| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-21页 |
| 1 脂肪肝出血综合征 | 第12-13页 |
| 1.1 FLHS研究进展 | 第12页 |
| 1.2 FLHS发病机制研究进展 | 第12-13页 |
| 2 胰岛素及其信号通路 | 第13-16页 |
| 2.1 胰岛素及其信号通路概述 | 第13-15页 |
| 2.2 禽类胰岛素调控特点 | 第15-16页 |
| 3 胰岛素抵抗(IR) | 第16-19页 |
| 3.1 IR概述 | 第16页 |
| 3.2 IR发生机理 | 第16页 |
| 3.3 mTOR负反馈作用对IR的调节 | 第16-17页 |
| 3.4 IR对机体脂质葡萄糖代谢的影响 | 第17-18页 |
| 3.5 IR对机体营养代谢病的影响 | 第18页 |
| 3.6 IR体内模型与体外模型构建 | 第18-19页 |
| 3.6.1 IR体内模型构建 | 第18-19页 |
| 3.6.2 IR体外模型构建 | 第19页 |
| 4 研究目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二部分 实验研究 | 第21-51页 |
| 1 材料与方法 | 第21-27页 |
| 1.1 实验动物 | 第21页 |
| 1.2 实验材料 | 第21页 |
| 1.3 仪器设备 | 第21页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第21-22页 |
| 1.5 实验方法 | 第22-27页 |
| 1.5.1 原代肝细胞的分离 | 第22页 |
| 1.5.2 高产蛋鸡原代肝细胞的鉴定 | 第22-23页 |
| 1.5.3 高产蛋鸡原代肝细胞IR模型的构建 | 第23页 |
| 1.5.4 CCK8对细胞存活率的检测 | 第23页 |
| 1.5.5 糖原染色对肝细胞糖原进行鉴定 | 第23页 |
| 1.5.6 油红染色对细胞脂质进行鉴定 | 第23-24页 |
| 1.5.7 试剂盒对脂质含量的测定 | 第24页 |
| 1.5.8 QPCR检测胰岛素信号通路和脂肪代谢相关基因mRNA表达 | 第24-26页 |
| 1.5.9 Western blot检测胰岛素信号通路相关蛋白表达 | 第26-27页 |
| 1.5.10 数据分析 | 第27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-42页 |
| 2.1 高产蛋鸡原代肝细胞IR模型的建立 | 第27-31页 |
| 2.1.1 肝细胞形态学鉴定 | 第27-29页 |
| 2.1.2 IR模型的建立 | 第29-31页 |
| 2.2 IR对胰岛素信号通路相关基因mRNA和蛋白表达的影响 | 第31页 |
| 2.3 IR对蛋鸡肝细胞脂质代谢的影响 | 第31-34页 |
| 2.3.1 细胞形态学比较以及细胞内脂滴鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3.2 脂质代谢相关指标 | 第32-33页 |
| 2.3.3 IR对葡萄糖转运蛋白相关基因mRNA表达水平的影响 | 第33-34页 |
| 2.3.4 IR对脂肪代谢相关基因mRNA水平的影响 | 第34页 |
| 2.4 Rapamycin抑制蛋鸡肝细胞脂质合成 | 第34-38页 |
| 2.4.1 Rapamycin对胰岛素信号通路相关基因和蛋白表达的影响 | 第34-35页 |
| 2.4.2 Rapamycin增加高产蛋鸡肝细胞对胰岛素的敏感性 | 第35-36页 |
| 2.4.3 Rapamycin对蛋鸡肝细胞脂质合成的影响 | 第36-37页 |
| 2.4.4 Rapamycin对葡萄糖转运蛋白相关基因mRNA表达的影响 | 第37页 |
| 2.4.5 Rapamycin对脂肪代谢关键基因mRNA水平的影响 | 第37-38页 |
| 2.5 mTOR通过负反馈调节IR促进蛋鸡肝细脂质合成 | 第38-42页 |
| 2.5.1 Rapamycin抑制mTOR后改善IR对胰岛素信号通路基因的影响 | 第38-39页 |
| 2.5.2 Rapamycin通过抑制mTOR消除高糖诱导的IR | 第39-40页 |
| 2.5.3 Rapamycin通过抑制mTOR削弱IR对肝细胞脂质合成的诱导作用 | 第40-41页 |
| 2.5.4 Rapamycin通过抑制mTOR改善IR对葡萄糖转运蛋白相关基因mRNA的影响 | 第41页 |
| 2.5.5 Rapamycin通过抑制mTOR改善IR对脂质代谢关键基因mRNA的影响 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-50页 |
| 3.1 高产蛋鸡原代肝细胞的培养与鉴定 | 第42-43页 |
| 3.2 IR对蛋鸡肝细胞脂质葡萄糖代谢的影响 | 第43-47页 |
| 3.2.1 高产蛋鸡肝细胞IR模型的建立 | 第43-44页 |
| 3.2.2 IR对蛋鸡肝细胞脂质葡萄糖代谢的影响 | 第44-47页 |
| 3.3 mTOR抑制剂rapamycin对蛋鸡肝细胞葡萄糖脂质代谢的影响 | 第47-48页 |
| 3.4 IR通过mTOR负反馈调节介导蛋鸡肝细胞脂质葡萄糖代谢 | 第48-50页 |
| 4 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 附录 | 第60页 |
