摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第1章 文献综述 | 第10-28页 |
1.1 CAEV概述 | 第10-21页 |
1.1.1 分类地位 | 第10-12页 |
1.1.2 分子生物学研究 | 第12-16页 |
1.1.3 生物学周期简述 | 第16-17页 |
1.1.4 致病机理 | 第17-18页 |
1.1.5 流行病学特点及临床特征 | 第18-20页 |
1.1.6 诊断与防治 | 第20-21页 |
1.2 CAEV感染的免疫反应 | 第21-24页 |
1.2.1 CAEV引起的先天免疫应答 | 第22-23页 |
1.2.2 CAEV引起的适应性免疫应答 | 第23-24页 |
1.3 I型 IFN概述 | 第24-27页 |
1.3.1 产生IFN-β信号通路介绍 | 第25-26页 |
1.3.2 I型 IFN信号传导和ISG的诱导 | 第26-27页 |
1.4 研究目的及意义 | 第27-28页 |
第2章 不同CAEV蛋白对IFN-β产生的调节作用 | 第28-52页 |
2.1 引言 | 第28页 |
2.2 实验材料 | 第28-35页 |
2.2.1 实验用细胞、病毒、菌株与载体 | 第28-29页 |
2.2.2 主要试剂 | 第29-35页 |
2.2.3 实验仪器设备 | 第35页 |
2.3 实验方法 | 第35-43页 |
2.3.1 基因克隆 | 第35-37页 |
2.3.2 载体构建及验证 | 第37-39页 |
2.3.3 细胞转染及接毒(以12孔板为例) | 第39-40页 |
2.3.4 真核载体表达验证 | 第40页 |
2.3.5 总RNA提取及cDNA合成 | 第40-41页 |
2.3.6 相对荧光定量PCR检测 | 第41-42页 |
2.3.7 荧光素酶活性检测 | 第42-43页 |
2.4 实验结果与分析 | 第43-49页 |
2.4.1 CAEV基因扩增 | 第43-44页 |
2.4.2 真核表达载体构建及验证 | 第44-46页 |
2.4.3 过表达病毒蛋白对SeV复制的影响 | 第46-47页 |
2.4.4 病毒蛋白对IFN-β的影响 | 第47-49页 |
2.5 讨论 | 第49-50页 |
2.5.1 CAEV蛋白对SeV增殖的影响 | 第49-50页 |
2.5.2 CAEV蛋白对IFN-β的影响 | 第50页 |
2.6 本章小结 | 第50-52页 |
第3章 DU影响IFN-β产生的分子机制 | 第52-66页 |
3.1 引言 | 第52页 |
3.2 实验材料 | 第52-53页 |
3.2.1 实验用细胞、病毒、菌株与载体 | 第52页 |
3.2.2 主要试剂 | 第52-53页 |
3.3 实验方法 | 第53-55页 |
3.3.1 基因克隆 | 第53-54页 |
3.3.2 载体构建及验证 | 第54-55页 |
3.3.3 相对荧光定量PCR检测 | 第55页 |
3.4 实验结果与分析 | 第55-62页 |
3.4.1 DU对 IFN-β的抑制作用不受标签蛋白的影响 | 第55-57页 |
3.4.2 DU促进SeV和 VSV复制 | 第57-59页 |
3.4.3 DU剂量依赖性的抑制IFN-β的表达 | 第59-60页 |
3.4.4 DU在 IFN-β产生的信号通路上的作用 | 第60-62页 |
3.5 讨论 | 第62-63页 |
3.6 本章小结 | 第63-66页 |
第4章 CAEV蛋白Vif对 IFN-β转录表达的影响 | 第66-78页 |
4.1 引言 | 第66页 |
4.2 实验材料 | 第66页 |
4.2.1 实验用细胞、病毒、菌株与载体 | 第66页 |
4.2.2 主要试剂 | 第66页 |
4.3 实验方法 | 第66-68页 |
4.3.1 基因克隆 | 第66-68页 |
4.3.2 载体构建及验证 | 第68页 |
4.4 实验结果与分析 | 第68-76页 |
4.4.1 Vif抑制IFN-β信号通路 | 第68-70页 |
4.4.2 Vif抑制的信号通路中位于IRF3上游的信号分子 | 第70-72页 |
4.4.3 Vif中有关键结构域影响其抑制IFN-β的功能 | 第72-76页 |
4.5 讨论 | 第76-77页 |
4.6 本章小结 | 第77-78页 |
结论 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-90页 |
附录 | 第90-92页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第92-94页 |
致谢 | 第94页 |