摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-17页 |
缩略词表(ABBREVIATION) | 第17-18页 |
第一章 绪论 | 第18-44页 |
·趋磁细菌的一般特性 | 第18-26页 |
·形态和系统发育多样性 | 第18-20页 |
·生理学 | 第20-22页 |
·生态学 | 第22-26页 |
·磁小体 | 第26-32页 |
·磁铁矿晶核 | 第26-28页 |
·磁小体膜 | 第28-31页 |
·磁小体的胞内排列 | 第31-32页 |
·磁小体的合成机制 | 第32-39页 |
·磁小体合成的遗传控制 | 第32-33页 |
·铁的吸收与转运 | 第33-35页 |
·磁小体囊泡的形成与磁铁矿的生物矿化 | 第35-39页 |
·趋磁细菌与磁小体研究的意义和应用前景 | 第39-42页 |
·趋磁细菌与磁小体研究的理论意义 | 第39-41页 |
·趋磁细菌与磁小体的应用前景 | 第41-42页 |
·论文的立题依据和研究内容 | 第42-44页 |
第二章 趋磁螺菌AMB-1生长特性的研究 | 第44-52页 |
·材料与方法 | 第44-46页 |
·菌种 | 第44页 |
·培养基 | 第44-45页 |
·培养方法 | 第45页 |
·菌体生长与磁性测定 | 第45页 |
·透射电子显微镜(TEM)观察 | 第45-46页 |
·结果与分析 | 第46-50页 |
·不同培养条件对菌体生长和磁小体合成的影响 | 第46-48页 |
·不同生长因素对趋磁螺菌AMB-1固体平板生长能力的影响 | 第48-50页 |
·小结与讨论 | 第50-52页 |
第三章 趋磁螺菌AMB-1中磁小体岛基因mms6与磁小体合成关系的研究 | 第52-75页 |
·材料与方法 | 第52-58页 |
·菌株及质粒 | 第52页 |
·培养基 | 第52-53页 |
·趋磁螺菌AMB-1的RNA提取 | 第53-54页 |
·反转录PCR(RT-PCR)技术 | 第54页 |
·荧光定量PCR技术 | 第54-55页 |
·基因mms6启动子的预测及克隆 | 第55-56页 |
·基因mms6启动子和gfp基因片段的融合PCR | 第56页 |
·GFP表达载体pBBR-P1-GFP和pBBR-P2-GFP的构建 | 第56-57页 |
·趋磁螺菌AMB-P1-GFP和AMB-P2-GFP的获得 | 第57页 |
·荧光显微镜观察 | 第57页 |
·GFP荧光光谱的检测 | 第57页 |
·基因mms6插入突变载体pAKO-mms6的构建 | 第57-58页 |
·突变菌株AMB-Δmms6的获得及验证 | 第58页 |
·结果与分析 | 第58-73页 |
·趋磁螺菌AMB-1的RNA提取 | 第58-60页 |
·荧光定量PCR对基因mms6转录水平的分析 | 第60-63页 |
·基于mms6启动子的GFP荧光光谱分析 | 第63-70页 |
·载体pAKO-mms6的构建 | 第70-71页 |
·突变株AMB-Δmms6生长特性的研究 | 第71-73页 |
·小结与讨论 | 第73-75页 |
第四章 趋磁螺菌AMB-1中Mms6蛋白的功能研究 | 第75-97页 |
·材料与方法 | 第75-81页 |
·菌株及质粒 | 第75页 |
·培养基 | 第75页 |
·基因mms6的克隆 | 第75-76页 |
·重组表达载体pGEX-mms6以及pET-mms6的构建 | 第76页 |
·基因mms6的异源表达 | 第76-77页 |
·GST融合蛋白的纯化 | 第77-78页 |
·组氨酸标签重组蛋白的纯化 | 第78-79页 |
·Tricine-SDS-PAGE | 第79页 |
·分子筛层析 | 第79-80页 |
·Western Blotting检测 | 第80页 |
·蛋白质非变性凝胶电泳 | 第80-81页 |
·CD光谱的检测 | 第81页 |
·透射电子显微镜(TEM)观察负染蛋白质 | 第81页 |
·蛋白质铁染色 | 第81页 |
·结果与分析 | 第81-95页 |
·蛋白Mms6的异源表达与纯化 | 第81-91页 |
·重组表达载体pGEX-mms6和pET-mms6的构建 | 第81-82页 |
·含GST标签和组氨酸标签重组蛋白的表达与纯化 | 第82-91页 |
·重组蛋白His-Mms6性质的研究 | 第91-95页 |
·小结与讨论 | 第95-97页 |
第五章 趋磁螺菌AMB-1的转座诱变及不产磁突变菌株的性质研究 | 第97-128页 |
·材料与方法 | 第97-102页 |
·菌株、质粒及引物 | 第97页 |
·培养条件 | 第97-99页 |
·转座诱变及不产磁突变株的筛选 | 第99-100页 |
·磁小体岛基因簇的PCR验证 | 第100页 |
·转座诱变随机突变株转座子插入位置的分析 | 第100-101页 |
·一氧化氮还原酶基因突变株(AMB06)的基因功能回补 | 第101页 |
·一氧化氮还原酶基因突变株(AMB06)中基因amb1395的插入突变 | 第101页 |
·透射电子显微镜(TEM)观察 | 第101页 |
·添加外源NO实验 | 第101页 |
·GFP融合磁小体蛋白MamA和MamJ的荧光观察 | 第101-102页 |
·结果与分析 | 第102-125页 |
·TnSC189转座诱变趋磁螺菌AMB-1突变株的筛选 | 第102页 |
·AMB-1产磁能力降低突变菌株中转座子插入位置分析 | 第102-104页 |
·AMB-1产磁能力降低突变菌株生长特性的研究 | 第104-105页 |
·AMB-1产磁能力降低突变株AMB06的功能回补 | 第105-108页 |
·NO对趋磁螺菌AMB-1野生型和突变株生长和产磁的影响 | 第108-110页 |
·AMB-1产磁能力降低突变株在不同氧分压条件下的生长和产磁特性 | 第110-117页 |
·趋磁螺菌在以铵盐为唯一氮源时的厌氧发酵 | 第117-120页 |
·融合磁小体蛋白的GFP荧光观察 | 第120-125页 |
·小结与讨论 | 第125-128页 |
全文总结 | 第128-132页 |
参考文献 | 第132-142页 |
致谢 | 第142-144页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第144-145页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第145-146页 |
外文写作一 | 第146-162页 |
外文写作二 | 第162-169页 |