| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略语 | 第10-11页 |
| 第一章 过氧化物酶体及其膜蛋白的研究进展 | 第11-25页 |
| 1 前言 | 第11-12页 |
| 2 过氧化物酶体的功能 | 第12-16页 |
| ·脂肪酸的β氧化 | 第12-13页 |
| ·调节细胞中的氧浓度 | 第13-14页 |
| ·磷脂酸的合成 | 第14页 |
| ·抗病毒作用 | 第14-15页 |
| ·过氧化物酶体与相关疾病 | 第15-16页 |
| 3 过氧化物酶体膜蛋白 | 第16-19页 |
| ·过氧化物酶体膜蛋白的结构和功能 | 第16-17页 |
| ·22kD 的过氧化物酶体膜蛋白（PMP22） | 第17-19页 |
| 4 过氧化物酶体蛋白的识别与装配 | 第19-22页 |
| ·过氧化物酶体基质蛋白的输入 | 第19-21页 |
| ·过氧化物酶体膜蛋白的输入 | 第21-22页 |
| 5 Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统 | 第22-24页 |
| 6 研究展望 | 第24-25页 |
| 第二章 实验设计方案 | 第25-28页 |
| 1 实验目的和意义 | 第25页 |
| 2 研究内容 | 第25-27页 |
| 3 实验流程图 | 第27-28页 |
| 第三章 生物信息学分析 | 第28-35页 |
| 1 生物信息学分析工具 | 第28页 |
| 2 分析结果及流程 | 第28-33页 |
| ·家蚕PMP22 基因的序列分析 | 第28-29页 |
| ·家蚕PMP22 蛋白的跨膜区分析 | 第29-30页 |
| ·家蚕PMP22 蛋白的疏水性分析 | 第30-31页 |
| ·家蚕PMP22 蛋白的信号肽分析 | 第31页 |
| ·家蚕PMP22 蛋白的功能位点分析 | 第31页 |
| ·家蚕PMP22 蛋白与相关蛋白的同源性分析 | 第31-33页 |
| 3 讨论 | 第33-35页 |
| 第四章Ph-PMP22 融合基因的原核表达 | 第35-55页 |
| 1 材料与试剂 | 第35-39页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·试剂 | 第35页 |
| ·试剂的配制 | 第35-39页 |
| 2 方法 | 第39-48页 |
| ·PMP22 基因的获取 | 第39-41页 |
| ·获取重组基因Ph- PMP22 | 第41-44页 |
| ·重组质粒pET-28a-Ph-PMP22 的构建 | 第44-45页 |
| ·重组质粒pET-28a-Ph-PMP22 的测序鉴定 | 第45页 |
| ·重组质粒pET-28a-Ph-PMP22 的原核表达 | 第45-46页 |
| ·融合蛋白的SDS-PAGE 电泳检测 | 第46-47页 |
| ·Western blot 鉴定 | 第47-48页 |
| ·Ph-PMP22 蛋白在E.coli BL21、E.coli Rosetta 中的表达 | 第48页 |
| 3 结果 | 第48-53页 |
| ·扩增目的基因PMP22 | 第48-49页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第49-51页 |
| ·重组质粒的测序 | 第51页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第51-52页 |
| ·融合蛋白的Western blot 鉴定 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 第五章 Ph-PMP22 重组基因的真核表达 | 第55-67页 |
| 1 材料与试剂 | 第55-56页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·试剂 | 第55页 |
| ·试剂的配制 | 第55-56页 |
| 2 方法 | 第56-61页 |
| ·重组质粒pFastBacTMHTB-Ph-PMP22 的构建 | 第56-57页 |
| ·重组质粒Bacmid-Ph-PMP22 的构建 | 第57-59页 |
| ·BmN 细胞的复苏与冻存 | 第59-60页 |
| ·重组Bacmid 的脂质体介导法转染家蚕BmN 细胞 | 第60页 |
| ·细胞中Bacmid 的PCR 鉴定 | 第60页 |
| ·Western blot 鉴定 | 第60-61页 |
| 3 结果 | 第61-65页 |
| ·重组质粒pFastBacTMHTB-Ph-PMP22 的鉴定 | 第61-62页 |
| ·重组Bacmid 的PCR 鉴定 | 第62-63页 |
| ·细胞发病状态 | 第63-64页 |
| ·融合蛋白的Western blot 鉴定 | 第64-65页 |
| 4 讨论 | 第65-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
