| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 缩略语 | 第12-13页 |
| 第一章 研究背景 | 第13-25页 |
| 1 人生长激素（hGH）的研究进展 | 第13-23页 |
| ·hGH 基因 | 第13-14页 |
| ·hGH 的分子结构及其亚型 | 第14-16页 |
| ·22 kD hGH | 第14-15页 |
| ·20 kD hGH | 第15-16页 |
| ·17 kD hGH 和5 kD hGH | 第16页 |
| ·生长激素受体 | 第16-17页 |
| ·hGH 结合蛋白 | 第17-18页 |
| ·hGH 的生理功能及其应用 | 第18-21页 |
| ·促进生长 | 第18页 |
| ·促进蛋白质合成 | 第18-19页 |
| ·调节脂肪代谢 | 第19页 |
| ·影响糖代谢 | 第19页 |
| ·调节水、矿物质代谢 | 第19页 |
| ·影响能量代谢 | 第19-20页 |
| ·调节机体免疫功能 | 第20页 |
| ·抗衰老 | 第20-21页 |
| ·其他功能 | 第21页 |
| ·hGH 的种类 | 第21-22页 |
| ·天然提取的hGH | 第21页 |
| ·重组表达的hGH | 第21-22页 |
| ·生长激素的临床应用 | 第22页 |
| ·生长激素治疗的副作用 | 第22-23页 |
| 2 人生长激素类似蛋白的发现 | 第23页 |
| 3 家蚕蛹期hGH-like 蛋白的发现 | 第23-25页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第25-27页 |
| 1 研究目的和意义 | 第25页 |
| 2 研究内容 | 第25页 |
| 3 实验流程图 | 第25-27页 |
| 第三章 家蚕蛹期蛋白中存在天然hGH-like 蛋白的验证 | 第27-43页 |
| 1 材料与试剂 | 第27-30页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27页 |
| ·主要试剂的配制 | 第27-30页 |
| 2 方法 | 第30-39页 |
| ·家蚕蛹期蛋白的初步分离 | 第30-32页 |
| ·匀浆 | 第30页 |
| ·离心 | 第30页 |
| ·硫酸铵分段沉淀 | 第30-31页 |
| ·超滤 | 第31-32页 |
| ·冻干 | 第32页 |
| ·BCA 法蛋白定量 | 第32-33页 |
| ·初步分离后家蚕蛹期蛋白的SDS-PAGE 分析 | 第33-34页 |
| ·Western Blotting 检测hGH-like 蛋白 | 第34-35页 |
| ·免疫沉淀检测目的蛋白的存在 | 第35-36页 |
| ·ELISA 检测hGH-like 蛋白 | 第36-37页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第37-39页 |
| ·抗原制备 | 第37页 |
| ·免疫动物 | 第37-38页 |
| ·多克隆抗血清的制备 | 第38页 |
| ·抗体纯化 | 第38-39页 |
| ·CNBr-activated Sepharose 4B 偶联hGH | 第38-39页 |
| ·纯化抗体 | 第39页 |
| 3 结果 | 第39-42页 |
| ·初步分离后家蚕蛹期蛋白的SDS-PAGE 分析 | 第39-40页 |
| ·Western Blotting | 第40-41页 |
| ·免疫沉淀检测目的蛋白的存在 | 第41页 |
| ·ELISA | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 第四章hGH-like 蛋白的分离纯化 | 第43-55页 |
| 1 材料与试剂 | 第43-44页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·试剂 | 第43页 |
| ·主要试剂的配制 | 第43-44页 |
| 2 方法 | 第44-49页 |
| ·免疫沉淀分离获得hGH-like 蛋白 | 第44-45页 |
| ·免疫沉淀 | 第44-45页 |
| ·SDS-PAGE 分析 | 第45页 |
| ·Western Blotting 检测 | 第45页 |
| ·亲和层析纯化hGH-like 蛋白 | 第45-49页 |
| ·CNBr-activated Sepharose 4B 偶联hGH 抗体制备亲和层析柱 | 第45页 |
| ·偶联效率的测定 | 第45页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第45-46页 |
| ·SDS-PAGE 检测纯化结果 | 第46-47页 |
| ·银染 | 第47-48页 |
| ·超滤浓缩纯化产物 | 第48页 |
| ·Western Blotting 检测 | 第48-49页 |
| 3 结果 | 第49-53页 |
| ·免疫沉淀分离目的蛋白 | 第49-50页 |
| ·免疫沉淀后的SDS-PAGE 分析 | 第49页 |
| ·免疫沉淀后的Western Blotting 检测 | 第49-50页 |
| ·亲和层析纯化hGH-like 蛋白 | 第50-53页 |
| ·CNBr-activated Sepharose 4B 偶联抗体的效率测定 | 第50页 |
| ·hGH-like 蛋白的纯化 | 第50-51页 |
| ·银染检测纯化结果 | 第51-52页 |
| ·纯化产物的浓缩 | 第52页 |
| ·纯化浓缩产物的Western Blotting 检测 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 第五章 双向电泳和质谱分析 | 第55-64页 |
| 1 材料与试剂 | 第55-57页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·试剂 | 第55页 |
| ·主要试剂的配制 | 第55-57页 |
| 2 方法 | 第57-60页 |
| ·双向电泳 | 第57-59页 |
| ·第一向等电聚焦 | 第57-58页 |
| ·第二向SDS-PAGE | 第58-59页 |
| ·双向电泳凝胶显色 | 第59页 |
| ·样品的酶解 | 第59-60页 |
| ·质谱分析 | 第60页 |
| 3 结果 | 第60-62页 |
| ·双向凝胶电泳 | 第60-61页 |
| ·质谱分析 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-64页 |
| 第六章 生物信息学分析 | 第64-73页 |
| 1 生物信息学工具 | 第64页 |
| 2 分析流程及结果 | 第64-71页 |
| ·蛋白质的等电点以及分子量预测 | 第64页 |
| ·疏水性分析 | 第64-66页 |
| ·信号肽分析 | 第66-68页 |
| ·跨膜结构域预测 | 第68-69页 |
| ·定位预测 | 第69-70页 |
| ·二级结构预测 | 第70-71页 |
| ·高级结构预测 | 第71页 |
| 3 讨论 | 第71-73页 |
| 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
