| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-28页 |
| ·p53 研究概况 | 第12-21页 |
| ·p53 概述 | 第12-13页 |
| ·p53 的激活 | 第13-14页 |
| ·p53 的抑制 | 第14页 |
| ·p53 的生物学功能 | 第14-17页 |
| ·病毒与p53 相互作用研究概况 | 第17-21页 |
| ·RNA 干扰研究概况 | 第21-27页 |
| ·RNA 干扰发生机制 | 第21-22页 |
| ·诱导RNAi 的方法 | 第22页 |
| ·慢病毒载体介导的RNA 干扰 | 第22-25页 |
| ·慢病毒载体介导的RNA 干扰在病毒性疾病治疗中的应用 | 第25-27页 |
| ·研究目的和意义 | 第27-28页 |
| 第二章 p53 基因RNAi 慢病毒载体的构建及鉴定 | 第28-41页 |
| ·试验材料和方法 | 第28-35页 |
| ·质粒、菌株与细胞株 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·p53-shRNA 重组慢病毒表达载体的构建 | 第29-33页 |
| ·慢病毒包装 | 第33-35页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第35页 |
| ·试验结果 | 第35-39页 |
| ·p53-shRNA 重组慢病毒表达载体的构建及鉴定 | 第36-38页 |
| ·慢病毒包装与病毒滴度的测定结果 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 p53 基因表达沉默的稳定Vero 细胞系的建立及特性分析 | 第41-54页 |
| ·试验材料和方法 | 第42-49页 |
| ·质粒、菌种与细胞 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| ·初筛嘌呤霉素对Vero 细胞的最低致死浓度 | 第42-43页 |
| ·慢病毒感染Vero 细胞及阳性细胞株的筛选 | 第43页 |
| ·阳性细胞株的纯化 | 第43-44页 |
| ·p53-knockdown Vero 细胞系的鉴定 | 第44页 |
| ·p53 基因mRNA 表达水平检测 | 第44-46页 |
| ·p53 蛋白表达水平检测 | 第46-49页 |
| ·外源性药物Doxorubicin刺激检测p53表达抑制效果 | 第49页 |
| ·p53 转录激活功能的检测 | 第49页 |
| ·试验结果 | 第49-52页 |
| ·嘌呤霉素对Vero 细胞的最低致死浓度 | 第49页 |
| ·p53-knockdown Vero 细胞系不同细胞克隆Western blot 鉴定 | 第49-50页 |
| ·半定量RT-PCR 检测结果 | 第50页 |
| ·Western blot 检测结果 | 第50-51页 |
| ·p53 转录激活功能的检测 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 p53 基因表达沉默的稳定Vero 细胞系的初步应用 | 第54-63页 |
| ·试验材料与方法 | 第54-59页 |
| ·病毒与细胞 | 第54页 |
| ·主要试剂 | 第54-55页 |
| ·主要仪器 | 第55页 |
| ·p53-knockdown Vero 细胞系的初步应用 | 第55-59页 |
| ·试验结果 | 第59-61页 |
| ·PRV 在p53-knockdown Vero 细胞中的多步生长曲线的测定结果 | 第59-60页 |
| ·指示病毒复制的 gH 基因的半定量 RT-PCR 测定结果 | 第60-61页 |
| ·指示病毒复制的 gH 蛋白的 Western blot 测定结果 | 第61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 第五章 全文结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 附录 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 作者简介 | 第76页 |
