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瓜氨酸化Ⅱ型胶原及其抗体在类风湿关节炎发病中作用的研究

提要第1-8页
英文缩写词表第8-9页
前言第9-19页
 一、瓜氨酸化与类风湿关节炎发病机制研究的历史与现状第9-17页
 二、本研究的目的及研究范围第17-19页
研究工作第19-76页
 第一部分 类风湿关节炎患者血清中抗瓜氨酸化Ⅱ型胶原抗体表达的研究第19-41页
  前言第19-20页
  材料与方法第20-29页
   材料第20-24页
    一、研究对象及分组第20页
    二、主要试剂和仪器第20-24页
   方法第24-29页
    一、CII 的瓜氨酸化第24页
    二、瓜氨酸化CII(Cit-CII)的鉴定第24-26页
    三、ELISA 方法检测血清中抗Cit-CII 和抗CII 抗体水平第26-27页
    四、Western blotting 方法检测血清中抗Cit-CII 抗体和抗CII 抗体第27-28页
    五、各项临床指标检测第28-29页
  结果第29-33页
   一、瓜氨酸化CII 的鉴定第29页
   二、血清抗Cit-CII 抗体和抗CII 抗体的检测第29-33页
   三、抗Cit-CII 抗体与临床及实验室指标的关系第33页
  讨论及本研究的创新之处第33-41页
   一、PAD 酶催化底物的特点及其调节第34-37页
   二、瓜氨酸化蛋白的鉴定第37-38页
   三、疾病组和健康对照组血清中抗Cit-CII 抗体和抗CII 抗体的检测第38-41页
 第二部分 瓜氨酸化 II 型胶原对类风湿关节炎患者外周血T 细胞激活的影响第41-54页
  前言第41-42页
  材料与方法第42-45页
   材料第42-43页
    一、研究对象及分组第42页
    二、主要试剂及仪器第42-43页
   方法第43-45页
    一、外周血单个核细胞(PBMC) 的分离第43-44页
    二、外周血T 细胞增殖试验: RA 患者、OA 患者和健康对照者的 PBMC对原型CII 和瓜氨酸化CII 的反应性第44-45页
  结果第45-49页
   一、RA 患者和对照者PBMC 对CII 和Cit-CII 的反应性第45-47页
   二、RA 患者和对照者CII 和Cit-CII 的PBMC 增殖反应阳性率第47-48页
   三、PBMC 增殖反应阳性与抗CII 抗体生成的关系第48-49页
   四、PBMC 增殖反应阳性与抗Cit-CII 抗体生成的关系第49页
  讨论及本研究的创新之处第49-54页
 第三部分 致炎性细胞因子 TNF-α对细胞内肽酰精氨酸脱亚胺酶(PAD2、PAD4)表达的影响第54-76页
  前言第54-55页
  材料与方法第55-61页
   材料第55-57页
    一、主要试剂和仪器第55-57页
   方法第57-61页
    一、HL-60 细胞培养第57页
    二、诱导分化实验第57页
    三、细胞形态学观察第57页
    四、硝基四氮唑蓝(NBT)还原能力测定第57-58页
    五、TNF-α刺激分化的HL-60 细胞(中性粒细胞)第58页
    六、分化的HL-60 细胞(中性粒细胞)总RNA 的提取第58-59页
    七、RT-PCR第59-60页
    八、实时定量PCR第60-61页
  结果第61-70页
   一、DMSO 对HL-60 细胞形态学变化的影响第61-62页
   二、DMSO 对HL-60 细胞硝基四氮唑蓝(NBT)还原反应的影响第62页
   三、定量PCR 结果质量鉴定第62-64页
   四、在同一浓度TNF-α的刺激下,分化的HL-60 细胞(中性粒细胞)PAD2和PAD4 mRNA 的表达呈时间依赖性第64-68页
   五、不同刺激浓度的TNF-α对分化的 HL-60 细胞(中性粒细胞)PAD2 和 PAD4 mRNA 表达的影响第68-70页
  讨论及本研究的创新之处第70-76页
结论第76-77页
参考文献第77-90页
致谢第90-91页
攻读博士学位期间发表的学术论文第91-92页
摘要第92-98页
Abstract第98-102页

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