| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 图目录 | 第11-12页 |
| 表目录 | 第12-13页 |
| 缩略语 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-32页 |
| ·铜绿假单胞菌介绍 | 第14-15页 |
| ·铜绿假单胞菌对铁的吸收 | 第15-19页 |
| ·铜绿假单胞菌可利用多种铁源 | 第15-16页 |
| ·phu和has途径获取不同来源的血红素 | 第16-17页 |
| ·siderophore媒介的铁吸收系统 | 第17-18页 |
| ·铁的跨膜运输 | 第18-19页 |
| ·铜绿假单胞菌铁的调节 | 第19-22页 |
| ·Fur蛋白 | 第19-20页 |
| ·小RNA PrrF | 第20-21页 |
| ·ECF sigma的调节 | 第21-22页 |
| ·铜绿假单胞菌群体感应系统及其调节机制 | 第22-24页 |
| ·铜绿假单胞菌铁与QS系统的关系 | 第24-25页 |
| ·铁与QS系统相互联系 | 第24页 |
| ·铁对QS系统的调控 | 第24-25页 |
| ·QS系统对铁反应基因的调控 | 第25页 |
| ·QS系统化合物对铁的螯合作用 | 第25页 |
| ·生物被膜 | 第25-26页 |
| ·含有HD-GYP结构域的双组分反应调节子 | 第26-27页 |
| ·tol-oprL系统的结构及特点 | 第27-28页 |
| ·tol-oprL系统的功能 | 第28-29页 |
| ·铜绿假单胞菌中tol-oprL的特点 | 第29页 |
| ·Orf1蛋白 | 第29-30页 |
| ·研究内容、目的和意义 | 第30-32页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第32-54页 |
| ·实验材料 | 第32-36页 |
| ·菌株和质粒 | 第32-34页 |
| ·培养基的配置 | 第34-35页 |
| ·试剂 | 第35页 |
| ·仪器 | 第35-36页 |
| ·菌体的培养条件 | 第36页 |
| ·基本实验方法 | 第36-43页 |
| ·PCR扩增及纯化 | 第36-37页 |
| ·质粒的小量提取 | 第37-38页 |
| ·质粒或DNA片断的酶切和连接 | 第38-39页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第39页 |
| ·铜绿假单胞菌感受态细胞的快速制备方法 | 第39页 |
| ·电转化 | 第39-40页 |
| ·重组菌株的筛选 | 第40页 |
| ·三亲株杂交实验 | 第40-41页 |
| ·含有lux报告子融合基因表达的检测 | 第41-42页 |
| ·含有lacZ报道子融合基因检测 | 第42页 |
| ·生物被膜实验 | 第42-43页 |
| ·PA2572实验的方法 | 第43-46页 |
| ·PA2572敲除突变体的构建 | 第43-45页 |
| ·含有lux的报告子在PAO1(△2572)中的表达测定 | 第45-46页 |
| ·pMS402-2572在QS系统突变株中表达的测定 | 第46页 |
| ·泳动实验 | 第46页 |
| ·有关PA3899实验方法 | 第46-48页 |
| ·PAO(△3899)突变体的构建 | 第46-47页 |
| ·含有lux的报告子在PAO1(△3899)中的表达测定 | 第47-48页 |
| ·pMS402-3899在QS系统突变体中表达的测定 | 第48页 |
| ·tol-oprL的实验方法 | 第48-51页 |
| ·总RNA的提取与检测 | 第48-49页 |
| ·DNase Ⅰ的消化 | 第49页 |
| ·RT-延伸实验 | 第49-50页 |
| ·cDNA测序 | 第50-51页 |
| ·构建启动子-报道子融合体 | 第51-53页 |
| ·构建P1con∶∶lacz质粒pKD102z | 第51-52页 |
| ·构建含有luxCDABE报道子的融合质粒 | 第52页 |
| ·β-galactosidase实验 | 第52页 |
| ·含有lux报告子的基因表达测定 | 第52-53页 |
| ·构建orf1敲除突变株 | 第53页 |
| ·细胞大小的测量 | 第53-54页 |
| 第三章 铁反应基因研究结果与讨论 | 第54-78页 |
| ·PA2572的研究 | 第54-63页 |
| ·PA2572突变体的构建 | 第54-57页 |
| ·PA2572与铁反应基因的关系 | 第57-59页 |
| ·PA2572与QS系统的关系 | 第59页 |
| ·QS系统对PA2572的调节 | 第59-61页 |
| ·突变体PAO1(△2572)的泳动性 | 第61-63页 |
| ·PA3899的研究 | 第63-68页 |
| ·PA3899突变体的构建 | 第63-65页 |
| ·PA3899对pvdF和pchDCBA的影响 | 第65-66页 |
| ·PA3899和QS系统的相互关系 | 第66-67页 |
| ·PA3899对tol-oprL的作用 | 第67-68页 |
| ·铁对QS的调节 | 第68-73页 |
| ·不同铁浓度下突变体biofilm的生物量 | 第73-75页 |
| ·讨论 | 第75-78页 |
| 第四章 tol-oprL研究的结果与讨论 | 第78-88页 |
| ·tol-oprL启动子区域的鉴定 | 第78-82页 |
| ·P1区域两个启动子的鉴定 | 第78-80页 |
| ·Pb和Pp启动子区域的确定 | 第80-81页 |
| ·P1con和P1ind两个启动子的不同 | 第81-82页 |
| ·QS系统对tol-oprL的调节 | 第82-85页 |
| ·orf1敲除突变体的细胞形态 | 第85-86页 |
| ·讨论 | 第86-88页 |
| 结论 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-101页 |
| 科研成果 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102页 |