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不同铁负荷对仔猪Hepcidin mRNA表达量的影响

致谢第1-9页
内容摘要第9-10页
Summary第10-11页
引言第11-12页
第一章 文献综述第12-22页
   ·铁第12-15页
     ·铁在动物体内的总含量与分布第12页
     ·铁的营养生理学功能第12-13页
     ·铁的消化吸收和转运第13-14页
     ·铁的代谢第14页
     ·影响铁吸收的因素第14-15页
       ·动物的年龄和种类第14页
       ·饲料因素第14页
       ·动物胃肠道的健康第14-15页
       ·铁的含量、性质及机体内铁状态第15页
   ·仔猪铁的营养第15-17页
     ·仔猪缺铁的原因第15页
     ·仔猪缺铁的表现第15-16页
     ·仔猪补铁的方法第16页
     ·仔猪补铁过量和铁中毒第16-17页
   ·Hepcidin 与机体铁稳态第17-22页
     ·Hepcidin 的分子结构特点第17-18页
     ·Hepcidin 与机体铁稳态第18-19页
     ·Hepcidin 与炎症和感染第19-20页
     ·Hepcidin 与贫血和缺氧第20页
     ·应用前景和展望第20-22页
第二章 缺铁和铁超载仔猪模型构建及生化指标检测第22-33页
   ·材料和方法第22-24页
     ·试验药品和试剂第22页
     ·试验动物、地点和时间第22页
     ·试验仪器第22页
     ·试验设计第22页
     ·样品的采集与处理第22页
     ·测定指标第22-24页
       ·内脏组织和血清中铁的含量第22-23页
         ·样品的微波消解第22-23页
         ·标准曲线溶液的配置第23页
         ·上机检测第23页
       ·抗氧化指标测定第23-24页
       ·血清生化指标测定第24页
       ·数据统计和分析第24页
   ·结果与分析第24-27页
     ·标准曲线第24-25页
     ·血清和肝脾组织铁含量第25-26页
     ·血清生化指标第26-27页
     ·抗氧化能力第27页
   ·讨论第27-33页
     ·不同铁负荷对仔猪血清和内脏组织铁含量的影响第27-28页
     ·不同铁负荷对仔猪血清生化指标的影响第28-31页
       ·血清酶类第28页
       ·血清蛋白和非蛋白氮第28-29页
       ·血糖与胆红素第29-30页
       ·血脂第30-31页
     ·不同铁负荷对仔猪抗氧化能力的影响第31-33页
第三章 不同铁负荷对 Hepcidin mRNA 表达量的影响第33-41页
   ·材料和方法第33-35页
     ·试验动物和取材第33页
     ·仪器设备第33页
     ·酶与试剂第33页
     ·引物设计和合成第33页
     ·提取总RNA 前的准备工作第33-34页
       ·试验器具的处理与准备第33-34页
       ·提取时注意事项第34页
     ·肝脏总 RNA 的提取和检测第34页
     ·RT-PCR 扩增第34-35页
     ·FQ-PCR 反应第35页
     ·试验结果的处理第35页
   ·结果与分析第35-39页
     ·总RNA 质量检测第35-36页
     ·引物质量评估第36页
     ·熔解曲线第36-37页
     ·扩增曲线第37-38页
     ·不同铁负荷条件下肝脏内HepcidinmRNA的表达差异第38-39页
   ·讨论第39-41页
第四章 Hepcidin 基因编码区的克隆与序列分析第41-52页
   ·材料与方法第41-46页
     ·仪器设备第41页
     ·试验动物第41页
     ·质粒载体和感受态细胞第41页
     ·主要试剂第41页
     ·培养基第41页
     ·溶液配制第41-42页
     ·总RNA的提取第42页
     ·Hepcidin基因的克隆第42-46页
       ·RT-PCR 扩增第42页
       ·PCR 引物设计第42页
       ·PCR 扩增第42-43页
       ·PCR 产物纯化回收第43-44页
       ·Hepcidin基因与pMD19-T载体的连接第44页
       ·连接产物的转化第44页
       ·克隆Hepcidin DNA 片段的鉴定第44-46页
   ·结果与分析第46-51页
     ·RNA 的检测第46-47页
     ·目的片段RT-PCR扩增第47页
     ·Hepcidin 重组克隆的蓝白斑筛选第47-48页
     ·Hepcidin 重组克隆的鉴定第48-49页
     ·Hepcidin cDNA 测序与分析第49-51页
   ·讨论第51-52页
总结第52-53页
参考文献第53-58页

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