致谢 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-10页 |
1 文献综述 | 第10-24页 |
·山羊品种资源概况 | 第10-11页 |
·黄淮山羊品种资源概况 | 第10-11页 |
·中卫山羊的品种概况 | 第11页 |
·波尔山羊的品种概况 | 第11页 |
·BMP4 基因的结构和功能研究 | 第11-17页 |
·骨形态发生蛋白4(BMP4)的基因结构 | 第12-13页 |
·骨形态发生蛋白4(BMP4)基因的生物学功能 | 第13页 |
·BMP4 基因多态性及其与动物生产性能的研究 | 第13-14页 |
·BMP4 与哺乳动物卵泡发育的关系 | 第14-15页 |
·BMP4 基因的信号调控机制 | 第15-17页 |
·BMP4 受体种类及结构 | 第15-16页 |
·BMPs 受体的生物学特性 | 第16页 |
·Smads 蛋白的结构及分类 | 第16页 |
·Smads 介导的信号传导 | 第16-17页 |
·生物多态性分子标记技术的研究 | 第17-22页 |
·单链构象多态性(Single-Strand Conformation Polymorphism SSCP) | 第18-20页 |
·单链构象多态性技术(PCR-SSCP)原理 | 第18-19页 |
·单链构象多态性技术(PCR-SSCP)特点 | 第19页 |
·单链构象多态性技术(PCR-SSCP)的应用 | 第19页 |
·单链构象多态性技术(PCR-SSCP)的影响因素 | 第19-20页 |
·限制性片段长度多态性(RFLP) | 第20-21页 |
·限制性片段长度多态性原理 | 第20页 |
·限制性片段长度多态性技术特点 | 第20页 |
·限制性片段长度多态性技术应用 | 第20页 |
·限制性片段长度多态性技术影响因素 | 第20-21页 |
·随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,缩写RAPD) | 第21页 |
·随机扩增多态性DNA 技术原理 | 第21页 |
·随机扩增多态性DNA 技术特点 | 第21页 |
·随机扩增多态性DNA 优越性和不足 | 第21页 |
·微卫星DNA(Microsatellite DNA)标记 | 第21-22页 |
·微卫星分析原理 | 第21-22页 |
·微卫星标记特点 | 第22页 |
·微卫星技术的应用 | 第22页 |
·本研究的目的和意义 | 第22-24页 |
2 引言 | 第24-25页 |
3 山羊BMP4 基因部分序列的克隆与分析 | 第25-43页 |
·材料方法 | 第25-29页 |
·试验动物 | 第25页 |
·主要仪器设备与试剂 | 第25-27页 |
·药品和试剂 | 第25页 |
·主要仪器设备 | 第25-26页 |
·溶液试剂配制 | 第26-27页 |
·分析软件工具 | 第27-28页 |
·血液基因组的提取 | 第28页 |
·DNA 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第28页 |
·引物设计 | 第28-29页 |
·引物稀释 | 第29页 |
·PCR 反应 | 第29-32页 |
·5’UTR 部分序列的 PCR 扩增反应体系 | 第29页 |
·内含子1 部分序列的PCR 扩增反应体系 | 第29-30页 |
·3’UTR 部分序列的PCR 扩增反应体系 | 第30页 |
·PCR 产物的回收和纯化 | 第30-31页 |
·PCR 产物的连接 | 第31页 |
·连接产物的转化 | 第31页 |
·重组体的鉴定 | 第31-32页 |
·β-半乳糖苷基因插入失活筛选 | 第31页 |
·重组质粒的PCR 鉴定 | 第31-32页 |
·重组质粒的测序 | 第32页 |
·结果与分析 | 第32-39页 |
·山羊血液基因组DNA 的提取 | 第32页 |
·山羊BMP4 基因非编码序列的扩增与分析 | 第32-34页 |
·山羊启动子部分序列的PCR 扩增及重组质粒PCR 鉴定 | 第32-33页 |
·山羊分内含子1 部分序列的PCR 扩增 | 第33-34页 |
·山羊3’UTR 序列区的PCR 扩增 | 第34页 |
·山羊BMP4 基因克隆序列的测序 | 第34页 |
·克隆序列的比较分析 | 第34-39页 |
·BMP4 启动子部分序列的测定及分析 | 第34-36页 |
·BMP4 基因启动子区域的转录调控元件分析 | 第36-37页 |
·山羊BMP4 基因启动子序列同源性分析 | 第37页 |
·山羊BMP4 内含子1 序列的分析 | 第37-38页 |
·山羊BMP4 3’UTR 序列的测定及分析 | 第38-39页 |
·山羊BMP4 基因3UTR’序列同源性分析 | 第39页 |
·讨论 | 第39-42页 |
·血液基因组DNA 的提取 | 第39页 |
·基因组DNA 序列的克隆 | 第39-40页 |
·BMP4 基因启动子的结构研究 | 第40页 |
·BMP4 启动子区域转录调控元件分析 | 第40页 |
·启动子序列进化研究分析 | 第40页 |
·内含子的生物学功能、进化分析 | 第40-41页 |
·3’UTR 区域的调控功能 | 第41-42页 |
·结论 | 第42-43页 |
4 山羊BMP4 基因的PCR-SSCP | 第43-60页 |
·实验目的 | 第43页 |
·材料方法 | 第43-48页 |
·药品和酶 | 第43页 |
·主要仪器设备 | 第43页 |
·分析工具软件与网站 | 第43页 |
·溶液试剂配制 | 第43页 |
·DNA 池的构建 | 第43-44页 |
·PCR 反应条件 | 第44页 |
·引物设计 | 第44页 |
·PCR 扩增 | 第44页 |
·SSCP 凝胶制备及染色方法 | 第44-45页 |
·聚丙烯酰胺凝胶(29:1,12%)制备 | 第44-45页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第45页 |
·银染 | 第45页 |
·RFLP 方法说明 | 第45页 |
·基因型判定方法 | 第45-46页 |
·PCR-SSCP 分型 | 第45-46页 |
·限制性酶切(RFLP)分型 | 第46页 |
·微卫星分型 | 第46页 |
·克隆测序 | 第46页 |
·遗传多态性的统计分析 | 第46-48页 |
·群体基因频率和基因型频率 | 第46页 |
·遗传多态性分析 | 第46-47页 |
·基因型与山羊生产性状的相关分析 | 第47-48页 |
·结果与分析 | 第48-56页 |
·山羊PCR-SSCP 引物的扩增结果 | 第48-49页 |
·引物1 的PCR 结果 | 第48页 |
·引物2 的PCR 结果 | 第48页 |
·引物3 的PCR 结果 | 第48-49页 |
·引物4 的PCR 结果 | 第49页 |
·山羊BMP4 基因SSCP 检测及序列分析 | 第49-51页 |
·SSCP 检测分析 | 第49-51页 |
·不同基因型测序结果 | 第51页 |
·基因的遗传特征分析 | 第51-56页 |
·山羊 BMP4 内含子 3 SNP 基因型频率分析 | 第51-53页 |
·BMP4 基因的遗传纯合度、杂合度、多态信息含量的分析 | 第53-54页 |
·BMP4 基因不同基因型山羊生产性状的比较分析 | 第54-55页 |
·山羊 BMP4 基因 3’UTR 区微卫星序列基因型频率分析 | 第55页 |
·微卫星座位基因型与山羊体尺性状关系 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56-60页 |
·血液样品保存及DNA 的提取 | 第56页 |
·山羊血液DNA 池(DNA-pool)的构建 | 第56-57页 |
·PCR 反应影响因素分析 | 第57页 |
·PCR-SSCP 影响因素分析 | 第57-58页 |
·微卫星影响因素分析 | 第57-58页 |
·BMP4 基因多态性分析 | 第58-60页 |
·BMP4 基因不同位点等位基因的分布 | 第58页 |
·BMP4 基因不同位点等位基因对生产性状的影响 | 第58-59页 |
·BMP4 基因微卫星座位对山羊生产性状的影响 | 第59-60页 |
5 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
ABSTRACT | 第66-68页 |
作者简介 | 第68页 |