| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| ·干扰素概述 | 第11-12页 |
| ·干扰素的来源与发现 | 第11页 |
| ·干扰素的分类与特点 | 第11-12页 |
| ·干扰素的功能与应用 | 第12页 |
| ·干扰素α概述 | 第12-14页 |
| ·干扰素α的结构特点 | 第12-13页 |
| ·干扰素α的生物学活性 | 第13页 |
| ·干扰素α的抗病毒机理 | 第13-14页 |
| ·牛α干扰素研究概况 | 第14-15页 |
| ·重组蛋白的具活性表达 | 第15-18页 |
| ·重组蛋白在大肠杆菌中的具活性表达 | 第15-17页 |
| ·重组蛋白在巴斯德毕赤酵母中的表达 | 第17-18页 |
| ·研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-42页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·质粒、宿主菌、病毒 | 第19页 |
| ·细胞、培养基、血清 | 第19页 |
| ·酶和生化试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器和设备 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-42页 |
| ·牛α干扰素A亚型在大肠杆菌周质分泌系统中的活性表达与鉴定 | 第20-27页 |
| ·牛α干扰素A亚型在大肠杆菌内含肽融合标签系统中的活性表达与鉴定 | 第27-36页 |
| ·牛α干扰素A亚型在巴斯德毕赤酵母分泌系统中的活性表达与鉴定 | 第36-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-67页 |
| ·牛α干扰素A亚型在大肠杆菌周质分泌系统中的活性表达与鉴定 | 第42-48页 |
| ·周质分泌型表达载体的构建 | 第42-44页 |
| ·周质分泌型表达载体的蛋白表达与鉴定 | 第44页 |
| ·VSV和BVDV在MDBK细胞上的TCID_(50) | 第44-45页 |
| ·周质分泌表达系统蛋白抗病毒活性测定 | 第45-46页 |
| ·牛α干扰素A亚型的多克隆抗体的效价检测 | 第46-47页 |
| ·周质分泌表达系统蛋白的抗病毒活性阻断分析 | 第47-48页 |
| ·牛α干扰素A亚型在大肠杆菌内含肽融合标签系统中的活性表达与鉴定 | 第48-60页 |
| ·大肠杆菌内含肽麦芽糖结合蛋白表达载体的活性表达与鉴定 | 第48-56页 |
| ·大肠杆菌内含肽冷激表达载体的活性表达与鉴定 | 第56-60页 |
| ·牛α干扰素A亚型在巴斯德毕赤酵母分泌系统中的活性表达与鉴定 | 第60-67页 |
| ·牛全基因组的提取 | 第60-61页 |
| ·牛α干扰素A亚型基因的扩增 | 第61页 |
| ·含有BoIFN-α基因的毕赤酵母表达载体的构建 | 第61-62页 |
| ·重组毕赤酵母的PCR鉴定 | 第62页 |
| ·重组酵母蛋白表达量的比较 | 第62-63页 |
| ·重组酵母优势菌株的诱导表达 | 第63-64页 |
| ·重组毕赤酵母的表达蛋白的Western blot鉴定 | 第64-65页 |
| ·重组毕赤酵母的表达蛋白的抗病毒活性检测 | 第65-66页 |
| ·重组毕赤酵母的表达蛋白的抗病毒活性阻断分析 | 第66-67页 |
| 4 讨论 | 第67-70页 |
| ·牛α干扰素A亚型基因的克隆 | 第67页 |
| ·无冗余氨基酸牛α干扰素A亚型的获得 | 第67页 |
| ·内含肽融合与自我剪切机制 | 第67-68页 |
| ·真核分泌表达载体的构建 | 第68页 |
| ·表达蛋白的糖基化影响 | 第68-69页 |
| ·牛α干扰素A亚型在三种表达策略中的比较 | 第69-70页 |
| 5 结论 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第76页 |
