抗菌肽CAP18融合表达、条件优化以及活性的初步鉴定
| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-29页 |
| ·抗菌肽研究进展 | 第11-26页 |
| ·抗菌肽研究的历史背景 | 第11-12页 |
| ·抗菌肽的特性 | 第12-14页 |
| ·抗菌肽的功能 | 第14-17页 |
| ·抗菌肽的作用机制 | 第17-19页 |
| ·微生物的抗性机制 | 第19-21页 |
| ·抗菌肽与微生物抗性的联合进化过程 | 第21-25页 |
| ·抗菌肽的应用前景及其展望 | 第25-26页 |
| ·抗菌肽CAP18的研究进展 | 第26-28页 |
| ·研究目的及意义 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-47页 |
| ·试验材料 | 第29-34页 |
| ·菌株与质粒 | 第29-30页 |
| ·主要酶类及生化试剂 | 第30页 |
| ·DNA合成及测序 | 第30页 |
| ·溶液及培养基的配制 | 第30-33页 |
| ·主要仪器设备 | 第33-34页 |
| ·试验方法 | 第34-47页 |
| ·CAP18编码基因的获得 | 第34-36页 |
| ·CAP18编码基因的鉴定 | 第36-38页 |
| ·重组表达载体的构建与鉴定 | 第38-41页 |
| ·融合蛋白的表达 | 第41-43页 |
| ·常规表达条件的优化 | 第43-44页 |
| ·复合自动诱导培养基的使用及其优化 | 第44-45页 |
| ·CAP18融合蛋白的纯化 | 第45页 |
| ·CAP18融合蛋白的裂解 | 第45-46页 |
| ·抗菌肽活性的初步鉴定 | 第46-47页 |
| 3 试验结果 | 第47-60页 |
| ·CAP18编码基因的获得 | 第47页 |
| ·CAP18编码基因的鉴定 | 第47-48页 |
| ·重组表达载体的构建与鉴定 | 第48-50页 |
| ·重组表达载体的PCR鉴定 | 第48页 |
| ·重组表达载体的酶切鉴定 | 第48-50页 |
| ·重组质粒转入表达菌后的菌落PCR鉴定 | 第50页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第50页 |
| ·常规表达条件的优化 | 第50-52页 |
| ·最适诱导温度的确定 | 第51页 |
| ·诱导菌体最佳起始浓度的确定 | 第51页 |
| ·诱导剂IPTG最佳浓度的确定 | 第51-52页 |
| ·最佳诱导时间的确定 | 第52页 |
| ·复合自动诱导培养基的使用及其优化 | 第52-57页 |
| ·验证CAI表达外源蛋白的有效性 | 第52-53页 |
| ·LB培养基与CAI对外源蛋白表达量的影响 | 第53-54页 |
| ·复合自动诱导培养基的优化 | 第54-57页 |
| ·CAP18融合蛋白的纯化 | 第57-58页 |
| ·CAP18融合蛋白的切割 | 第58页 |
| ·抗菌肽活性的初步鉴定 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-71页 |
| ·编码基因的获得 | 第60-61页 |
| ·密码子的优化 | 第61-62页 |
| ·宿主细胞的选择 | 第62-63页 |
| ·融合表达载体的选择 | 第63-64页 |
| ·表达条件的优化 | 第64-66页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第66页 |
| ·融合蛋白的裂解 | 第66-69页 |
| ·抗菌肽的活性检测 | 第69-71页 |
| 5 结论 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-86页 |
| 附录 | 第86-89页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第89页 |
