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口腔厌氧菌内毒素的化学分析、生物学活性、对细胞因子的诱生作用及其相关致病学研究

缩略词第1-11页
中文摘要第11-16页
英文摘要第16-21页
导言第21-22页
文献回顾第22-38页
 一、革兰氏阴性菌外膜的组成及内毒素存在的部位第22-23页
 二、内毒素的化学组成和结构第23-26页
 三、内毒素的生物学活性第26-30页
 四、内毒素和牙髓根尖周感染的关系第30-38页
第一部分 细菌培养及内毒素的提取和纯化第38-44页
 1 材料和方法第38-39页
 2 结果第39-40页
   ·细菌鉴定第39页
   ·内毒素外观和物理性状第39-40页
   ·内毒素提取率第40页
 讨论第40-41页
 参考文献第41-44页
第二部分 内毒素化学和SDS—PAGE分析第44-70页
 实验1 内毒素脂多糖的纯度测定第44-45页
   ·材料和方法第44-45页
     ·蛋白质测定第44-45页
     ·核酸测定第45页
 实验2 内毒素脂多糖的总磷含量测定第45-47页
   ·材料和方法第46-47页
     ·试剂和仪器第46页
     ·方法第46-47页
 实验3 内毒素脂多糖中氨基葡萄糖含量测定第47-48页
   ·材料和方法第47-48页
     ·样本水解预处理第47页
     ·氨基葡萄糖测定第47-48页
 实验4 内毒素脂多糖中酸性糖2-酮-3脱氧-D-甘露辛酮糖酸(KDO)含量测定第48-49页
   ·材料和方法第48-49页
     ·样本水解预处理第48页
     ·KDO测定第48-49页
 实验5 内毒素的中性糖液气相色谱分析第49-51页
   ·材料和方法第49-51页
     ·脂多糖的水解第49-50页
     ·糖的样品制备第50页
     ·中性糖的液气相色谱分析第50-51页
 实验6 内毒素的脂肪酸液气相色谱分析第51-52页
   ·材料和方法第51-52页
     ·内毒素样本予备第51页
     ·脂肪酸液气相色谱分析第51-52页
 实验7 SDS-PAGE分析第52-53页
   ·材料和方法第52-53页
     ·试剂第52页
     ·SDS-PAGE电泳第52-53页
 实验8 LPS的透射电镜观察第53页
   ·材料和方法第53页
     ·样本预处理第53页
     ·透射电镜观察第53页
 结果第53-61页
   ·内毒素纯度测定结果第53页
   ·内毒素总磷的钼蓝法测定结果第53-54页
   ·氨基葡萄糖含量第54-55页
   ·KDO测定结果第55页
   ·中性糖液气相色谱分析结果第55页
   ·脂肪酸液气相色谱分析结果第55页
   ·SDS-PAGE分析结果第55页
   ·电镜观察结果第55-61页
 讨论第61-65页
 参考文献第65-70页
第三部分 内毒素的生物学活性和对细胞因子诱导活性的研究第70-105页
 实验1 内毒素的小鼠致死毒性测定(LD_(50))第70-71页
   ·材料和方法第70-71页
     ·实验材料第70页
     ·LD_(50)测定第70-71页
 实验2 内毒素的局部Shwartzman反应(SPD_(50))第71页
   ·材料和方法第71页
     ·动物准备第71页
     ·SPD_(50)测定第71页
 实验3 内毒素的鲎试剂凝集活性测定第71-72页
   ·材料和方法第71-72页
     ·实验器材的去热原处理第71页
     ·东方鲎试剂第71页
     ·结果判定:第71-72页
 实验4 内毒素对小鼠巨噬细胞的激活作用第72-73页
   ·材料和方法第72-73页
     ·制备LPS激活的巨噬细胞悬液第72页
     ·醛化红细胞制备第72页
     ·巨噬细胞吞噬活性测定第72-73页
 实验5 内毒素对集落刺激因子(CSF)的诱生活性第73-74页
   ·材料和方法第73-74页
     ·CSF血清制备第73页
     ·小鼠骨髓细胞悬液制备第73-74页
     ·CSF活性测定第74页
 实验6 内毒素对肿瘤坏死因子(TNF)的诱生活性第74-76页
   ·材料和方法第74-76页
     ·实验材料第74-75页
     ·TNF血清制备第75页
     ·TNF活性测定第75-76页
 实验7 内毒素对白介素-1(IL-1)的诱生活性第76-77页
   ·材料和方法第76-77页
     ·实验材料第76页
     ·巨噬细胞培养上清制备第76-77页
     ·小鼠胸腺细胞悬液制备第77页
     ·IL-1活性测定第77页
 实验8 内毒素对干扰素(IFN)的诱生活性第77-78页
   ·材料和方法第77-78页
     ·实验材料第77-78页
     ·小鼠IFN血清制备第78页
     ·IFN活性测定第78页
 结果第78-91页
   ·内毒素的致死毒性(LD_(50))第78-79页
   ·局部Shwartzman反应(SPD_(50))第79-81页
   ·内毒素的鲎试剂凝集活性第81页
   ·内毒素对小鼠巨噬细胞的激活作用第81-84页
   ·内毒素对CSF的诱导活性第84-86页
     ·CSF活性和LPS剂量间的关系第84页
     ·CSF产生动力学曲线第84-86页
   ·内毒素对TNF的诱导活性第86-87页
     ·TNF活性和LPS剂量间的关系第86-87页
     ·TNF产生动力学曲线第87页
   ·内毒素对IL-1的诱导活性第87-89页
   ·内毒素对IFN的诱导活性第89-91页
 讨论第91-97页
 参考文献第97-105页
第四部分 感染根管中内毒素活性与临床症状间关系的研究第105-110页
 1 材料与方法第105-106页
   ·内毒素标准曲线制备第105页
   ·临床标本采取和预备第105-106页
     ·病例选择第105页
     ·样本采取第105-106页
     ·样本预处理第106页
     ·样本中内毒素活性测定第106页
 2 结果第106-107页
   ·内毒素标准曲线第106页
   ·感染根管中内毒素活性测定结果第106页
   ·内毒素活性和临床症状间的相互关系第106-107页
 3 讨论第107-108页
 参考文献第108-110页
第五部分 根尖病变中肿瘤坏死因子(TNF)的免疫组织化学研究第110-118页
 1 材料与方法第110-111页
   ·病例选择第110页
   ·材料第110页
   ·样本预备第110页
   ·ABC法染色第110-111页
   ·ABC法免疫组化染色的图像分析第111页
 2 结果第111-114页
   ·ABC染色的光镜观察第111-112页
   ·ABC染色的图像分析第112-114页
     ·阳性染色颗粒数量的分布频度第112页
     ·阳性染色颗粒直径的分布频度第112-113页
     ·阳性染色面积与视野总面积的百分比第113-114页
 3 讨论第114-116页
 参考文献第116-118页
全文总结第118-119页
致谢第119-120页
附图第120-128页

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