| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第13-27页 |
| 1.1 高等药用真菌 | 第13-14页 |
| 1.2 灵芝及其生物活性成分 | 第14-15页 |
| 1.3 灵芝酸结构、种类及其药理活性 | 第15-19页 |
| 1.4 灵芝酸的生物合成 | 第19-21页 |
| 1.5 灵芝酸的发酵生产 | 第21-22页 |
| 1.6 整合发酵策略与基因工程在提高次级代谢产物产量中的应用 | 第22-23页 |
| 1.7 灵芝酸的多样性 | 第23-25页 |
| 1.8 立题的目的和意义 | 第25-26页 |
| 1.9 本文的主要研究内容与技术路线 | 第26-27页 |
| 第二章 在VHb灵芝工程菌株中整合液体静置培养和钙离子添加策略对灵芝酸生物合成的影响 | 第27-57页 |
| 2.1 引言 | 第27-28页 |
| 2.2 材料与方法 | 第28-45页 |
| 2.2.1 菌种及培养 | 第29-31页 |
| 2.2.2 灵芝细胞生物量以及培养基中残糖的含量测定 | 第31-32页 |
| 2.2.3 灵芝酸单体的提取与含量测定 | 第32-34页 |
| 2.2.4 中间代谢产物鲨烯和羊毛甾醇的提取与检测 | 第34-36页 |
| 2.2.5 灵芝酸生物合成相关基因hmgr,fps,sqs和cyp-5150l8表达水平的检测 | 第36-44页 |
| 2.2.6 数据处理与分析方法 | 第44-45页 |
| 2.3 实验结果 | 第45-55页 |
| 2.3.1 静置培养条件下VHb的表达对灵芝酸产量的影响 | 第45-49页 |
| 2.3.2 整合策略下灵芝酸的生物合成 | 第49-52页 |
| 2.3.3 整合策略对中间代谢产物鲨烯和羊毛甾醇积累量的影响 | 第52-54页 |
| 2.3.4 整合策略下灵芝酸生物合成相关基因hmgr,fps,sqs和cyp-5150l8表达水平 | 第54-55页 |
| 2.4 讨论 | 第55-56页 |
| 2.5 本章小结 | 第56-57页 |
| 第三章 静置培养条件下VHb表达对Ⅰ型与Ⅱ型灵芝酸分布的影响 | 第57-66页 |
| 3.1 引言 | 第57-58页 |
| 3.2 材料与方法 | 第58-62页 |
| 3.2.1 静置培养条件下VHb表达对灵芝酸产量影响 | 第58页 |
| 3.2.2 细胞色素P450基因A2,V2和A13表达水平的检测 | 第58-62页 |
| 3.2.3 数据处理与分析方法 | 第62页 |
| 3.3 实验结果 | 第62-64页 |
| 3.3.1 静置培养条件下VHb表达对Ⅰ型和Ⅱ型灵芝酸比例的影响 | 第62-63页 |
| 3.3.2 静置培养条件下VHb表达对P450基因A2,V2和A13转录水平的影响 | 第63-64页 |
| 3.4 讨论 | 第64-65页 |
| 3.5 本章小结 | 第65-66页 |
| 第四章 结论与展望 | 第66-68页 |
| 4.1 全文结论 | 第66-67页 |
| 4.2 展望 | 第67页 |
| 4.3 文章创新点 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表的论文 | 第78-79页 |
| 附录B 标准曲线 | 第79-82页 |
