中文摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
引言 | 第13-15页 |
上篇 文献综述 | 第15-33页 |
第一章 炭疽菌的分类与鉴定 | 第15-21页 |
1.SACCARDO 为表的传统分类系统 | 第15页 |
2.VON ARX 分类系统 | 第15页 |
3.SLrFrON 分类系统 | 第15-16页 |
4.分子生物学分类 | 第16-21页 |
·RAPD 技术 | 第16-18页 |
·ITS 的序列分析 | 第18-21页 |
第二章 植物病原真菌检测技术 | 第21-27页 |
1.形态学检测法 | 第21-22页 |
·症状观察 | 第21页 |
·镜检 | 第21页 |
·分离培养 | 第21-22页 |
2.生物技术在病原物检测中的应用 | 第22-26页 |
·血清学技术 | 第22-23页 |
·PCR 技术 | 第23-24页 |
·基因芯片技术 | 第24-26页 |
3.炭疽菌分子检测研究进展 | 第26-27页 |
第三章 植物病原真菌群体遗传多样性研究 | 第27-33页 |
1.分子标记的概念与原理 | 第27页 |
2.分子标记的主要种类及特点 | 第27-30页 |
·基于Southern杂交技术的分析 | 第27-28页 |
·基于PCR技术的分子标记 | 第28-30页 |
·单引物扩增 | 第28-29页 |
·双引物扩增 | 第29页 |
·以简单序列为基础的分子标记 | 第29-30页 |
3.植物病原真菌群体遗传研究进展 | 第30-33页 |
·形态特征的变异 | 第30页 |
·致病性的特征 | 第30-31页 |
·分子生物学标记 | 第31-33页 |
下篇 研究内容 | 第33-87页 |
第一章 红掌炭疽病病原的分离鉴定及其核糖体DNA-ITS序列分析 | 第33-41页 |
1.材料与方法 | 第35-36页 |
·标本来源与病原菌的分离纯化 | 第35页 |
·致病性测定 | 第35页 |
·病原菌形态与培养性状 | 第35页 |
·寄主范围测定 | 第35页 |
·ITS的PCR的扩增与测序 | 第35-36页 |
·基因组DNA的提取 | 第35-36页 |
·引物 | 第36页 |
·PCR反应条件 | 第36页 |
·ITS序列分析 | 第36页 |
2.结果与分析 | 第36-40页 |
·分离结果与供试菌株的选取 | 第36页 |
·病原菌形态与培养性状 | 第36-37页 |
·致病性测定 | 第37-38页 |
·寄主范围测定 | 第38页 |
·序列分析与数据处理 | 第38-40页 |
·C.gloeosporioides核糖体DNA-ITS序列分析 | 第39页 |
·C.destructivum核糖体DNA-ITS序列分析 | 第39-40页 |
3.讨论 | 第40-41页 |
第二章 红掌胶孢炭疽菌的分子检测 | 第41-51页 |
1.材料和方法 | 第42-45页 |
·供试菌株 | 第42页 |
·病原菌DNA的提取 | 第42-44页 |
·菌丝体的收集及其DNA的提取 | 第43-44页 |
·分生孢子的收集及其DNA的提取 | 第44页 |
·土壤中病原菌DNA的提取 | 第44页 |
·灌溉水中病原菌DNA的提取 | 第44页 |
·发病组织DNA的提取 | 第44页 |
·引物设计与PCR扩增 | 第44-45页 |
·引物设计 | 第44-45页 |
·常规PCR反应 | 第45页 |
·套式PCR反应 | 第45页 |
2.结果与分析 | 第45-49页 |
·引物E1/E2对胶孢炭疸菌DNA的特异性PCR扩增 | 第45-46页 |
·引物E1/E2扩增胶孢炭疽菌基因组DNA的灵敏度检测 | 第46-47页 |
·胶孢炭疽菌的分生孢子灵敏度检测 | 第47-48页 |
·灌溉水中胶孢炭疽菌的检测 | 第48-49页 |
·发病植株组织的快速检测 | 第49页 |
3.结果与讨论 | 第49-51页 |
第三章 红掌毁灭炭疽菌的分子检测 | 第51-61页 |
1.材料和方法 | 第52-55页 |
·供试菌株 | 第52-54页 |
·DNA提取 | 第54页 |
·DNA的提取 | 第54页 |
·分生孢子的收集及其DNA的提取 | 第54页 |
·土壤中病原菌DNA的提取 | 第54页 |
·灌溉水中病原菌DNA的提取 | 第54页 |
·发病组织DNA的提取 | 第54页 |
·引物设计与PCR扩增 | 第54-55页 |
·引物设计 | 第54页 |
·常规PCR反应 | 第54-55页 |
·套式PCR反应 | 第55页 |
2.结果与分析 | 第55-59页 |
·引物F1/ITS4的特异性验证 | 第55页 |
·引物F1/ITS4扩增红掌毁灭炭疽菌基因组DNA的灵敏度验证 | 第55-56页 |
·红掌毁灭炭疽菌分生孢子的灵敏度检测 | 第56-57页 |
·灌溉水中毁灭炭疽菌的检测 | 第57-58页 |
·植物组织中毁灭炭疽菌的快速检测 | 第58-59页 |
3.讨论 | 第59-61页 |
第四章 红掌毁灭炭疽菌RAPD,ISSR-PCR最佳反应体系的建立 | 第61-71页 |
1.材料与方法 | 第62-64页 |
·基因组DNA提取 | 第62页 |
·RAPD 反应成分用量实验 | 第62-63页 |
·RAPD 反应程序 | 第63页 |
·ISSR 反应成分用量实验 | 第63页 |
·ISSR 反应程序 | 第63-64页 |
2.结果与分析 | 第64-69页 |
·各单因素对RAPD-PCR的影响 | 第64-67页 |
·Mg~(2+)对PCR结果的影响 | 第64页 |
·dNTP对PCR结果的影响 | 第64-65页 |
·Taq酶用量对PCR的影响 | 第65-66页 |
·引物用量对PCR的影响 | 第66页 |
·最佳RAPD体系的建立 | 第66-67页 |
·各单因素对ISSR-PCR的影响 | 第67-69页 |
·Mg~(2+)对PCR结果的影响 | 第67页 |
·dNTP对PCR结果的影响 | 第67-68页 |
·Taq酶用量对PCR的影响 | 第68页 |
·引物用量对PCR的影响 | 第68-69页 |
·最佳ISSR体系的建立 | 第69页 |
3.讨论 | 第69-71页 |
第五章 红掌毁灭炭疽菌群体遗传结构研究 | 第71-87页 |
1.材料与方法 | 第73-74页 |
·红掌毁灭炭疽菌标样的采集 | 第73页 |
·RAPD分析 | 第73-74页 |
·引物 | 第73页 |
·RAPD体系 | 第73页 |
·RAID 反应程序 | 第73-74页 |
·ISSR 分析 | 第74页 |
·引物 | 第74页 |
·ISSR 体系 | 第74页 |
·ISSR 反应程序 | 第74页 |
·数据统计与分析 | 第74页 |
2.结果与分析 | 第74-84页 |
·引物筛选和扩增结果 | 第74-76页 |
·群体内遗传变异分析 | 第76-78页 |
·群体间的遗传分化 | 第78-79页 |
·群体间的遗传相似性分析 | 第79-80页 |
·遗传多样性分析 | 第80-84页 |
·RAPD和ISSR聚类分析的相关性 | 第84页 |
3.讨论 | 第84-87页 |
参考文献 | 第87-95页 |
附录 | 第95-97页 |
致谢 | 第97页 |