| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 符号与缩略语 | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 传染性法氏囊病毒研究进展 | 第12-16页 |
| 1.1.1 IBD的流行 | 第12-13页 |
| 1.1.2 IBDV的生物学性状 | 第13-14页 |
| 1.1.3 IBDV基因组结构 | 第14页 |
| 1.1.4 IBDV基因编码的主要蛋白及其功能 | 第14-15页 |
| 1.1.5 IBD的防制 | 第15-16页 |
| 1.2 杆状病毒表达载体系统概述 | 第16-17页 |
| 1.2.1 杆状病毒的生物学特征及分类 | 第16页 |
| 1.2.2 杆状病毒表达系统及其优缺点 | 第16-17页 |
| 1.3 杆状病毒作为疫苗载体的应用 | 第17-19页 |
| 1.3.1 杆状病毒作为哺乳动物疫苗载体的应用 | 第17-18页 |
| 1.3.2 杆状病毒作为禽类疫苗载体的应用 | 第18-19页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 1.5 本研究的实验技术路线 | 第20-22页 |
| 1.5.1 重组杆状病毒转移载体的构建策略 | 第20-21页 |
| 1.5.2 重组杆状病毒的扩增和外源基因的表达 | 第21-22页 |
| 1.5.3 重组杆状病毒免疫原性的初步探索 | 第22页 |
| 1.6 课题资助名称 | 第22-23页 |
| 第2章 材料与方法 | 第23-65页 |
| 2.1 试验材料 | 第23-34页 |
| 2.1.1 供试材料 | 第23-27页 |
| 2.1.2 扩增引物 | 第27-29页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第29页 |
| 2.1.4 主要分子生物学及生化试剂 | 第29-30页 |
| 2.1.5 主要缓冲液及试剂配制 | 第30-34页 |
| 2.2 试验方法 | 第34-65页 |
| 2.2.1 重组转移载体的构建 | 第34-51页 |
| 2.2.2 重组杆状病毒穿梭载体Bacmid DNA的获得 | 第51-53页 |
| 2.2.3 重组杆状病毒穿梭载体Bacmid DNA转染Sf9昆虫细胞 | 第53-57页 |
| 2.2.4 重组杆状病毒的扩培及滴度测定 | 第57-58页 |
| 2.2.5 重组杆状病毒在鸡胚成纤维细胞中表达 | 第58-59页 |
| 2.2.6 重组蛋白的SDS-PAGE及其Western-blotting鉴定 | 第59-62页 |
| 2.2.7 重组杆状病毒的鸡体免疫试验 | 第62-65页 |
| 第3章 结果 | 第65-88页 |
| 3.1 重组转移载体的构建 | 第65-74页 |
| 3.1.1 启动子cmv的克隆与鉴定 | 第65-66页 |
| 3.1.2 具有CMV启动子的重组载体构建 | 第66-70页 |
| 3.1.3 重组转移载体pS-VP2系列的构建 | 第70-72页 |
| 3.1.4 重组转移载体pS-VP2/4/3系列的构建 | 第72-74页 |
| 3.2 重组杆状病毒穿梭载体的鉴定 | 第74-75页 |
| 3.2.1 重组穿梭转移载体Bacmid VP2系列的鉴定 | 第74-75页 |
| 3.2.2 重组穿梭转移载体Bacmid VP2/4/3系列的鉴定 | 第75页 |
| 3.3 重组杆状病毒穿梭载体转染昆虫细胞 | 第75-76页 |
| 3.3.1 Sf9昆虫细胞生长曲线的绘制 | 第75-76页 |
| 3.3.2 Sf9昆虫细胞正常及病变形态比较 | 第76页 |
| 3.4 重组杆状病毒的扩增及滴度测定 | 第76-78页 |
| 3.4.1 重组杆状病毒滴度测定 | 第76-77页 |
| 3.4.2 重组杆状病毒的PCR鉴定 | 第77-78页 |
| 3.5 重组杆状病毒介导目的基因在鸡胚成纤维细胞中的表达及分析 | 第78-82页 |
| 3.5.1 鸡胚成纤维细胞的形态 | 第78-79页 |
| 3.5.2 重组蛋白的SDS-PAGE及其Western-blotting鉴定 | 第79-81页 |
| 3.5.3 重组蛋白的Western blotting分析 | 第81-82页 |
| 3.6 动物免疫-攻毒试验 | 第82-88页 |
| 3.6.1 免疫和攻毒后各试验组的临床症状 | 第82-83页 |
| 3.6.2 法氏囊眼观病变和统计学分析 | 第83-84页 |
| 3.6.3 血清抗体检测 | 第84-86页 |
| 3.6.4 中和抗体消长规律的测定 | 第86-88页 |
| 第4章 讨论 | 第88-94页 |
| 4.1 课题背景 | 第88页 |
| 4.2 编码的抗原基因对重组杆状病毒疫苗免疫原性的影响 | 第88-90页 |
| 4.3 载体对重组杆状病毒疫苗免疫原性的影响 | 第90-92页 |
| 4.3.1 WPRE对外源基因表达效率的影响 | 第90-91页 |
| 4.3.2 ITRs对外源基因表达的影响 | 第91-92页 |
| 4.4 高效价病毒的获得 | 第92-93页 |
| 4.5 免疫剂量和免疫程序的选择 | 第93-94页 |
| 第5章 结论 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-104页 |
| 附录 | 第104-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第112-113页 |
