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基于核酸扩增技术分析单核苷酸多态性、mRNA剪接变体及端粒酶活性

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第1章 绪论第11-49页
    1.1 单核苷酸多态性(SNP)概述及分析方法研究进展第12-25页
        1.1.1 基于杂交原理的SNP分析方法第13-15页
        1.1.2 基于工具酶的SNP分析方法第15-24页
        1.1.3 基于新一代测序的SNP分析方法第24-25页
    1.2 选择性剪接概述第25-33页
        1.2.1 选择性剪接的生物学意义第25-27页
        1.2.2 选择性剪接的类型第27-28页
        1.2.3 选择性剪接调控机制第28-30页
        1.2.4 选择性剪接与遗传性疾病以及癌症的关系第30-31页
        1.2.5 选择性剪接分析方法第31-33页
    1.3 端粒酶概述及研究进展第33-44页
        1.3.1 端粒酶概述第33-35页
        1.3.2 端粒酶活性分析概述第35-44页
    1.4 环介导的核酸等温扩增技术第44-47页
    1.5 本论文研究内容及创新点第47-49页
第2章 基于连接反应的环介导等温扩增结合光散射技术的SNP分析第49-60页
    2.1 引言第49-50页
    2.2 实验部分第50-52页
        2.2.1 仪器与试剂第50-51页
        2.2.2 实验过程第51-52页
    2.3 结果与讨论第52-59页
        2.3.1 基于连接反应的环介导等温扩增结合光散射技术的SNP分析原理第52-53页
        2.3.2 实验条件优化第53-55页
        2.3.3 基于连接反应的环介导等温扩增结合光散射技术检测SNP方法的灵敏度和选择性第55-57页
        2.3.4 突变频率检测第57-58页
        2.3.5 检测基因组中mutDNA和wtDNA第58-59页
        2.3.6 基因组DNA的P53基因外显子8测序结果第59页
    2.4 小结第59-60页
第3章 基于连接反应的PCR技术检测mRNA剪接变体的研究第60-79页
    3.1 引言第60-61页
    3.2 实验部分第61-65页
        3.2.1 仪器和试剂第61-62页
        3.2.2 细胞培养及总RNA的提取第62-63页
        3.2.3 实验过程第63-65页
    3.3 结果与讨论第65-77页
        3.3.1 基于连接反应的PCR技术检测mRNA剪接变体的原理第65-66页
        3.3.2 基于连接反应的PCR技术检测mRNA剪接变体电泳分析结果第66-74页
        3.3.3 基于连接反应的PCR技术检测mRNA剪接变体实时定量结果第74-77页
    3.4 小结第77-79页
第4章 基于茎环结构DNA引物介导的指数扩增反应检测端粒酶活性的研究第79-99页
    4.1 引言第79-80页
    4.2 实验部分第80-83页
        4.2.1 试剂与仪器第80-81页
        4.2.2 实验过程第81-83页
    4.3 结果与讨论第83-98页
        4.3.1 基于茎环DNA引物介导指数扩增(SPEA)反应检测粒酶活性原理第83-86页
        4.3.2 SPEA反应条件优化第86-89页
        4.3.3 基于SPEA反应的分析灵敏度与线性范围第89-90页
        4.3.4 细胞提取液和细胞裂解液中端粒酶活性分析第90-92页
        4.3.5 SPEA方法无非特异性扩增的评价和解释第92-94页
        4.3.6 检测不同细胞系端粒酶活性第94-95页
        4.3.7 SPEA反应PAGE分析验证第95-96页
        4.3.8 检测CEM、HCT-116、MCF-7、MRC-5四种细胞提取液和裂解液中端粒酶的活性第96-98页
    4.4 小结第98-99页
第5章 结论与展望第99-101页
    5.1 结论第99-100页
    5.2 展望第100-101页
参考文献第101-126页
致谢第126-127页
攻读博士学位期间的研究成果第127-128页

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