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山羊BMP4基因多态性及其与生产性状关联性的研究

致谢第1-9页
中文摘要第9-10页
1 文献综述第10-24页
   ·山羊品种资源概况第10-11页
     ·黄淮山羊品种资源概况第10-11页
     ·中卫山羊的品种概况第11页
     ·波尔山羊的品种概况第11页
   ·BMP4 基因的结构和功能研究第11-17页
     ·骨形态发生蛋白4(BMP4)的基因结构第12-13页
     ·骨形态发生蛋白4(BMP4)基因的生物学功能第13页
     ·BMP4 基因多态性及其与动物生产性能的研究第13-14页
     ·BMP4 与哺乳动物卵泡发育的关系第14-15页
     ·BMP4 基因的信号调控机制第15-17页
       ·BMP4 受体种类及结构第15-16页
       ·BMPs 受体的生物学特性第16页
       ·Smads 蛋白的结构及分类第16页
       ·Smads 介导的信号传导第16-17页
   ·生物多态性分子标记技术的研究第17-22页
     ·单链构象多态性(Single-Strand Conformation Polymorphism SSCP)第18-20页
       ·单链构象多态性技术(PCR-SSCP)原理第18-19页
       ·单链构象多态性技术(PCR-SSCP)特点第19页
       ·单链构象多态性技术(PCR-SSCP)的应用第19页
       ·单链构象多态性技术(PCR-SSCP)的影响因素第19-20页
     ·限制性片段长度多态性(RFLP)第20-21页
       ·限制性片段长度多态性原理第20页
       ·限制性片段长度多态性技术特点第20页
       ·限制性片段长度多态性技术应用第20页
       ·限制性片段长度多态性技术影响因素第20-21页
     ·随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,缩写RAPD)第21页
       ·随机扩增多态性DNA 技术原理第21页
       ·随机扩增多态性DNA 技术特点第21页
       ·随机扩增多态性DNA 优越性和不足第21页
     ·微卫星DNA(Microsatellite DNA)标记第21-22页
       ·微卫星分析原理第21-22页
       ·微卫星标记特点第22页
       ·微卫星技术的应用第22页
   ·本研究的目的和意义第22-24页
2 引言第24-25页
3 山羊BMP4 基因部分序列的克隆与分析第25-43页
   ·材料方法第25-29页
     ·试验动物第25页
     ·主要仪器设备与试剂第25-27页
       ·药品和试剂第25页
       ·主要仪器设备第25-26页
       ·溶液试剂配制第26-27页
     ·分析软件工具第27-28页
     ·血液基因组的提取第28页
     ·DNA 琼脂糖凝胶电泳检测第28页
     ·引物设计第28-29页
     ·引物稀释第29页
   ·PCR 反应第29-32页
     ·5’UTR 部分序列的 PCR 扩增反应体系第29页
     ·内含子1 部分序列的PCR 扩增反应体系第29-30页
     ·3’UTR 部分序列的PCR 扩增反应体系第30页
     ·PCR 产物的回收和纯化第30-31页
     ·PCR 产物的连接第31页
     ·连接产物的转化第31页
     ·重组体的鉴定第31-32页
       ·β-半乳糖苷基因插入失活筛选第31页
       ·重组质粒的PCR 鉴定第31-32页
       ·重组质粒的测序第32页
   ·结果与分析第32-39页
     ·山羊血液基因组DNA 的提取第32页
     ·山羊BMP4 基因非编码序列的扩增与分析第32-34页
       ·山羊启动子部分序列的PCR 扩增及重组质粒PCR 鉴定第32-33页
       ·山羊分内含子1 部分序列的PCR 扩增第33-34页
       ·山羊3’UTR 序列区的PCR 扩增第34页
       ·山羊BMP4 基因克隆序列的测序第34页
     ·克隆序列的比较分析第34-39页
       ·BMP4 启动子部分序列的测定及分析第34-36页
       ·BMP4 基因启动子区域的转录调控元件分析第36-37页
       ·山羊BMP4 基因启动子序列同源性分析第37页
       ·山羊BMP4 内含子1 序列的分析第37-38页
       ·山羊BMP4 3’UTR 序列的测定及分析第38-39页
       ·山羊BMP4 基因3UTR’序列同源性分析第39页
   ·讨论第39-42页
     ·血液基因组DNA 的提取第39页
     ·基因组DNA 序列的克隆第39-40页
     ·BMP4 基因启动子的结构研究第40页
       ·BMP4 启动子区域转录调控元件分析第40页
       ·启动子序列进化研究分析第40页
     ·内含子的生物学功能、进化分析第40-41页
     ·3’UTR 区域的调控功能第41-42页
   ·结论第42-43页
4 山羊BMP4 基因的PCR-SSCP第43-60页
   ·实验目的第43页
   ·材料方法第43-48页
     ·药品和酶第43页
     ·主要仪器设备第43页
     ·分析工具软件与网站第43页
     ·溶液试剂配制第43页
     ·DNA 池的构建第43-44页
     ·PCR 反应条件第44页
       ·引物设计第44页
       ·PCR 扩增第44页
     ·SSCP 凝胶制备及染色方法第44-45页
       ·聚丙烯酰胺凝胶(29:1,12%)制备第44-45页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第45页
       ·银染第45页
     ·RFLP 方法说明第45页
     ·基因型判定方法第45-46页
       ·PCR-SSCP 分型第45-46页
       ·限制性酶切(RFLP)分型第46页
       ·微卫星分型第46页
       ·克隆测序第46页
     ·遗传多态性的统计分析第46-48页
       ·群体基因频率和基因型频率第46页
       ·遗传多态性分析第46-47页
       ·基因型与山羊生产性状的相关分析第47-48页
   ·结果与分析第48-56页
     ·山羊PCR-SSCP 引物的扩增结果第48-49页
       ·引物1 的PCR 结果第48页
       ·引物2 的PCR 结果第48页
       ·引物3 的PCR 结果第48-49页
       ·引物4 的PCR 结果第49页
     ·山羊BMP4 基因SSCP 检测及序列分析第49-51页
       ·SSCP 检测分析第49-51页
     ·不同基因型测序结果第51页
     ·基因的遗传特征分析第51-56页
       ·山羊 BMP4 内含子 3 SNP 基因型频率分析第51-53页
       ·BMP4 基因的遗传纯合度、杂合度、多态信息含量的分析第53-54页
       ·BMP4 基因不同基因型山羊生产性状的比较分析第54-55页
       ·山羊 BMP4 基因 3’UTR 区微卫星序列基因型频率分析第55页
       ·微卫星座位基因型与山羊体尺性状关系第55-56页
   ·讨论第56-60页
     ·血液样品保存及DNA 的提取第56页
     ·山羊血液DNA 池(DNA-pool)的构建第56-57页
     ·PCR 反应影响因素分析第57页
     ·PCR-SSCP 影响因素分析第57-58页
       ·微卫星影响因素分析第57-58页
     ·BMP4 基因多态性分析第58-60页
       ·BMP4 基因不同位点等位基因的分布第58页
       ·BMP4 基因不同位点等位基因对生产性状的影响第58-59页
       ·BMP4 基因微卫星座位对山羊生产性状的影响第59-60页
5 结论第60-61页
参考文献第61-66页
ABSTRACT第66-68页
作者简介第68页

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