| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 1 绪论 | 第11-19页 |
| ·植物的耐盐机理 | 第11-12页 |
| ·植物的盐害 | 第11-12页 |
| ·植物的耐盐性 | 第12页 |
| ·基因组学方法在植物耐盐机理研究中的应用 | 第12-15页 |
| ·EST分析技术及应用 | 第13-14页 |
| ·cDNA微阵列技术在植物抗逆研究中的应用 | 第14-15页 |
| ·耐盐基因分类及液泡型H~+-ATPase c亚基基因主要研究进展 | 第15-16页 |
| ·耐盐基因的分类 | 第15页 |
| ·液泡型H~+-ATPase c亚基基因功能研究进展 | 第15-16页 |
| ·二色补血草简介 | 第16-17页 |
| ·生物学特性 | 第16页 |
| ·作为耐盐研究材料的可行性 | 第16-17页 |
| ·本项研究的目的和意义 | 第17页 |
| ·研究的目的 | 第17页 |
| ·研究的意义 | 第17页 |
| ·本研究的主要内容及技术路线 | 第17-19页 |
| ·本研究的主要内容 | 第17页 |
| ·技术路线 | 第17-19页 |
| 2 NaHCO_3胁迫下二色补血草基因表达的研究 | 第19-51页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·酶及主要化学试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-32页 |
| ·二色补血草总RNA提取 | 第20-21页 |
| ·磁性球珠分离mRNA | 第21页 |
| ·cDNA第一、二链合成 | 第21-22页 |
| ·cDNA末端处理与分步收集 | 第22-24页 |
| ·cDNA连接与包装 | 第24-25页 |
| ·插入片段的PCR检测 | 第25页 |
| ·噬菌体的体外切除 | 第25-26页 |
| ·菌体培养与保存 | 第26-27页 |
| ·质粒提取 | 第27页 |
| ·cDNA序列的测定 | 第27-28页 |
| ·序列的编辑与分析 | 第28-29页 |
| ·cDNA芯片的制备 | 第29-30页 |
| ·荧光标记与芯片杂交 | 第30页 |
| ·数据分析 | 第30-31页 |
| ·cDNA芯片数据的可信度验证 | 第31-32页 |
| ·EST序列分析及二色补血草表达谱的建立 | 第32页 |
| ·结果与分析 | 第32-49页 |
| ·总RNA提取 | 第32页 |
| ·mRNA的分离 | 第32-33页 |
| ·cDNA文库的构建及质量检测 | 第33-34页 |
| ·cDNA文库测序 | 第34页 |
| ·cDNA文库ESTs分析 | 第34-37页 |
| ·cDNA芯片数据分析 | 第37-48页 |
| ·二色补血草耐盐途径分析 | 第48-49页 |
| ·本章小结 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 3 二色补血草VHA-c基因生物信息学分析及其在盐碱胁迫下的表达模式 | 第51-59页 |
| ·二色补血草VHA-c基因的生物信息学分析 | 第51-55页 |
| ·VHA-c亚基基因的序列分析 | 第51-52页 |
| ·VHA-c基因的疏水性预测 | 第52页 |
| ·VHA-c基因的跨膜区预测 | 第52-53页 |
| ·VHA-c基因多序列比对与分子进化树分析 | 第53-55页 |
| ·二色补血草VHA-c基因应答盐碱胁迫的表达模式 | 第55-57页 |
| ·材料处理 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55页 |
| ·结果与分析 | 第55-57页 |
| ·本章小结 | 第57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| 4 二色补血草VHA-c基因对烟草的遗传转化 | 第59-71页 |
| ·植物表达载体构建 | 第59-62页 |
| ·实验材料 | 第59页 |
| ·实验方法 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-62页 |
| ·根癌农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第62-63页 |
| ·实验材料 | 第62-63页 |
| ·实验方法 | 第63页 |
| ·转VHA-c基因烟草的分子检测 | 第63-71页 |
| ·试剂 | 第63-64页 |
| ·仪器设备 | 第64-65页 |
| ·实验方法 | 第65-68页 |
| ·结果与分析 | 第68-69页 |
| ·本章小结 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-71页 |
| 5 以烟草为载体的二色补血草VHA-c基因功能验证 | 第71-79页 |
| ·实验材料 | 第71页 |
| ·植物材料 | 第71页 |
| ·主要试剂 | 第71页 |
| ·仪器设备 | 第71页 |
| ·实验方法 | 第71-73页 |
| ·NaCl胁迫处理及取材 | 第71页 |
| ·超氧化歧化酶(SOD)活性测定 | 第71-72页 |
| ·过氧化物酶(POD)活性测定 | 第72-73页 |
| ·丙二醛(MDA)含量测定 | 第73页 |
| ·相对生长量测定 | 第73页 |
| ·相对含水量测定 | 第73页 |
| ·结果与分析 | 第73-78页 |
| ·NaCl胁迫下转VHA-c基因烟草SOD活性比较 | 第73-74页 |
| ·NaCl胁迫下转VHA-c基因烟草POD活性比较 | 第74-75页 |
| ·NaCl胁迫下转VHA-c基因烟草MDA含量比较 | 第75-77页 |
| ·NaCl胁迫下转VHA-c基因烟草相对生长量比较 | 第77页 |
| ·NaCl胁迫下转VHA-c基因烟草相对含水量比较 | 第77-78页 |
| ·本章小结 | 第78页 |
| ·讨论 | 第78-79页 |
| 6 讨论 | 第79-83页 |
| ·NaHCO_3胁迫二色补血草基因表达谱的建立 | 第79页 |
| ·二色补血草的耐盐途径分析 | 第79-80页 |
| ·二色补血草VHA-c基因及其在盐胁迫下的表达模式分析 | 第80页 |
| ·二色补血草VHA-c基因对烟草的遗传转化及耐盐性分析 | 第80-83页 |
| ·转基因烟草的耐盐性增强 | 第80-81页 |
| ·转基因烟草耐盐性提高与Northern杂交结果的相关性分析 | 第81-82页 |
| ·VHA-c基因功能评价 | 第82-83页 |
| 结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-92页 |
| 附录 | 第92-93页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-96页 |
