| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-42页 |
| 1 植物中microRNA(miRNA)生物加工和功能研究进展 | 第13-24页 |
| 1.1 miRNA在时空表达调控中的作用 | 第14-16页 |
| 1.2 miRNAs在植物发育中的作用 | 第16-24页 |
| 2 植物中miRNA396/GRF研究进展 | 第24-27页 |
| 3 植物花器官形态建成的研究进展 | 第27-38页 |
| 3.1 CLAVATA-WUS反馈调节通路 | 第27-29页 |
| 3.2 KNOX基因促进分生组织的确立 | 第29-30页 |
| 3.3 禾本科植物的花序发育和分生组织转换 | 第30页 |
| 3.4 玉米中花序发育过程中的原基调控 | 第30-31页 |
| 3.5 水稻中涉及调控枝梗原基的决定，维持和分化的基因 | 第31-32页 |
| 3.6 花序的形态建成和产量 | 第32-34页 |
| 3.7 花序的分支原基向颖花原基的转换 | 第34页 |
| 3.8 颖花原基的确立 | 第34-35页 |
| 3.9 小花原基的确定 | 第35-36页 |
| 3.10 C-Class MADS-box基因的功能 | 第36页 |
| 3.11 其他影响小花分生组织决定的基因 | 第36-38页 |
| 4 植物激素对花序发育的调控 | 第38-40页 |
| 4.1 生长素介导的分生组织的起始和增生 | 第38页 |
| 4.2 生长素的生物合成基因 | 第38页 |
| 4.3 生长素的体内转运基因 | 第38-39页 |
| 4.4 细胞分裂素促进生殖分生组织的增大 | 第39-40页 |
| 4.5 植物激素通路之间的交叉互作调控花序发育 | 第40页 |
| 5. 本课题的目的和意义 | 第40-42页 |
| 第二章 调控水稻幼穗发育的关键性miRNA的鉴定 | 第42-50页 |
| 1 材料和方法 | 第42-46页 |
| 1.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 1.2 幼穗总RNA的提取和定量分析 | 第43页 |
| 1.3 Northern Blot | 第43-46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-49页 |
| 2.1 YA、9311、HL-6穗型相关的农艺性状统计 | 第46页 |
| 2.2 miRNA的microarray分析表达量 | 第46-47页 |
| 2.3 荧光定量PCR(qRT-PCR)分析miRNA表达量 | 第47-48页 |
| 2.4 Northern Blot分析miRNA表达量 | 第48-49页 |
| 3. 讨论 | 第49-50页 |
| 第三章 miR396和GRF6对水稻幼穗发育的遗传调控 | 第50-75页 |
| 1. 前言 | 第50页 |
| 2. 材料和方法 | 第50-59页 |
| 2.1 实验材料 | 第50页 |
| 2.2 质粒的小量制备(碱裂解法) | 第50-51页 |
| 2.3 转化感受态 | 第51-52页 |
| 2.4 转化载体的构建 | 第52-54页 |
| 2.5 水稻的遗传转化及转基因植株的检测 | 第54-57页 |
| 2.6 遗传转化植株的RNA抽提及基因表达量检测 | 第57-58页 |
| 2.7 遗传转化植株和野生型农艺性状统计、小区产量统计分析 | 第58-59页 |
| 3. 结果与分析 | 第59-72页 |
| 3.1 miRNA的过表达转基因 | 第59-60页 |
| 3.2 miR396b过表达转基因植株的鉴定 | 第60-62页 |
| 3.3 miR396干涉转基因植株表型和表达量分析 | 第62页 |
| 3.4 miR396过表达和干涉转基因植株产量相关的农艺性状统计 | 第62-64页 |
| 3.5 GRF转基因表型鉴定和产量统计 | 第64-70页 |
| 3.6 MIM396、OEGRF6和OErGRF6转基因植株小区产量测试 | 第70-72页 |
| 4. 讨论 | 第72-75页 |
| 第四章 miR396b/GRF6时空表达与调控幼穗发育的细胞学观察 | 第75-95页 |
| 1. 前言 | 第75页 |
| 2. 材料和方法 | 第75-87页 |
| 2.1 研究材料 | 第75-76页 |
| 2.2 幼穗RNA的提取 | 第76页 |
| 2.3 RACE对GRF家族剪切位点的鉴定 | 第76-78页 |
| 2.4 瞬时表达转基因系统构建 | 第78-79页 |
| 2.5 miRNA396和GRF6的原位杂交 | 第79-86页 |
| 2.6 扫描电子显微镜观察 | 第86-87页 |
| 3.结果 | 第87-93页 |
| 3.1 miR396和GRF家族的瞬时表达模式 | 第87-91页 |
| 3.2 原位杂交分析miR396b和GRF6幼穗中表达量 | 第91-92页 |
| 3.3 扫描电镜分析转基因幼穗发育过程中的形态变化 | 第92-93页 |
| 4. 讨论 | 第93-95页 |
| 第五章 GRF6调控水稻幼穗发育的代谢通路分析 | 第95-120页 |
| 1 前言 | 第95页 |
| 2 材料和方法 | 第95-102页 |
| 2.1 材料 | 第95页 |
| 2.2 相关基因的定量分析 | 第95页 |
| 2.3 mRNA转录组分析 | 第95-96页 |
| 2.4 Chip-Seq启动子结合位点分析 | 第96-99页 |
| 2.5 水稻蛋白原核表达和纯化 | 第99-100页 |
| 2.6 凝胶阻滞实验(EMSA) | 第100-102页 |
| 2.7 生长素测定 | 第102页 |
| 3 结果 | 第102-118页 |
| 3.1 OEmiR396b,MIM396和WT幼穗的基因表达差异 | 第102-110页 |
| 3.2 Chip-seq鉴定GRF6结合的启动子 | 第110-114页 |
| 3.3 RNA-Seq和Chip-Seq筛选到幼穗发育相关基因的表达情况 | 第114-115页 |
| 3.4 EMSA验证筛选到的GRF6调控基因 | 第115-116页 |
| 3.5 OEmiR396b,MIM396,OEGRF6和WT中生长素含量测定 | 第116-118页 |
| 4. 讨论 | 第118-120页 |
| 第六章 总讨论 | 第120-123页 |
| 参考文献 | 第123-130页 |
| 附表 | 第130-134页 |
| 博士在读期间发表的论文 | 第134-135页 |
| 致谢 | 第135页 |
