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高粱ERECTA家族基因的克隆及其干旱胁迫相对表达水平的分析

摘要第6-7页
Abstract第7页
第一章 文献综述第8-19页
    1.1 作物抗旱育种的途径第8-10页
        1.1.1 常规育种第9页
        1.1.2 分子标记辅助育种第9页
        1.1.3 基因遗传(转基因)育种第9-10页
    1.2 作物抗旱作用机制及抗旱相关基因的研究进展第10-11页
        1.2.1 干旱胁迫对作物的影响第10页
            1.2.1.1 干旱影响作物生长形态与正常发育第10页
            1.2.1.2 干旱影响作物超微结构与代谢过程第10页
        1.2.2 作物抗旱作用机制及抗旱相关基因第10-11页
    1.3 ERECTA基因研究进展第11-16页
        1.3.1 拟南芥ERECTA基因的研究进展第11-16页
            1.3.1.1 ERECTA基因调控气孔、叶表皮细胞的发育来协调拟南芥蒸腾作用与光合作用第11-13页
            1.3.1.2 ERECTA基因影响拟南芥花和叶等地上器官的生长发育第13-14页
            1.3.1.3 ERECTA基因与拟南芥激素和光调节的联系第14-15页
            1.3.1.4 ERECTA基因参与拟南芥抗病信号识别与转导第15-16页
        1.3.2 其他植物中ERECTA基因的相关研究第16页
    1.4 实时荧光定量PCR技术第16-18页
        1.4.1 实时荧光定量技术(qRT-PCR)原理第16-17页
        1.4.2 qRT-PCR分类第17页
        1.4.3 qRT-PCR的定量方法第17-18页
    1.5 本研究的目的意义第18-19页
第二章材料与方法第19-28页
    2.1 试验材料第19页
        2.1.1 植物材料第19页
        2.1.2 菌株和载体第19页
        2.1.3 主要试剂与试剂配方第19页
    2.2 试验方法第19-28页
        2.2.1 ERECTA基因的生物信息学分析第19-20页
        2.2.2 SbERECTA的基因组全长DNA扩增、全长cDNA的克隆和序列分析第20-25页
            2.2.2.1 高粱材料的培养与处理第20-21页
            2.2.2.2 高粱材料基因组DNA的提取第21页
            2.2.2.3 SbERECTA基因组全长DNA的扩增及测序第21-22页
            2.2.2.4 高粱材料总RNA的提取第22页
            2.2.2.5 反转录合成第一链cDNA(RT-PCR)第22-23页
            2.2.2.6 SbERECTA全长cDNA扩增第23页
            2.2.2.7 目的片段PCR扩增产物的回收第23页
            2.2.2.8 PCR回收产物与克隆载体的连接、转化第23-24页
            2.2.2.9 重组质粒DNA的提取、PCR鉴定、酶切验证、测序验证第24-25页
        2.2.3 SbERECTA过表达载体构建第25-26页
            2.2.3.1 φ174-Ubi-SbER11Tnos过表达载体的构建第25页
            2.2.3.2 φ174-Ubi-Sb ER2-1-Tnos 过表达载体的构建第25-26页
        2.2.4 干旱胁迫下高粱ERECTA基因表达差异分析第26-28页
            2.2.4.1 高粱材料的培养与处理第26页
            2.2.4.2 高粱基因组DNA的提取第26页
            2.2.4.3 SbERECTA基因组DNA的扩增及测序第26页
            2.2.4.4 高粱材料总RNA的提取、反转录PCR及cDNA全长序列扩增第26-27页
            2.2.4.5 qRT-PCR第27-28页
第三章 结果与分析第28-46页
    3.1 高粱ERECTA基因组DNA提取及扩增第28页
    3.2 高粱ERECTA基因的克隆第28-32页
        3.2.1 高粱总RNA浓度与纯度鉴定第28-30页
        3.2.2 高粱ERECTA目的基因的扩增第30-31页
        3.2.3 阳性质粒的鉴定第31-32页
    3.3 高粱ERECTA家族基因成员的生物信息学分析第32-34页
        3.3.1 高粱ERECTA家族基因成员的基因结构分析第32页
        3.3.2 高粱ERECTA家族基因编码氨基酸序列特征及蛋白结构分析第32-34页
    3.4 构建SbERECTA植物表达载体第34-35页
    3.5 干旱胁迫下高粱ERECTA基因表达分析第35-46页
        3.5.1 不同高粱品种的干旱处理及干旱数据分析第35页
        3.5.2 不同高粱品种基因组DNA的质量检测第35-37页
        3.5.3 不同高粱品种ERECTA基因组DNA序列一致性分析第37-38页
        3.5.4 干旱胁迫处理高粱材料总RNA的质量鉴定第38页
        3.5.5 不同高粱品种ERECTA cDNA的序列一致性分析第38-39页
        3.5.6 实时荧光定量PCR检测第39-41页
        3.5.7 干旱胁迫下高粱ERECTA基因表达差异分析第41-44页
        3.5.8 SbERECTA基因的相对表达量与相对鲜重生物量之间的相关性分析第44-46页
第四章 讨论与总结第46-49页
    4.1 讨论第46-47页
    4.2 总结第47-49页
参考文献第49-54页
缩写词(Abbreviation)第54-55页
附录第55-63页
致谢第63页

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