摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略语 | 第10-16页 |
第一部分: 白念珠菌刺激角质形成细胞上清液对巨噬细胞天然免疫功能的影响 | 第16-38页 |
1 前言 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-27页 |
2.1 研究对象 | 第17页 |
2.1.1 细胞株 | 第17页 |
2.1.2 白念珠菌标准株 | 第17页 |
2.1.3 实验分组 | 第17页 |
2.2 主要试剂及耗材 | 第17-20页 |
2.2.1 主要试剂及耗材 | 第17-19页 |
2.2.2 部分试剂配制 | 第19-20页 |
2.3 主要仪器 | 第20页 |
2.4 实验方法 | 第20-27页 |
2.4.1 细胞培养 | 第21页 |
2.4.2 白念珠菌的培养及灭活孢子的制备 | 第21-22页 |
2.4.3 条件培养基上清的制备 | 第22页 |
2.4.4 趋化功能检测 | 第22-23页 |
2.4.5 吞噬功能检测 | 第23页 |
2.4.6 NO合成检测 | 第23-24页 |
2.4.7 Real-time RT-PCR检测iNOS | 第24-26页 |
2.4.8 统计学处理 | 第26-27页 |
3 结果 | 第27-34页 |
3.1 白念珠菌灭活孢子刺激角质形成细胞生成的上清液对U937细胞趋化功能的影响 | 第27-29页 |
3.2 不同菌量负荷的角质形成细胞上清液对U937巨噬样细胞吞噬功能的影响 | 第29-30页 |
3.3 不同菌量负荷的角质形成细胞上清液对U937巨噬样细胞NO合成的影响 | 第30-34页 |
4 讨论 | 第34-37页 |
5 结论 | 第37-38页 |
第二部分: 白念珠菌刺激角质形成细胞上清液对巨噬细胞极化及抗原提呈相关分子表达的影响 | 第38-59页 |
1 前言 | 第38-40页 |
2 材料与方法 | 第40-47页 |
2.1 研究对象 | 第40页 |
2.2 主要试剂 | 第40-41页 |
2.2.1 细胞培养、真菌培养及Real-time RT-PCR试剂 | 第40页 |
2.2.2 Western-Blot | 第40页 |
2.2.3 流式细胞术 | 第40-41页 |
2.2.4 Real-time RT-PCR引物由上海立菲生物技术有限公司设计并合成 | 第41页 |
2.3 主要仪器 | 第41-42页 |
2.4 实验方法 | 第42-47页 |
2.4.1 细胞培养、真菌培养及条件培养基上清的制备 | 第42页 |
2.4.2 Real-time RT-PCR法检测TLR-2、TLR-4、dectin-1、HLA-DR、CD86和CD80的表达 | 第42-44页 |
2.4.3 流式细胞术检测HLA-DR、CD86、CD80、CD206和CD163的表达 | 第44-47页 |
3 结果 | 第47-56页 |
3.1 不同菌量负荷的角质形成细胞上清液对巨噬细胞CD80、CD86、CD206、CD163、HLA-DR分子表达的影响 | 第47-50页 |
3.2 Real-time RT-PCR法检测不同菌量负荷的角质形成细胞上清液对巨噬细胞CD86和HLA-DR mRNA的表达的影响 | 第50-51页 |
3.3 不同菌量负荷的角质形成细胞上清液对巨噬细胞TLR-2、TLR-4、dectin-1表达的影响 | 第51-56页 |
4 讨论 | 第56-58页 |
5 结论 | 第58-59页 |
第三部分: 白念珠菌刺激角质形成细胞上清液蛋白质谱分析 | 第59-77页 |
1 前言 | 第59-60页 |
2 材料与方法 | 第60-64页 |
2.1 研究对象 | 第60页 |
2.2 主要试剂及仪器 | 第60页 |
2.3 实验方法 | 第60-64页 |
2.3.1 细胞培养、真菌培养 | 第60页 |
2.3.2 条件培养基上清的制备 | 第60页 |
2.3.3 分泌蛋白shotgun(由上海中科新生命科技有限公司测试完成) | 第60-64页 |
3 结果 | 第64-73页 |
4 讨论 | 第73-76页 |
5 结论 | 第76-77页 |
本研究创新性的自我评价 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-84页 |
综述 | 第84-97页 |
参考文献 | 第90-97页 |
在学期间科研成绩 | 第97-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
个人简介 | 第99页 |