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农杆菌介导甘蔗ACC氧化酶基因的遗传转化研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
1 前言第10-22页
   ·ACC氧化酶与乙烯的生物合成第10-14页
     ·乙烯的生物合成途径第10页
     ·植物ACO基因及其分子生物学研究第10-14页
   ·乙烯对甘蔗生长发育的调控第14-15页
     ·乙烯利在甘蔗生产上的应用第14页
     ·乙烯对甘蔗生长发育的生理生化研究第14-15页
   ·甘蔗转基因技术第15-20页
     ·实现甘蔗遗传转化的方法第15-16页
     ·甘蔗遗传转化的国内外研究现状第16-18页
     ·影响遗传转化成功与否的因素第18-20页
   ·本研究的目的意义及内容第20-22页
2 甘蔗ACC氧化酶基因的克隆与植物表达载体构建第22-36页
   ·材料第22-23页
     ·植物材料第22页
     ·质粒与菌种第22页
     ·酶与试剂第22页
     ·主要仪器设备第22-23页
   ·方法第23-32页
     ·甘蔗ACO基因编码区cDNA序列的克隆第23-27页
     ·甘蔗ACC氧化酶正、反义基因植物表达载体的构建第27-32页
   ·结果与分析第32-35页
     ·RNA的完整性第32-33页
     ·PCR产物的鉴定第33-34页
     ·甘蔗ACO cDNA的序列比较第34页
     ·甘蔗ACC氧化酶cDNA植物表达载体的鉴定和分析第34-35页
   ·讨论第35-36页
3 农杆菌介导甘蔗ACC氧化酶正、反义基因遗传转化烟草研究第36-55页
   ·材料与方法第36-44页
     ·材料与试剂第36-37页
     ·方法第37-44页
   ·结果与分析第44-54页
     ·根癌农杆菌的转化与鉴定第44-45页
     ·烟草叶片组织对卡那霉素的敏感性第45-46页
     ·转基因烟草植株的获得及其性状表现第46-49页
     ·农杆菌介导烟草转化效率第49-50页
     ·转基因植株的PCR鉴定第50-52页
     ·转基因植株的Dot-Southern检测第52页
     ·转正、反义甘蔗ACO基因烟草叶片乙烯释放量的测定第52-54页
   ·讨论第54-55页
4 农杆菌介导ACC氧化酶反义基因遗传转化甘蔗初步研究第55-62页
   ·材料与方法第55-57页
     ·材料与试剂第55页
     ·方法第55-57页
   ·结果与分析第57-60页
     ·甘蔗胚性愈伤组织的诱导第57页
     ·甘蔗对G418的敏感性第57-58页
     ·农杆菌介导法转化甘蔗的结果第58-60页
     ·抗性植株的PCR检测第60页
   ·讨论第60-62页
5 结论与展望第62-64页
   ·研究总结第62页
   ·后续研究第62-64页
致谢第64-65页
参考文献第65-75页
附录A第75-78页
附录B第78页

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