| 摘要 | 第1-14页 |
| ABSTRACT | 第14-19页 |
| 符号说明及缩写词 | 第19-20页 |
| 第一章 绪论 | 第20-40页 |
| ·乳酸菌 | 第20-24页 |
| ·乳酸菌简介 | 第20页 |
| ·乳杆菌分类 | 第20-21页 |
| ·乳杆菌在乳制品发酵中的应用 | 第21-23页 |
| ·德氏乳杆菌保加利亚亚种 | 第23-24页 |
| ·噬菌体 | 第24-26页 |
| ·噬菌体分类 | 第24-25页 |
| ·乳杆菌噬菌体 | 第25-26页 |
| ·乳酸菌中的噬菌体防御系统 | 第26-32页 |
| ·常见防御系统 | 第26-30页 |
| ·干扰噬菌体吸附(Adsorption inhibition,Ads) | 第26-28页 |
| ·阻止噬菌体DNA的注入(injection blocking system) | 第28页 |
| ·限制修饰系统(R/M系统) | 第28-29页 |
| ·流产感染系统(Abortive infection,Abi) | 第29-30页 |
| ·CASS一噬菌体防御新系统 | 第30-32页 |
| ·L.bulgaricus ATCC11842存在的可能噬菌体防御系统 | 第32页 |
| ·噬菌体裂解机制 | 第32-39页 |
| ·裂解盒简介 | 第32-34页 |
| ·Holin-endolysin裂解机制模型 | 第34-35页 |
| ·Holin控制裂解时间模型 | 第35-39页 |
| ·本文研究内容 | 第39-40页 |
| 第二章 德氏乳杆菌烈性噬菌体(phiLdb)的分离及性质研究 | 第40-56页 |
| ·引言 | 第40页 |
| ·材料与方法 | 第40-46页 |
| ·菌株 | 第40页 |
| ·培养基及试剂 | 第40-41页 |
| ·噬菌体的分离 | 第41-42页 |
| ·噬菌体宿主范围测定 | 第42页 |
| ·噬菌体颗粒形态观察 | 第42页 |
| ·噬菌体的大量繁殖 | 第42页 |
| ·噬菌体的浓缩 | 第42-43页 |
| ·噬菌体基因组DNA的提取 | 第43页 |
| ·噬菌体基因组包装机制研究 | 第43页 |
| ·一步生长曲线测定 | 第43-44页 |
| ·二价阳离子对噬菌体裂解循环的影响 | 第44页 |
| ·噬菌体的稳定性 | 第44页 |
| ·L.bulgaricus ATCC11842的稳定性 | 第44-45页 |
| ·噬菌体吸附性质研究 | 第45-46页 |
| ·结果 | 第46-52页 |
| ·噬菌体的分离及宿主范围 | 第46页 |
| ·噬菌体形态观察 | 第46-47页 |
| ·噬菌体限制性酶切图谱及包装机制 | 第47-48页 |
| ·一步生长曲线 | 第48页 |
| ·二价阳离子对裂解循环的影响 | 第48-49页 |
| ·噬菌体稳定性研究 | 第49-50页 |
| ·L.bulgaricus ATCC11842的稳定性 | 第50-51页 |
| ·噬菌体吸附性质研究 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-56页 |
| 第三章 噬菌体保存方法研究 | 第56-62页 |
| ·引言 | 第56页 |
| ·材料及方法 | 第56-58页 |
| ·噬菌体及其宿主菌 | 第56页 |
| ·培养基及试剂 | 第56-57页 |
| ·噬菌体增殖 | 第57页 |
| ·保存剂及保存方法 | 第57页 |
| ·噬菌体裂解活性检测 | 第57-58页 |
| ·结果 | 第58-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| 第四章 德氏乳杆菌抗噬菌体菌株的选育及性质研究 | 第62-74页 |
| ·引言 | 第62页 |
| ·材料与方法 | 第62-67页 |
| ·菌株及噬菌体 | 第62页 |
| ·培养基及试剂 | 第62-63页 |
| ·自发突变抗噬菌体菌株的分离 | 第63页 |
| ·γ射线诱变抗噬菌体菌株的分离 | 第63-64页 |
| ·PCR-ARAPD | 第64-65页 |
| ·抗性菌株抗噬菌体特征 | 第65页 |
| ·噬菌体对抗性菌株的吸附测定 | 第65-66页 |
| ·噬菌体phiLdb受体分析 | 第66页 |
| ·抗噬菌体菌株的形态观察 | 第66页 |
| ·抗噬菌体菌株的发酵性能 | 第66-67页 |
| ·结果 | 第67-72页 |
| ·抗噬菌体菌株的分离 | 第67页 |
| ·PCR-ARAPD | 第67-68页 |
| ·抗性菌株抗噬菌体特征 | 第68页 |
| ·噬菌体对抗性菌株吸附测定 | 第68-69页 |
| ·抗性菌株形态观察 | 第69-70页 |
| ·抗噬菌体菌株的发酵性能 | 第70-72页 |
| ·讨论 | 第72-74页 |
| 第五章 可控性自裂解乳球菌的构建 | 第74-82页 |
| ·引言 | 第74页 |
| ·材料与方法 | 第74-77页 |
| ·菌株和质粒 | 第75页 |
| ·培养基和试剂 | 第75页 |
| ·方法 | 第75-77页 |
| ·hyb5-lyb5裂解盒基因的扩增 | 第75-76页 |
| ·重组载体构建 | 第76页 |
| ·乳酸乳球菌感受态制备 | 第76页 |
| ·乳酸乳球菌电转化 | 第76-77页 |
| ·Hyb5和Lyb5的诱导表达及活性检测 | 第77页 |
| ·结果 | 第77-80页 |
| ·重组质粒构建 | 第77-78页 |
| ·诱导过程中NZph1及NZp的生长变化 | 第78-79页 |
| ·SDS-PAGE(SDS-polyacrylamide gel electrophoresis)分析 | 第79-80页 |
| ·讨论 | 第80-82页 |
| 第六章 发酵乳杆菌温和噬菌体(?)PYB5编码的两组分细胞裂解盒的鉴定及性质研究 | 第82-96页 |
| ·引言 | 第82-83页 |
| ·材料与方法 | 第83-87页 |
| ·菌株和质粒 | 第83页 |
| ·培养基和试剂 | 第83-84页 |
| ·方法 | 第84-87页 |
| ·基因(hyb5-lyb5)的获得及分析 | 第84页 |
| ·基因(hyb5-lyb5和hyb5-lyb5)扩增 | 第84-85页 |
| ·重组载体构建 | 第85页 |
| ·重组菌的诱导表达及SDS-PAGE | 第85页 |
| ·OD值及半乳糖苷酶活性测定 | 第85-86页 |
| ·Lyb5胞外裂解活性测定 | 第86页 |
| ·Zymogram分析及Lyb5抗菌谱测定 | 第86-87页 |
| ·结果 | 第87-94页 |
| ·温和噬菌体(?)PYB5"两组分裂解盒"的鉴定 | 第87-88页 |
| ·hyb5,lyb5和hyb5-lyb5在大肠杆菌中的表达 | 第88-91页 |
| ·SDS-PAGE | 第88-89页 |
| ·重组菌株OD值变化 | 第89-90页 |
| ·半乳糖苷酶活性检测 | 第90-91页 |
| ·Lyb5胞外裂解活性检测 | 第91-93页 |
| ·双层平板分析 | 第91-92页 |
| ·Zymogram分析 | 第92-93页 |
| ·Lyb5抗菌谱测定 | 第93-94页 |
| ·讨论 | 第94-96页 |
| 第七章 Hyb5-Lyb5裂解机制的初步探测 | 第96-106页 |
| ·引言 | 第96页 |
| ·材料与方法 | 第96-99页 |
| ·质粒与菌株 | 第96页 |
| ·培养基与试剂 | 第96-97页 |
| ·重组载体构建 | 第97-99页 |
| ·重组载体构建示意图 | 第97页 |
| ·基因扩增 | 第97-99页 |
| ·目的DNA及载体的酶切、连接及转化 | 第99页 |
| ·重组菌的诱导表达,SDS-PAGE及OD值测定 | 第99页 |
| ·结果 | 第99-104页 |
| ·Lyb5序列分析 | 第99-100页 |
| ·SAR功能探测 | 第100-102页 |
| ·OD值测定及SDS-PAGE | 第100-101页 |
| ·SAR序列对Lyb5裂解活性的影响 | 第101-102页 |
| ·Hyb5控制裂解时间机制的初步研究 | 第102-104页 |
| ·Hyb5 N-端跨膜区作用 | 第102-103页 |
| ·Hyb5不同片段活性比较 | 第103-104页 |
| ·讨论 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-118页 |
| 攻读博士学位论文期间发表论文 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 外文写作 | 第120-149页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第149页 |
