| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-23页 |
| ·昆虫病原线虫共生菌概述 | 第15-16页 |
| ·共生菌口服活性杀虫蛋白及其基因 | 第16-17页 |
| ·杀虫蛋白基因簇的结构 | 第17-18页 |
| ·基因簇各组分共表达增强毒性机制 | 第18-19页 |
| ·杀虫蛋白作用机制 | 第19-20页 |
| ·杀虫蛋白的应用及展望 | 第20页 |
| ·蛋白质结构域的研究 | 第20-21页 |
| ·本研究工作基础 | 第21页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| ·技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 拒食蛋白XnAFP2 的基因克隆与表达 | 第23-34页 |
| ·试验材料 | 第23页 |
| ·菌株与载体 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·实验仪器 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-28页 |
| ·菌株培养、拒食蛋白XnAFP2 的分离纯化 | 第23-24页 |
| ·蛋白质氨基酸序列测定 | 第24页 |
| ·CB6 基因组 DNA 提取 | 第24-25页 |
| ·引物设计 | 第25页 |
| ·目的基因扩增 | 第25页 |
| ·PCR 产物与克隆载体连接 | 第25页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 | 第25-26页 |
| ·重组克隆pEASY－T1 simple/ xnAFP2 的酶切鉴定 | 第26页 |
| ·目的基因的原核表达 | 第26-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-33页 |
| ·质谱测序结果 | 第28-30页 |
| ·CB6 基因组 DNA 的提取和目的基因扩增结果 | 第30页 |
| ·重组质粒pEASY－T1 simple / xnAFP2 的酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·xnAFP2 的原核表达载体构建 | 第31-32页 |
| ·重组表达载体的转化和诱导表达 | 第32-33页 |
| ·小结与讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 拒食蛋白XnAFP2 三个结构域片段的表达及其生物活性分析 | 第34-45页 |
| ·试验材料 | 第34-35页 |
| ·菌株和质粒 | 第34页 |
| ·供试昆虫 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·实验仪器 | 第34-35页 |
| ·试验方法 | 第35-39页 |
| ·拒食蛋白XnAFP2 的生物信息学分析 | 第35页 |
| ·各结构域片段的克隆 | 第35页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第35-36页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第36页 |
| ·表达蛋白的SDS-PAGE 检测 | 第36-37页 |
| ·表达蛋白的亲和纯化 | 第37页 |
| ·目的蛋白浓度的测定 | 第37-38页 |
| ·蛋白片段的生物活性测定 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-44页 |
| ·拒食蛋白XnAFP2 的生物信息学分析 | 第39-40页 |
| ·XnAFP2 蛋白结构域片段的PCR 扩增 | 第40页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第40-41页 |
| ·表达蛋白的检测 | 第41页 |
| ·表达蛋白的纯化 | 第41-43页 |
| ·各结构域蛋白片段的浓度测定 | 第43页 |
| ·生物活性测定 | 第43-44页 |
| ·小结与讨论 | 第44-45页 |
| 第四章 拒食蛋白 XnAFP2 对玉米螟幼虫生长发育及其体内几种主要酶系活性的影响 | 第45-54页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·供试昆虫和菌株 | 第45页 |
| ·供试药剂 | 第45页 |
| ·实验仪器 | 第45页 |
| ·试验方法 | 第45-50页 |
| ·拒食蛋白XnAFP2 的分离纯化 | 第45-46页 |
| ·拒食蛋白XnAFP2 对玉米螟生长发育的抑制作用 | 第46页 |
| ·酶的制备 | 第46页 |
| ·可溶性蛋白含量测定 | 第46-47页 |
| ·酰胆碱酯酶活力测定 | 第47页 |
| ·谷胱甘肽S-转移酶活力测定 | 第47-48页 |
| ·超氧化物歧化酶（SOD）测定 | 第48-49页 |
| ·过氧化氢酶（Catalase CAT）测定 | 第49-50页 |
| ·中肠总蛋白酶活性的测定 | 第50页 |
| ·实验数据分析 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-53页 |
| ·拒食蛋白XnAFP2 的分离纯化结果 | 第50-51页 |
| ·拒食蛋白XnAFP2 对亚洲玉米螟幼虫生长发育的抑制作用 | 第51页 |
| ·拒食蛋白XnAFP2 对亚洲玉米螟幼虫体内解毒酶活力的影响 | 第51-52页 |
| ·拒食蛋白XnAFP2 对亚洲玉米螟幼虫体内保护酶活力的影响 | 第52页 |
| ·拒食蛋白XnAFP2 对亚洲玉米螟幼虫中肠蛋白酶活力的影响 | 第52-53页 |
| ·小结与讨论 | 第53-54页 |
| 第五章 全文结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |
