| 符号说明 | 第5-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第14-39页 |
| 1.1 核糖体对植物生长发育的影响 | 第14-26页 |
| 1.1.1 真核生物核糖体 | 第14页 |
| 1.1.2 拟南芥中核糖体蛋白基因的数目与分布 | 第14-15页 |
| 1.1.3 拟南芥核糖体合成过程 | 第15-18页 |
| 1.1.4 拟南芥核糖体蛋白对植物生长发育的调节 | 第18-20页 |
| 1.1.5 拟南芥核糖体合成因子对植物生长发育的调节 | 第20-22页 |
| 1.1.6 AAA-ATPases核糖体合成因子 | 第22-25页 |
| 1.1.7 拟南芥核糖体合成因子AtMDN | 第25-26页 |
| 1.2 氧化胁迫 | 第26-32页 |
| 1.2.1 超氧阴离子自由基 | 第27-29页 |
| 1.2.2 过氧化氢 | 第29-30页 |
| 1.2.3 羟基自由基 | 第30-31页 |
| 1.2.4 单线态氧 | 第31页 |
| 1.2.5 金属离子 | 第31-32页 |
| 1.3 ROS介导的信号传导和植物细胞生理学调节 | 第32-36页 |
| 1.3.1 脂质的氧化 | 第34-35页 |
| 1.3.2 蛋白质的修饰 | 第35-36页 |
| 1.3.3 对碳水化合物的影响 | 第36页 |
| 1.3.4 对核酸的影响 | 第36页 |
| 1.4 拟南芥Ⅲ类过氧化物酶家族基因 | 第36-37页 |
| 1.5 实验目的与意义 | 第37-39页 |
| 2 材料与方法 | 第39-59页 |
| 2.1 实验材料 | 第39-41页 |
| 2.1.1 拟南芥材料及培养条件 | 第39页 |
| 2.1.2 载体构建菌株及质粒 | 第39页 |
| 2.1.3 生化试剂 | 第39页 |
| 2.1.4 引物 | 第39-41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-57页 |
| 2.2.1 EMS诱变拟南芥种子 | 第41-42页 |
| 2.2.2 图位克隆 | 第42页 |
| 2.2.3 筛选T-DNA插入突变体 | 第42-43页 |
| 2.2.4 拟南芥基因组提取 | 第43页 |
| 2.2.5 拟南芥总RNA的提取 | 第43-45页 |
| 2.2.5.1 TRIzol法提取总RNA | 第43-44页 |
| 2.2.5.2 试剂盒法提取植物总RNA | 第44-45页 |
| 2.2.5.3 去除RNA中的DNA | 第45页 |
| 2.2.5.4 合成cDNA | 第45页 |
| 2.2.6 载体构建 | 第45-48页 |
| 2.2.6.1 目的DNA片段的获得 | 第45-46页 |
| 2.2.6.2 DNA片段的回收 | 第46-47页 |
| 2.2.6.3 平末端片段加尾 | 第47页 |
| 2.2.6.4 目的DNA片段与克隆载体的连接反应 | 第47页 |
| 2.2.6.5 重组质粒的酶切反应 | 第47页 |
| 2.2.6.6 酶切片段与表达载体的连接反应 | 第47-48页 |
| 2.2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第48-49页 |
| 2.2.7.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第48页 |
| 2.2.7.2 大肠杆菌细胞的转化 | 第48-49页 |
| 2.2.7.3 菌液PCR方法筛选重组质粒 | 第49页 |
| 2.2.8 质粒DNA的提取 | 第49-50页 |
| 2.2.8.1 小量碱法质粒DNA的提取 | 第49-50页 |
| 2.2.8.2 大量法质粒DNA的提取 | 第50页 |
| 2.2.9 植物表达载体的农杆菌转化 | 第50-51页 |
| 2.2.9.1 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第50-51页 |
| 2.2.9.2 冻融法转化农杆菌 | 第51页 |
| 2.2.10 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第51页 |
| 2.2.11 转基因株系的筛选 | 第51页 |
| 2.2.12 拟南芥总蛋白的提取与浓度测定 | 第51-53页 |
| 2.2.12.1 拟南芥总蛋白的提取 | 第51-52页 |
| 2.2.12.2 试剂盒法测定蛋白浓度 | 第52-53页 |
| 2.2.12.3 蛋白质凝胶电泳检测拟南芥总蛋白提取质量 | 第53页 |
| 2.2.13 蛋白质酶切 | 第53-54页 |
| 2.2.14 C18柱制作活化 | 第54-55页 |
| 2.2.15 酶切组分分离 | 第55页 |
| 2.2.16 质谱鉴定 | 第55页 |
| 2.2.17 转基因植物的GUS组织化学染色分析 | 第55-56页 |
| 2.2.18 甲基紫精胁迫处理实验 | 第56页 |
| 2.2.19 拟南芥过氧化物酶(PrxⅢs)总活性测定 | 第56页 |
| 2.2.20 进化树的构建 | 第56-57页 |
| 2.2.21 主要试剂配制方法 | 第57页 |
| 2.3 网络资源 | 第57-59页 |
| 3 结果与分析 | 第59-80页 |
| 3.1 拟南芥dsr1突变体的筛选与表型鉴定 | 第59-60页 |
| 3.2 dsr1突变位点鉴定 | 第60-62页 |
| 3.3 AtMDN1序列比对分析 | 第62-64页 |
| 3.4 AtMDN1表达模式分析 | 第64-65页 |
| 3.5 WT和mdn1-1幼苗中差异表达蛋白鉴定与分析 | 第65-66页 |
| 3.6 WT与mdn1-1差异表达蛋白质GO分析 | 第66-71页 |
| 3.6.1 参与核糖体RNA加工过程的差异表达蛋白质分析 | 第67-68页 |
| 3.6.2 参与核糖体合成过程的差异表达蛋白质分析 | 第68-69页 |
| 3.6.3 参与过氧化氢分解过程的差异表达蛋白质分析 | 第69-71页 |
| 3.7 PrxⅢs总活性检测分析 | 第71页 |
| 3.8 根尖分生区细胞数目统计分析 | 第71-72页 |
| 3.9 WT和mdn1-1组织木质化程度及生长发育表型分析 | 第72-76页 |
| 3.9.1 下胚轴木质化染色及莲座叶数目统计分析 | 第72-73页 |
| 3.9.2 成苗植株茎组织木质化程度分析 | 第73-74页 |
| 3.9.3 茎及下胚轴组织切片分析 | 第74-76页 |
| 3.10 甲基紫精模拟氧化胁迫处理分析 | 第76页 |
| 3.11 莲座叶发育状况及耐受甲基紫精诱导的氧化胁迫抗性分析 | 第76-80页 |
| 4 讨论 | 第80-84页 |
| 4.1 AtMDN1参与核糖体加工装配过程 | 第80页 |
| 4.2 AtMDN1突变位点谷氨酸在植物中具有保守性 | 第80-81页 |
| 4.3 AtMDN1参与调控拟南芥生长发育 | 第81-83页 |
| 4.4 AtMDN1突变后拟南芥耐受甲基紫精诱导的氧化胁迫抗性提高 | 第83-84页 |
| 5 结论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 攻读学位期间发表的论文及成果 | 第103页 |
