摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
第一章 文献综述 | 第8-19页 |
1.1 作物抗旱育种的途径 | 第8-10页 |
1.1.1 常规育种 | 第9页 |
1.1.2 分子标记辅助育种 | 第9页 |
1.1.3 基因遗传(转基因)育种 | 第9-10页 |
1.2 作物抗旱作用机制及抗旱相关基因的研究进展 | 第10-11页 |
1.2.1 干旱胁迫对作物的影响 | 第10页 |
1.2.1.1 干旱影响作物生长形态与正常发育 | 第10页 |
1.2.1.2 干旱影响作物超微结构与代谢过程 | 第10页 |
1.2.2 作物抗旱作用机制及抗旱相关基因 | 第10-11页 |
1.3 ERECTA基因研究进展 | 第11-16页 |
1.3.1 拟南芥ERECTA基因的研究进展 | 第11-16页 |
1.3.1.1 ERECTA基因调控气孔、叶表皮细胞的发育来协调拟南芥蒸腾作用与光合作用 | 第11-13页 |
1.3.1.2 ERECTA基因影响拟南芥花和叶等地上器官的生长发育 | 第13-14页 |
1.3.1.3 ERECTA基因与拟南芥激素和光调节的联系 | 第14-15页 |
1.3.1.4 ERECTA基因参与拟南芥抗病信号识别与转导 | 第15-16页 |
1.3.2 其他植物中ERECTA基因的相关研究 | 第16页 |
1.4 实时荧光定量PCR技术 | 第16-18页 |
1.4.1 实时荧光定量技术(qRT-PCR)原理 | 第16-17页 |
1.4.2 qRT-PCR分类 | 第17页 |
1.4.3 qRT-PCR的定量方法 | 第17-18页 |
1.5 本研究的目的意义 | 第18-19页 |
第二章材料与方法 | 第19-28页 |
2.1 试验材料 | 第19页 |
2.1.1 植物材料 | 第19页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第19页 |
2.1.3 主要试剂与试剂配方 | 第19页 |
2.2 试验方法 | 第19-28页 |
2.2.1 ERECTA基因的生物信息学分析 | 第19-20页 |
2.2.2 SbERECTA的基因组全长DNA扩增、全长cDNA的克隆和序列分析 | 第20-25页 |
2.2.2.1 高粱材料的培养与处理 | 第20-21页 |
2.2.2.2 高粱材料基因组DNA的提取 | 第21页 |
2.2.2.3 SbERECTA基因组全长DNA的扩增及测序 | 第21-22页 |
2.2.2.4 高粱材料总RNA的提取 | 第22页 |
2.2.2.5 反转录合成第一链cDNA(RT-PCR) | 第22-23页 |
2.2.2.6 SbERECTA全长cDNA扩增 | 第23页 |
2.2.2.7 目的片段PCR扩增产物的回收 | 第23页 |
2.2.2.8 PCR回收产物与克隆载体的连接、转化 | 第23-24页 |
2.2.2.9 重组质粒DNA的提取、PCR鉴定、酶切验证、测序验证 | 第24-25页 |
2.2.3 SbERECTA过表达载体构建 | 第25-26页 |
2.2.3.1 φ174-Ubi-SbER11Tnos过表达载体的构建 | 第25页 |
2.2.3.2 φ174-Ubi-Sb ER2-1-Tnos 过表达载体的构建 | 第25-26页 |
2.2.4 干旱胁迫下高粱ERECTA基因表达差异分析 | 第26-28页 |
2.2.4.1 高粱材料的培养与处理 | 第26页 |
2.2.4.2 高粱基因组DNA的提取 | 第26页 |
2.2.4.3 SbERECTA基因组DNA的扩增及测序 | 第26页 |
2.2.4.4 高粱材料总RNA的提取、反转录PCR及cDNA全长序列扩增 | 第26-27页 |
2.2.4.5 qRT-PCR | 第27-28页 |
第三章 结果与分析 | 第28-46页 |
3.1 高粱ERECTA基因组DNA提取及扩增 | 第28页 |
3.2 高粱ERECTA基因的克隆 | 第28-32页 |
3.2.1 高粱总RNA浓度与纯度鉴定 | 第28-30页 |
3.2.2 高粱ERECTA目的基因的扩增 | 第30-31页 |
3.2.3 阳性质粒的鉴定 | 第31-32页 |
3.3 高粱ERECTA家族基因成员的生物信息学分析 | 第32-34页 |
3.3.1 高粱ERECTA家族基因成员的基因结构分析 | 第32页 |
3.3.2 高粱ERECTA家族基因编码氨基酸序列特征及蛋白结构分析 | 第32-34页 |
3.4 构建SbERECTA植物表达载体 | 第34-35页 |
3.5 干旱胁迫下高粱ERECTA基因表达分析 | 第35-46页 |
3.5.1 不同高粱品种的干旱处理及干旱数据分析 | 第35页 |
3.5.2 不同高粱品种基因组DNA的质量检测 | 第35-37页 |
3.5.3 不同高粱品种ERECTA基因组DNA序列一致性分析 | 第37-38页 |
3.5.4 干旱胁迫处理高粱材料总RNA的质量鉴定 | 第38页 |
3.5.5 不同高粱品种ERECTA cDNA的序列一致性分析 | 第38-39页 |
3.5.6 实时荧光定量PCR检测 | 第39-41页 |
3.5.7 干旱胁迫下高粱ERECTA基因表达差异分析 | 第41-44页 |
3.5.8 SbERECTA基因的相对表达量与相对鲜重生物量之间的相关性分析 | 第44-46页 |
第四章 讨论与总结 | 第46-49页 |
4.1 讨论 | 第46-47页 |
4.2 总结 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
缩写词(Abbreviation) | 第54-55页 |
附录 | 第55-63页 |
致谢 | 第63页 |