| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 目次 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-28页 |
| 1. 发根农杆菌与毛状根 | 第12-26页 |
| ·发根农杆菌的生物学特性与分类 | 第12-13页 |
| ·Ri质粒的结构、功能及毛状根诱导的分子机理 | 第13-16页 |
| ·发根农杆菌的转基因策略 | 第16-18页 |
| ·发根农杆菌的转基因方法 | 第18-19页 |
| ·转基因毛状根的培养与繁殖 | 第19-20页 |
| ·转基因毛状根及再生植株的鉴定 | 第20-21页 |
| ·发根农杆菌介导转基因毛状根诱导的影响因素 | 第21-23页 |
| ·毛状根的应用 | 第23-26页 |
| 2 本论文课题的提出 | 第26-28页 |
| 第二章 发根农杆菌K599侵染黄瓜不同外植体产生毛状根的研究 | 第28-38页 |
| 1 材料与试剂 | 第28页 |
| 2. 实验方法 | 第28-32页 |
| ·发根农杆菌K599侵染离体子叶、上胚轴、下胚轴诱导生根 | 第28-30页 |
| ·发根农杆菌K599侵染活体子叶、上胚轴、下胚轴诱导生根 | 第30页 |
| ·转基因毛状根的荧光观察 | 第30页 |
| ·转基因毛状根的分子检测 | 第30-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-36页 |
| ·发根农杆菌K599侵染黄瓜不同外植体及毛状根的产生 | 第32-34页 |
| ·转基因毛状根的荧光观察与分子鉴定 | 第34-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 黄瓜转基因毛状根中T-DNA插入整合完整性的初步分析 | 第38-44页 |
| 1 材料与试剂 | 第38页 |
| 2 实验方法 | 第38-40页 |
| ·引物设计 | 第38-39页 |
| ·转基因毛状根基因组DNA提取 | 第39页 |
| ·转基因毛状根的分子检测 | 第39-40页 |
| 3 实验结果 | 第40-43页 |
| ·除菌分析 | 第40-41页 |
| ·T-DNA整合完整性分析 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-44页 |
| 第四章 长期培养的黄瓜毛状根中外源基因遗传稳定性的分析 | 第44-51页 |
| 1 材料与试剂 | 第44-45页 |
| 2 实验方法 | 第45-47页 |
| ·毛状根的继代培养 | 第45页 |
| ·gfp基因和rol(root loci)位点系列基因的PCR扩增 | 第45-46页 |
| ·gfp基因的荧光定量PCR分析 | 第46页 |
| ·Western blot杂交以及荧光观察 | 第46-47页 |
| 3 实验结果 | 第47-49页 |
| ·长期培养的毛状根中gfp基因和rol系列基因PCR扩增结果 | 第47页 |
| ·长期培养的毛状根中加基因的表达结果 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 第五章 发根农杆菌K599 org14基因的克隆 | 第51-61页 |
| 1 材料与试剂 | 第51页 |
| 2 实验方法 | 第51-58页 |
| ·orf14基因的克隆 | 第51-55页 |
| ·植物转基因表达载体PRI101-AN-orf14-gfp的构建 | 第55-58页 |
| 3 实验结果 | 第58-60页 |
| ·orf14基因的克隆和测序分析 | 第58-59页 |
| ·植物转基因表达载体pRI101-AN-orf14-gfp的构建 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 附录一 英文缩写 | 第68-69页 |
| 附录二 常用培养基和抗生素配制方法 | 第69-71页 |
| 作者简介及科研成果 | 第71页 |
