| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 英文缩略词表 | 第9-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 1.材料 | 第14-18页 |
| 1.1 主要材料试剂 | 第14-15页 |
| 1.2 试剂配制 | 第15-16页 |
| 1.3 仪器设备 | 第16-18页 |
| 2.实验方法 | 第18-30页 |
| 2.1 细胞培养实验 | 第18-21页 |
| 2.1.1 细胞生长条件 | 第18页 |
| 2.1.2 细胞复苏 | 第18页 |
| 2.1.3 细胞传代 | 第18-19页 |
| 2.1.4 细胞冻存 | 第19页 |
| 2.1.5 细胞转染 | 第19页 |
| 2.1.6 慢病毒感染实验 | 第19-20页 |
| 2.1.7 辐射条件 | 第20页 |
| 2.1.8 细胞生长曲线测定 | 第20-21页 |
| 2.1.9 细胞毒性实验 | 第21页 |
| 2.2 过表达质粒的双酶切鉴定 | 第21-22页 |
| 2.3 TOP10感受态细胞的制备 | 第22页 |
| 2.4 真核表达质粒转化TOP10感受态细胞 | 第22-23页 |
| 2.5 普通质粒的提取 | 第23页 |
| 2.6 无内毒素质粒的提取 | 第23-24页 |
| 2.7 亚细胞定位检测实验 | 第24-26页 |
| 2.7.1 荧光共定位检测 | 第24-25页 |
| 2.7.2 核质分离实验 | 第25-26页 |
| 2.8 WESTERN-BLOT实验验证 | 第26-30页 |
| 2.8.1 收集蛋白样品 | 第26页 |
| 2.8.2 BCA试剂盒测蛋白浓度 | 第26页 |
| 2.8.3 Western-blot实验 | 第26-30页 |
| 3.实验结果 | 第30-44页 |
| 3.1 紫外辐照细胞模型的构建结果 | 第30-32页 |
| 3.2 PTEN及其单泛素化位点突变体的亚细胞定位 | 第32-41页 |
| 3.2.1 真核表达载体的鉴定 | 第32页 |
| 3.2.2 重组质粒在U87细胞中的表达 | 第32-34页 |
| 3.2.3 PTEN及其单泛素化位点突变体(K13E-PTEN)的亚细胞定位 | 第34-35页 |
| 3.2.4 紫外辐射对PTEN及其单泛素化位点突变体(K13E-PTEN)亚细胞定位的影响 | 第35-41页 |
| 3.3 细胞功能实验 | 第41-44页 |
| 3.3.1 紫外辐照条件下PTEN及其单泛素化位点突变体(K13E-PTEN)对细胞增殖的影响 | 第41页 |
| 3.3.2 紫外辐照条件下PTEN及其单泛素化位点突变体(K13E-PTEN)对细胞凋亡的影响 | 第41-44页 |
| 讨论 | 第44-46页 |
| 结论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-50页 |
| 综述 | 第50-62页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 致谢 | 第62-64页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第64-65页 |
