提要 | 第1-8页 |
英文缩写词表 | 第8-9页 |
前言 | 第9-19页 |
一、瓜氨酸化与类风湿关节炎发病机制研究的历史与现状 | 第9-17页 |
二、本研究的目的及研究范围 | 第17-19页 |
研究工作 | 第19-76页 |
第一部分 类风湿关节炎患者血清中抗瓜氨酸化Ⅱ型胶原抗体表达的研究 | 第19-41页 |
前言 | 第19-20页 |
材料与方法 | 第20-29页 |
材料 | 第20-24页 |
一、研究对象及分组 | 第20页 |
二、主要试剂和仪器 | 第20-24页 |
方法 | 第24-29页 |
一、CII 的瓜氨酸化 | 第24页 |
二、瓜氨酸化CII(Cit-CII)的鉴定 | 第24-26页 |
三、ELISA 方法检测血清中抗Cit-CII 和抗CII 抗体水平 | 第26-27页 |
四、Western blotting 方法检测血清中抗Cit-CII 抗体和抗CII 抗体 | 第27-28页 |
五、各项临床指标检测 | 第28-29页 |
结果 | 第29-33页 |
一、瓜氨酸化CII 的鉴定 | 第29页 |
二、血清抗Cit-CII 抗体和抗CII 抗体的检测 | 第29-33页 |
三、抗Cit-CII 抗体与临床及实验室指标的关系 | 第33页 |
讨论及本研究的创新之处 | 第33-41页 |
一、PAD 酶催化底物的特点及其调节 | 第34-37页 |
二、瓜氨酸化蛋白的鉴定 | 第37-38页 |
三、疾病组和健康对照组血清中抗Cit-CII 抗体和抗CII 抗体的检测 | 第38-41页 |
第二部分 瓜氨酸化 II 型胶原对类风湿关节炎患者外周血T 细胞激活的影响 | 第41-54页 |
前言 | 第41-42页 |
材料与方法 | 第42-45页 |
材料 | 第42-43页 |
一、研究对象及分组 | 第42页 |
二、主要试剂及仪器 | 第42-43页 |
方法 | 第43-45页 |
一、外周血单个核细胞(PBMC) 的分离 | 第43-44页 |
二、外周血T 细胞增殖试验: RA 患者、OA 患者和健康对照者的 PBMC对原型CII 和瓜氨酸化CII 的反应性 | 第44-45页 |
结果 | 第45-49页 |
一、RA 患者和对照者PBMC 对CII 和Cit-CII 的反应性 | 第45-47页 |
二、RA 患者和对照者CII 和Cit-CII 的PBMC 增殖反应阳性率 | 第47-48页 |
三、PBMC 增殖反应阳性与抗CII 抗体生成的关系 | 第48-49页 |
四、PBMC 增殖反应阳性与抗Cit-CII 抗体生成的关系 | 第49页 |
讨论及本研究的创新之处 | 第49-54页 |
第三部分 致炎性细胞因子 TNF-α对细胞内肽酰精氨酸脱亚胺酶(PAD2、PAD4)表达的影响 | 第54-76页 |
前言 | 第54-55页 |
材料与方法 | 第55-61页 |
材料 | 第55-57页 |
一、主要试剂和仪器 | 第55-57页 |
方法 | 第57-61页 |
一、HL-60 细胞培养 | 第57页 |
二、诱导分化实验 | 第57页 |
三、细胞形态学观察 | 第57页 |
四、硝基四氮唑蓝(NBT)还原能力测定 | 第57-58页 |
五、TNF-α刺激分化的HL-60 细胞(中性粒细胞) | 第58页 |
六、分化的HL-60 细胞(中性粒细胞)总RNA 的提取 | 第58-59页 |
七、RT-PCR | 第59-60页 |
八、实时定量PCR | 第60-61页 |
结果 | 第61-70页 |
一、DMSO 对HL-60 细胞形态学变化的影响 | 第61-62页 |
二、DMSO 对HL-60 细胞硝基四氮唑蓝(NBT)还原反应的影响 | 第62页 |
三、定量PCR 结果质量鉴定 | 第62-64页 |
四、在同一浓度TNF-α的刺激下,分化的HL-60 细胞(中性粒细胞)PAD2和PAD4 mRNA 的表达呈时间依赖性 | 第64-68页 |
五、不同刺激浓度的TNF-α对分化的 HL-60 细胞(中性粒细胞)PAD2 和 PAD4 mRNA 表达的影响 | 第68-70页 |
讨论及本研究的创新之处 | 第70-76页 |
结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第91-92页 |
摘要 | 第92-98页 |
Abstract | 第98-102页 |