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H5N1亚型流感病毒A/Anhui/2/2005株反向遗传操作系统的建立及埃及H5N1亚型禽流感疫苗候选株的构建

摘要第1-8页
Abstract第8-14页
第一章引言第14-26页
   ·反向遗传操作技术的原理第14-15页
   ·流感病毒反向遗传操作技术的发展历程第15-17页
     ·核糖核蛋白(RNP)转染法第15页
     ·流感病毒17 质粒和12 质粒反向遗传操作系统第15页
     ·流感病毒8 质粒反向遗传操作系统第15-16页
     ·流感病毒4 质粒和1 质粒反向遗传操作系统第16-17页
   ·反向遗传操作技术在流感病毒研究中的应用第17-21页
     ·研究流感病毒的基因结构及蛋白功能第17页
     ·研究流感病毒的受体结合特性及传播机制第17-18页
     ·研究流感病毒的分子致病机制第18-19页
     ·研究流感病毒的耐药分子机制第19-20页
     ·研究新型流感疫苗第20-21页
   ·中国禽流感疫苗的发展与应用第21-23页
     ·H5N2 亚型灭活疫苗第21页
     ·H5N1 亚型灭活疫苗第21-22页
     ·H5N1 亚型灭活标记疫苗第22页
     ·重组禽痘活载体疫苗和禽流感-新城疫二联活疫苗第22-23页
     ·DNA 疫苗第23页
   ·埃及H5N1 亚型禽流感概述第23-24页
   ·本研究的目的和意义第24-26页
第二章 H5N1 亚型流感病毒A/Anhui/2/2005 株反向遗传操作系统的建立第26-34页
   ·材料第26-27页
     ·病毒、鸡胚和实验动物第26页
     ·试剂及软件第26页
     ·仪器设备第26-27页
   ·方法第27-30页
     ·RNA 的提取与反转录第27页
     ·序列测定及引物设计第27-28页
     ·PCR 产物与pBD 载体的处理第28页
     ·连接、转化与阳性菌的筛选第28-29页
     ·病毒拯救第29页
     ·救获病毒的序列测定第29页
     ·小鼠的致病性试验第29-30页
     ·病毒滴定第30页
   ·结果第30-32页
     ·重组质粒的构建第30页
     ·病毒拯救第30-31页
     ·小鼠的致病性试验结果第31页
     ·病毒滴定结果第31-32页
   ·讨论第32-34页
第三章 埃及H5N1 亚型禽流感疫苗候选株的构建第34-42页
   ·材料第34-35页
     ·病毒株第34页
     ·鸡胚第34页
     ·试剂及仪器设备第34页
     ·引物的设计第34-35页
     ·pBD 载体第35页
     ·流感病毒12 质粒反向遗传操作系统第35页
   ·方法第35-39页
     ·病毒RNA 提取及反转录第35-36页
     ·PCR 扩增第36页
     ·HA 基因的分子修饰第36-37页
     ·重组质粒pBD-HAmut 及pBD-NA 的构建第37-38页
     ·埃及禽流感疫苗候选株的拯救第38-39页
     ·疫苗候选株H5N1(EG)/PR8 的鉴定第39页
   ·结果第39-40页
     ·HA、NA 基因的扩增结果第39页
     ·HA 基因缺失突变结果第39-40页
     ·重组质粒pBD-HAmut 及pBD-NA 的构建结果第40页
     ·疫苗候选株H5N1(EG)/PR8 的鉴定结果第40页
   ·讨论第40-42页
第四章 全文结论第42-43页
参考文献第43-51页
附录第51-53页
致谢第53-54页
作者简历第54页

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