71-72页
致谢第72-73页
参考文献第73-81页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第81页

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