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活细胞内脊髓灰质炎病毒正链RNA可视化研究

第1章 引言第1-30页
 1 活细胞内 RNA 可视化的研究进展第9-27页
   ·活细胞内 RNA 的可视化技术第10-17页
     ·显微注射荧光标记的 RNA第10-11页
     ·利用 GFP 及其变体建立的活细胞内 RNA 标记系统第11-13页
       ·利用M52-GFP融合蛋白和可与M52结合的RNA序列建立的活细胞内 RNA 标记系统第11-12页
       ·通过GFP标记与目标RNA特异结合的蛋白质来标记RNA第12页
       ·利用 Lac 操纵子建立的活细胞内基因表达可视系统第12-13页
     ·利用荧光标记的核酸探针标记活细胞内的 RNA第13-17页
       ·寡聚脱氧核苷酸探针第13-14页
       ·光敏物质包被的寡核苷酸探针第14-15页
       ·2’甲基化的RNA 探针第15页
       ·携带性能可变的荧光染料的寡核苷酸探针第15-16页
       ·分子信标第16页
       ·其他类型的 FIVH 探针第16-17页
     ·细胞渗透性荧光染料第17页
       ·带荧光分子的单核苷酸第17页
       ·SYTO-14第17页
   ·活细胞内 RNA 运动的定性和定量分析技术第17-20页
     ·荧光漂白恢复技术第18-19页
     ·荧光漂白损失技术第19页
     ·反向 FRAP第19页
     ·荧光相关光谱第19-20页
     ·光激活分析第20页
     ·长时间活细胞荧光影像捕获技术第20页
   ·活细胞内 RNA 运动及控制机理的研究进展第20-27页
     ·哺乳动物细胞核内RNA 的定位和运动第20-22页
     ·哺乳动物细胞质中 RNA 的定位和运动第22-23页
     ·酵母细胞中RNA 的定位和运动第23-24页
     ·果蝇卵母细胞中 RNA 的定位和运动第24-25页
     ·神经细胞中 RNA 的定位和运动第25-27页
 2 脊髓灰质炎病毒简介第27-28页
 3 本研究的主要目标及研究内容第28-30页
第2章 活细胞内脊髓灰质炎病毒正链 RNA 的可视化第30-45页
 1 材料与方法第31-35页
   ·材料第31-32页
     ·病毒株和细胞株第31-32页
     ·主要试剂及来源第32页
     ·培养液及配方第32页
     ·主要溶液与缓冲液第32页
     ·仪器设备第32页
   ·试验方法第32-35页
     ·探针设计和合成第32-33页
     ·细胞培养和病毒的增殖第33页
     ·病毒浓缩和 RNA 的提取第33-34页
     ·病毒感染的 Vero 细胞的制备第34页
     ·体外杂交第34页
     ·荧光原位杂交第34-35页
     ·活细胞内病毒核酸的可视化成像第35页
 2 结果与分析第35-43页
   ·体外杂交第35-36页
   ·荧光原位杂交第36-37页
   ·转染过程分析第37-40页
   ·活细胞内病毒核酸的可视化定位第40-43页
 3 讨论第43-45页
第3章 活细胞内脊髓灰质炎病毒正链 RNA 动态学分析第45-55页
 1 材料与方法第46页
   ·材料第46页
   ·方法第46页
     ·实时监测第46页
     ·药物处理第46页
     ·荧光漂白恢复分析第46页
 2 结果与分析第46-52页
   ·实时监测脊髓灰质炎病毒正链RNA在活细胞内的移位过程第46-47页
   ·微管对脊髓灰质炎病毒的正链RNA 定位和运动的影响第47-49页
   ·荧光漂白恢复试验分析结果第49-52页
 3 讨论第52-55页
第4章 脊髓灰质炎病毒特异性膜泡运动机制的探索第55-61页
 1 材料与方法第55-56页
   ·材料第55-56页
   ·方法第56页
     ·病毒感染的 Vero 细胞的制备第56页
     ·电镜样品制备与观察第56页
 2 结果与分析第56-60页
   ·脊髓灰质炎病毒诱导的特异性膜泡及其在寄主细胞内的分布第56-58页
   ·微管网络对病毒特异性膜泡分布和移位的影响第58-60页
 3 讨论第60-61页
第5章 结论第61-62页
参考文献第62-77页
发表和待发表文章第77-78页
致谢第78页

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