| 致谢 | 第1-11页 |
| 摘要 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1. 猪细小病毒病简介 | 第12-18页 |
| ·猪细小病毒病发现及分布范围 | 第12页 |
| ·猪细小病毒病及其病原 | 第12-13页 |
| ·临床症状和病理变化 | 第13页 |
| ·猪细小病毒培养 | 第13-14页 |
| ·猪细小病毒毒株分型 | 第14页 |
| ·猪细小病毒流行病学 | 第14页 |
| ·猪细小病毒分子生物学研究进展 | 第14-15页 |
| ·PPV 检测方法研究进展 | 第15-18页 |
| ·血清学检测 | 第15页 |
| ·血凝试验(HA) | 第15页 |
| ·血凝抑制试验(HI) | 第15页 |
| ·免疫荧光技术 | 第15页 |
| ·免疫组化检测 | 第15-16页 |
| ·免疫电泳试验 | 第16页 |
| ·血清中和试验 | 第16页 |
| ·免疫间接酶染技术 | 第16页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第16-17页 |
| ·乳胶凝集试验 | 第17页 |
| ·单克隆抗体技术 | 第17页 |
| ·原位杂交 | 第17页 |
| ·PCR 检测技术 | 第17页 |
| ·DNA 探针技术 | 第17-18页 |
| 2 目的及意义 | 第18-19页 |
| 3 技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 山羊抗猪 IgG 酶标抗体制备 | 第20-27页 |
| 1 材料和方法 | 第20-25页 |
| ·主要仪器和材料 | 第20-21页 |
| ·方法 | 第21-22页 |
| ·猪 IgG 的提取和纯化 | 第21页 |
| ·IgG 的粗提 | 第21页 |
| ·IgG 的纯化 | 第21页 |
| ·山羊抗猪抗原的制备和免疫 | 第21-22页 |
| ·山羊抗猪血清的效价测定 | 第22页 |
| ·酶标抗体的制备 | 第22-24页 |
| ·改良过碘酸钠法 | 第22-23页 |
| ·戊二醛交联法 | 第23-24页 |
| ·SATP-SMCC 法标记 | 第24页 |
| ·标记效果检测 | 第24-25页 |
| 2 结果 | 第25-26页 |
| 3 讨论 | 第26-27页 |
| 第三章 PPV 病毒的培养与纯化 | 第27-30页 |
| 1 材料和方法 | 第27-28页 |
| ·材料和设备 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-28页 |
| ·细胞 | 第27页 |
| ·病毒 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-28页 |
| 2 结果 | 第28-29页 |
| 3 讨论 | 第29-30页 |
| ·胰酶的消化时间 | 第29页 |
| ·细胞的数量 | 第29页 |
| ·血清的使用浓度 | 第29页 |
| ·无菌 | 第29页 |
| ·效价测定 | 第29-30页 |
| 第四章 兔抗猪细小病毒多抗血清制备 | 第30-32页 |
| 1 材料和方法 | 第30页 |
| ·主要仪器和材料 | 第30页 |
| ·方法 | 第30页 |
| ·动物免疫 | 第30页 |
| ·效价测定 | 第30页 |
| 2 结果 | 第30页 |
| 3 讨论 | 第30-32页 |
| 第五章 PPV 病毒单克隆抗体制备 | 第32-38页 |
| 1 材料与方法 | 第32-35页 |
| ·材料与设备 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-35页 |
| ·骨髓瘤细胞 | 第32页 |
| ·实验动物 | 第32-33页 |
| ·实验动物免疫 | 第33页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第33-34页 |
| ·骨髓瘤细胞的培养 | 第33页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第33页 |
| ·脾细胞的制备 | 第33-34页 |
| ·细胞融合 | 第34页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选及克隆 | 第34页 |
| ·单克隆抗体的生产 | 第34页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第34-35页 |
| ·单克隆抗体特异性鉴定 | 第34-35页 |
| ·PPV 单抗上清和腹水效价 | 第35页 |
| ·单抗腹水 IgG 的纯化 | 第35页 |
| 2 结果 | 第35-36页 |
| ·免疫小鼠多抗的效价测定 | 第35页 |
| ·PPV 单抗杂交瘤细胞株的筛选和单抗 IgG 纯化 | 第35-36页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选及克隆 | 第35-36页 |
| ·单克隆抗体的生产 | 第36页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第36页 |
| ·PPV 单抗上清和腹水效价及工作浓度的测定 | 第36页 |
| ·单克隆抗体特异性鉴定 | 第36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| ·关于 BALB/c 小鼠免疫的方法 | 第36-37页 |
| ·关于免疫剂量 | 第37页 |
| ·关于效价检测 | 第37页 |
| ·关于单抗 IgG 的纯化 | 第37-38页 |
| 第六章 PPV 检测试纸的制备 | 第38-43页 |
| 1 材料与方法 | 第38-40页 |
| ·材料与设备 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-40页 |
| ·单克隆抗体的标记 | 第38-39页 |
| ·胶体金的制备 | 第38页 |
| ·胶体金与待标记蛋白比例的确定 | 第38页 |
| ·PPV mAb IgG 的标记 | 第38-39页 |
| ·PPV 检测试纸的制备 | 第39页 |
| ·胶金垫的制备 | 第39页 |
| ·膜的准备 | 第39页 |
| ·样品垫和吸水垫的准备 | 第39页 |
| ·试纸的组装 | 第39页 |
| ·试纸的敏感性测定 | 第39页 |
| ·试纸的特异性测定 | 第39-40页 |
| ·结果判定 | 第40页 |
| 2 结果 | 第40-41页 |
| ·试纸条的敏感性检测 | 第40页 |
| ·试纸条的特异性检测 | 第40-41页 |
| 3 讨论 | 第41-43页 |
| ·胶体金标试纸技术的优势 | 第41页 |
| ·试纸的结构及工作原理 | 第41-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| ABSTRACT | 第49-50页 |