摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
目录 | 第7-11页 |
1 前言 | 第11-23页 |
·香蕉枯萎病的致病性研究 | 第12-15页 |
·香蕉枯萎病菌的香蕉枯萎病菌的生物学特性 | 第12页 |
·香蕉枯萎病菌的生理小种 | 第12-13页 |
·香蕉枯萎病发病规律 | 第13页 |
·香蕉枯萎病菌的分子生物学研究 | 第13-14页 |
·香蕉枯萎病的危害症状 | 第14-15页 |
·香蕉枯萎病的抗病性研究 | 第15-17页 |
·香蕉枯萎病的抗病机制 | 第15页 |
·香蕉枯萎病的综合防治 | 第15-17页 |
·香蕉枯萎病的化学防治 | 第15-16页 |
·香蕉枯萎病的生物防治 | 第16页 |
·香蕉枯萎病的抗病育种 | 第16-17页 |
·香蕉枯萎病的综合防治方法 | 第17页 |
·根癌农杆菌介导丝状真菌遗传转化的研究进展 | 第17-21页 |
·根癌农杆菌介导遗传转化的丝状真菌的种类 | 第17-19页 |
·根癌农杆菌介导真菌遗传转化的机理 | 第19-20页 |
·根癌农杆菌介导丝状真菌转化的特点 | 第20-21页 |
·受体来源简单,可以是多种类型 | 第20页 |
·提高真菌的转化效率 | 第20页 |
·T-DNA以单拷贝的形式随机插入 | 第20页 |
·转化子相对稳定 | 第20-21页 |
·T-DNA的同源置换 | 第21页 |
·本研究的目的意义和技术路线 | 第21-22页 |
·引言 | 第22-23页 |
2 材料和方法 | 第23-35页 |
·材料 | 第23-24页 |
·菌株和质粒 | 第23页 |
·供试香蕉叶片和香蕉苗 | 第23页 |
·培养基和培养条件 | 第23页 |
·主要实验试剂 | 第23-24页 |
·主要仪器设备 | 第24页 |
·方法 | 第24-35页 |
·菌株的复壮 | 第24页 |
·野生型1号小种对潮霉素B的敏感性检测 | 第24页 |
·ATMT转化体系中根癌农杆菌的处理 | 第24页 |
·香蕉枯萎病1号小种Focr1-N2分生孢子的准备 | 第24页 |
·1号小种病原菌Focr1-N2的转化及筛选 | 第24-25页 |
·共培养条件的优化 | 第25页 |
·Focr1-N2孢子浓度对转化效率的影响 | 第25页 |
·AS浓度对转化效率的影响 | 第25页 |
·农杆菌菌株AGL-1浓度对转化效率的影响 | 第25页 |
·共培养时间对转化效率的影响 | 第25页 |
·共培养温度对转化效率的影响 | 第25页 |
·pH值对转化效率的影响 | 第25页 |
·香蕉枯萎病菌Focr1-N2转化的突变体的分析 | 第25-27页 |
·转化子的纯化保存及遗传稳定性检测 | 第25-26页 |
·转化子生长对比检测结果 | 第26页 |
·转化子的表型分析 | 第26页 |
·温度、pH值及碳源对病原菌Focr1-N2菌丝体生长的影响 | 第26页 |
·转化子致病力的测定 | 第26-27页 |
·转化子的PCR验证 | 第27-35页 |
·转化子总DNA的提取 | 第27页 |
·基因组DNA琼脂糖电泳 | 第27-28页 |
·DNA质量检测 | 第28页 |
·质粒PBHt2的提取及检测 | 第28-29页 |
·转化子的分子检测 | 第29页 |
·突变体T-DNA插入位点的侧翼序列的扩增及分析 | 第29-35页 |
3 结果与分析 | 第35-51页 |
·FOCR1菌株N2对潮霉素敏感实验 | 第35页 |
·共培养条件的优化 | 第35-39页 |
·Focr1孢子浓度对转化效率的影响 | 第35-36页 |
·AS浓度对转化效率的影响 | 第36-37页 |
·农杆菌菌株AGL-1浓度对转化效率的影响 | 第37页 |
·共培养时间对转化效率的影响 | 第37-38页 |
·共培养温度对转化效率的影响 | 第38页 |
·pH值对转化效率的影响 | 第38-39页 |
·转化子的遗传稳定性检测 | 第39页 |
·转化子生长对比检测结果 | 第39页 |
·突变体的表型分析 | 第39-41页 |
·温度、PH值及碳源对病原菌FOCR1-N2菌丝体生长的影响 | 第41-43页 |
·转化子致病力的测定 | 第43-46页 |
·转化子接种粉蕉的致病力测定 | 第43-45页 |
·转化子接种巴西蕉的致病力测定 | 第45-46页 |
·香蕉枯萎病菌FOCR1 N2基因组DNA的提取质量检测 | 第46页 |
·T-DNA插入的PCR检测 | 第46-47页 |
·T-DNA插入位点的侧翼序列扩增和分析 | 第47-51页 |
·香蕉枯萎病菌Focr1-N2菌株突变株的TAIL-PCR结果 | 第47-48页 |
·TAIL-PCR产物的克隆 | 第48-49页 |
·T-DNA插入位点的侧翼序列的分析 | 第49-51页 |
4 讨论 | 第51-55页 |
·关于香蕉枯萎病菌的遗传转化效率和突变体库构建问题 | 第51-52页 |
·T-DNA的插入存在的问题 | 第52页 |
·TAIL-PCR运用的优缺点 | 第52-53页 |
·突变体的表型分析及突变体致病性稳定分析 | 第53-54页 |
·关于T-DNA插入位点的侧翼序列获得及分析 | 第54-55页 |
5 问题与展望 | 第55-56页 |
6 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
致谢 | 第63页 |