致谢 | 第1-9页 |
内容摘要 | 第9-10页 |
Summary | 第10-11页 |
引言 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
·铁 | 第12-15页 |
·铁在动物体内的总含量与分布 | 第12页 |
·铁的营养生理学功能 | 第12-13页 |
·铁的消化吸收和转运 | 第13-14页 |
·铁的代谢 | 第14页 |
·影响铁吸收的因素 | 第14-15页 |
·动物的年龄和种类 | 第14页 |
·饲料因素 | 第14页 |
·动物胃肠道的健康 | 第14-15页 |
·铁的含量、性质及机体内铁状态 | 第15页 |
·仔猪铁的营养 | 第15-17页 |
·仔猪缺铁的原因 | 第15页 |
·仔猪缺铁的表现 | 第15-16页 |
·仔猪补铁的方法 | 第16页 |
·仔猪补铁过量和铁中毒 | 第16-17页 |
·Hepcidin 与机体铁稳态 | 第17-22页 |
·Hepcidin 的分子结构特点 | 第17-18页 |
·Hepcidin 与机体铁稳态 | 第18-19页 |
·Hepcidin 与炎症和感染 | 第19-20页 |
·Hepcidin 与贫血和缺氧 | 第20页 |
·应用前景和展望 | 第20-22页 |
第二章 缺铁和铁超载仔猪模型构建及生化指标检测 | 第22-33页 |
·材料和方法 | 第22-24页 |
·试验药品和试剂 | 第22页 |
·试验动物、地点和时间 | 第22页 |
·试验仪器 | 第22页 |
·试验设计 | 第22页 |
·样品的采集与处理 | 第22页 |
·测定指标 | 第22-24页 |
·内脏组织和血清中铁的含量 | 第22-23页 |
·样品的微波消解 | 第22-23页 |
·标准曲线溶液的配置 | 第23页 |
·上机检测 | 第23页 |
·抗氧化指标测定 | 第23-24页 |
·血清生化指标测定 | 第24页 |
·数据统计和分析 | 第24页 |
·结果与分析 | 第24-27页 |
·标准曲线 | 第24-25页 |
·血清和肝脾组织铁含量 | 第25-26页 |
·血清生化指标 | 第26-27页 |
·抗氧化能力 | 第27页 |
·讨论 | 第27-33页 |
·不同铁负荷对仔猪血清和内脏组织铁含量的影响 | 第27-28页 |
·不同铁负荷对仔猪血清生化指标的影响 | 第28-31页 |
·血清酶类 | 第28页 |
·血清蛋白和非蛋白氮 | 第28-29页 |
·血糖与胆红素 | 第29-30页 |
·血脂 | 第30-31页 |
·不同铁负荷对仔猪抗氧化能力的影响 | 第31-33页 |
第三章 不同铁负荷对 Hepcidin mRNA 表达量的影响 | 第33-41页 |
·材料和方法 | 第33-35页 |
·试验动物和取材 | 第33页 |
·仪器设备 | 第33页 |
·酶与试剂 | 第33页 |
·引物设计和合成 | 第33页 |
·提取总RNA 前的准备工作 | 第33-34页 |
·试验器具的处理与准备 | 第33-34页 |
·提取时注意事项 | 第34页 |
·肝脏总 RNA 的提取和检测 | 第34页 |
·RT-PCR 扩增 | 第34-35页 |
·FQ-PCR 反应 | 第35页 |
·试验结果的处理 | 第35页 |
·结果与分析 | 第35-39页 |
·总RNA 质量检测 | 第35-36页 |
·引物质量评估 | 第36页 |
·熔解曲线 | 第36-37页 |
·扩增曲线 | 第37-38页 |
·不同铁负荷条件下肝脏内HepcidinmRNA的表达差异 | 第38-39页 |
·讨论 | 第39-41页 |
第四章 Hepcidin 基因编码区的克隆与序列分析 | 第41-52页 |
·材料与方法 | 第41-46页 |
·仪器设备 | 第41页 |
·试验动物 | 第41页 |
·质粒载体和感受态细胞 | 第41页 |
·主要试剂 | 第41页 |
·培养基 | 第41页 |
·溶液配制 | 第41-42页 |
·总RNA的提取 | 第42页 |
·Hepcidin基因的克隆 | 第42-46页 |
·RT-PCR 扩增 | 第42页 |
·PCR 引物设计 | 第42页 |
·PCR 扩增 | 第42-43页 |
·PCR 产物纯化回收 | 第43-44页 |
·Hepcidin基因与pMD19-T载体的连接 | 第44页 |
·连接产物的转化 | 第44页 |
·克隆Hepcidin DNA 片段的鉴定 | 第44-46页 |
·结果与分析 | 第46-51页 |
·RNA 的检测 | 第46-47页 |
·目的片段RT-PCR扩增 | 第47页 |
·Hepcidin 重组克隆的蓝白斑筛选 | 第47-48页 |
·Hepcidin 重组克隆的鉴定 | 第48-49页 |
·Hepcidin cDNA 测序与分析 | 第49-51页 |
·讨论 | 第51-52页 |
总结 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |