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表达H3N2亚型猪流感病毒HA及NP基因重组腺病毒的构建及其免疫效力评估

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 绪论第14-24页
   ·SIV 的特性第14页
   ·SIV 的基因组结构第14-15页
   ·SIV 的基因编码蛋白第15-17页
     ·血凝素蛋白(HA)第15页
     ·神经氨酸酶(NA)第15-16页
     ·核蛋白(NP)第16页
     ·聚合酶(PB1,PB2,PA)第16页
     ·基质蛋白(MP)第16-17页
     ·非结构蛋白(NS1,NS2)第17页
   ·猪流感疫苗的研究进展第17-19页
     ·灭活疫苗第17页
     ·亚单位疫苗第17-18页
     ·DNA 疫苗第18-19页
     ·病毒活载体疫苗第19页
   ·腺病毒载体研究进展第19-23页
     ·腺病毒概述第19页
     ·腺病毒的形态结构与功能第19-21页
     ·腺病毒载体的分类第21页
     ·腺病毒载体的优点第21-22页
     ·重组腺病毒载体流感疫苗的研究进展第22-23页
   ·本研究的目的和意义第23-24页
第二章 表达 H3N2亚型猪流感病毒 HA基因重组腺病毒的构建及表达第24-36页
   ·材料与方法第25-31页
     ·细胞、质粒第25页
     ·主要试剂及仪器第25页
     ·引物的设计与合成第25页
     ·重组腺病毒穿梭质粒pDC315-H3HA-EGFP 的构建第25-26页
     ·重组穿梭质粒pDC315-H3HA-EGFP 的鉴定第26页
     ·重组穿梭质粒pDC315-H3HA-EGFP 中量提取第26-27页
     ·细胞的培养第27页
     ·脂质体转染及重组病毒的噬斑纯化第27-28页
     ·重组病毒的鉴定第28-29页
     ·重组病毒rAd-H3HA-EGFP 的增殖与浓缩纯化第29-30页
     ·重组腺病毒的TCID_(50)测定第30-31页
   ·结果第31-34页
     ·HA 基因的扩增第31-32页
     ·重组穿梭质粒pDC315-H3HA-EGFP 的鉴定第32页
     ·重组腺病毒rAd-H3HA-EGFP 的构建第32-33页
     ·重组腺病毒rAd-H3HA-EGFP 目的基因表达产物的检测第33-34页
     ·重组病毒的纯化与TCID50测定第34页
   ·讨论第34-36页
第三章 表达 H3N2亚型猪流感病毒 NP基因重组腺病毒的构建及表达第36-42页
   ·材料与方法第37-38页
     ·细胞、质粒第37页
     ·酶、主要试剂及仪器第37页
     ·引物的设计和合成第37页
     ·重组穿梭质粒pDC315-NP-EGFP 的构建第37页
     ·重组穿梭质粒pDC315-NP-EGFP 的鉴定第37页
     ·重组穿梭质粒pDC315-NP-EGFP 中量提取第37-38页
     ·细胞的培养第38页
     ·脂质体转染及重组病毒的噬斑纯化第38页
     ·重组病毒rAd-NP-EGFP 的鉴定第38页
     ·重组病毒rAd-NP-EGFP 的增殖与浓缩纯化第38页
     ·重组腺病毒TCID50 测定第38页
   ·结果第38-40页
     ·NP 基因的扩增及克隆第38-39页
     ·含NP 基因重组穿梭质粒的构建与鉴定第39页
     ·重组腺病毒rAd-NP-EGFP 的构建第39-40页
     ·重组病毒的TCID50 测定第40页
   ·讨论第40-42页
第四章 重组腺病毒对 Balb/c小鼠的免疫效力评估第42-50页
   ·材料与方法第43-45页
     ·实验动物及病毒第43页
     ·仪器和试剂第43页
     ·小鼠的免疫和攻毒试验第43-44页
     ·小鼠血清抗体水平的检测第44页
     ·攻毒后小鼠的体重变化观察第44页
     ·小鼠脏器的病毒滴定第44-45页
   ·结果第45-48页
     ·HI 抗体的检测结果第45页
     ·ELISA 抗体检测结果第45-46页
     ·攻毒后小鼠体重变化结果第46-47页
     ·攻毒后小鼠脏器病毒滴定结果第47-48页
   ·讨论第48-50页
第五章 全文结论第50-51页
参考文献第51-55页
致谢第55-56页
作者简历第56页

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