| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-21页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌的分类和生理学特性 | 第11-13页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌的特性 | 第11页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌的脱氢酶系统 | 第11-13页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌的代谢途径 | 第13-15页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌的胞内代谢途径 | 第13-14页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌的胞外代谢途径 | 第14-15页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌的工业应用 | 第15-20页 |
| ·二羟基丙酮的生产 | 第15页 |
| ·维生素C的发酵生产(vitamin C) | 第15-17页 |
| ·D-葡萄糖酸的生产 | 第17-18页 |
| ·合成米格列醇 | 第18-19页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌的其他应用 | 第19-20页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌对葡萄糖代谢 | 第20页 |
| ·本课题研究的主要内容 | 第20-21页 |
| 第2章 氧化葡萄糖酸杆菌膜结合葡萄糖脱氢酶的敲除 | 第21-35页 |
| ·引言 | 第21页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·菌株与质粒 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21-22页 |
| ·酶和试剂 | 第22-23页 |
| ·实验仪器 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-28页 |
| ·氧化葡萄糖酸杆菌总基因组的提取 | 第23-24页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取 | 第24页 |
| ·大肠杆菌JM109感受态的制备 | 第24-25页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第25页 |
| ·PCR产物纯化 | 第25页 |
| ·目的条带的胶回收 | 第25-26页 |
| ·常规PCR反应 | 第26-27页 |
| ·DNA的酶切与连接 | 第27页 |
| ·三亲本接合转移 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-34页 |
| ·基因片段的扩增 | 第28-29页 |
| ·敲除载体的构建 | 第29-30页 |
| ·三亲本接合以及敲除突变体的筛选 | 第30-31页 |
| ·突变体的验证 | 第31-32页 |
| ·敲除菌GDHK mgdh基因的回补 | 第32-34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第3章 氧化葡萄糖酸杆菌GDHK的生长和催化性能研究 | 第35-46页 |
| ·引言 | 第35页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·菌种 | 第35页 |
| ·药品和培养基 | 第35页 |
| ·实验仪器 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-39页 |
| ·生长的测定 | 第36-37页 |
| ·催化反应 | 第37-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-45页 |
| ·G.oxydans 621H和敲除菌GDHK在葡萄糖培养基中的生长情况 | 第39-41页 |
| ·敲除菌GDHK的生长代谢 | 第41-42页 |
| ·原始菌621H和敲除菌GDHK在不同碳源培养基上的催化效果比较 | 第42-45页 |
| ·本章结论 | 第45-46页 |
| 第4章 氧化葡萄糖酸杆菌的葡萄糖利用途径研究 | 第46-60页 |
| ·引言 | 第46-47页 |
| ·实验材料 | 第47-48页 |
| ·菌株与质粒 | 第47-48页 |
| ·培养基 | 第48页 |
| ·酶和试剂 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-51页 |
| ·荧光定量PCR | 第48-50页 |
| ·glkw,sgdh,galpz基因的敲除实验 | 第50-51页 |
| ·实验结论 | 第51-57页 |
| ·RT-PCR的结论 | 第51-53页 |
| ·glkw,galpz,和sgdh基因敲除 | 第53-57页 |
| ·基因敲除对菌体生长代谢的影响 | 第57-58页 |
| ·本章结论 | 第58-60页 |
| 第5章 结论与展望 | 第60-62页 |
| ·结论 | 第60-61页 |
| ·展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 硕士期间论文发表情况 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
