| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略词 | 第15-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-26页 |
| 1.1 土壤中铝的分布及存在形式 | 第16页 |
| 1.2 酸性土壤中铝对植物的危害 | 第16-18页 |
| 1.2.1 铝胁迫对植物细胞的影响 | 第16-17页 |
| 1.2.2 铝胁迫对植物光合作用的影响 | 第17页 |
| 1.2.3 铝胁迫对植物根系的损害 | 第17-18页 |
| 1.3 植物耐铝毒机制 | 第18-21页 |
| 1.3.1 植物耐铝毒的生理机制 | 第18-19页 |
| 1.3.2 植物耐铝毒的分子机制 | 第19-21页 |
| 1.4 bHLH转录因子的结构和功能 | 第21-22页 |
| 1.4.1 bHLH转录因子的结构 | 第21页 |
| 1.4.2 bHLH转录因子的功能 | 第21-22页 |
| 1.5 丹波黑大豆中bHLH30转录因子对植物耐铝性的作用机制 | 第22-23页 |
| 1.5.1 丹波黑大豆bHLH30转录因子对植物耐铝性的影响 | 第22页 |
| 1.5.2 丹波黑大豆bHLH30转录因子作用机制探究 | 第22-23页 |
| 1.5.3 丹波黑大豆bHLH30转录因子下游调控基因研究 | 第23页 |
| 1.6 STOP1基因对植物耐铝胁迫的作用 | 第23页 |
| 1.7 MATE基因对植物耐铝胁迫的作用 | 第23-24页 |
| 1.8 本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 STOP1基因的启动子分析 | 第26-43页 |
| 2.1 材料和方法 | 第26-34页 |
| 2.1.1 植物材料的处理 | 第26页 |
| 2.1.2 总DNA提取 | 第26-27页 |
| 2.1.3 引物合成 | 第27页 |
| 2.1.4 PCR扩增GmSTOP1基因启动子片段 | 第27-28页 |
| 2.1.5 目的片段的回收与TA克隆 | 第28-29页 |
| 2.1.6 转化大肠杆菌感受态细胞 | 第29-30页 |
| 2.1.7 质粒酶切检测 | 第30-31页 |
| 2.1.8 构建入门载体pENTR2B-GmSTOP1P | 第31页 |
| 2.1.9 LR反应构建植物表达载体pHGWL7-GmSTOP1P | 第31-32页 |
| 2.1.10 转化农杆菌 | 第32-33页 |
| 2.1.11 GmSTOP1P基因的瞬时表达 | 第33页 |
| 2.1.12 瞬时表达烟草叶片荧光素酶活性测定 | 第33-34页 |
| 2.2 实验结果 | 第34-39页 |
| 2.2.1 GmSTOP1P基因片段分析 | 第34-35页 |
| 2.2.2 GmSTOP1P基因的扩增 | 第35-36页 |
| 2.2.3 入门载体pENTR2B-GmSTOP1P的构建 | 第36-38页 |
| 2.2.4 植物表达载体pHGWL7-GmSTOP1P的构建 | 第38-39页 |
| 2.2.5 荧光素酶活性测定及分析 | 第39页 |
| 2.3 本章小结 | 第39-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 GmMATE75基因对植物耐铝性的影响 | 第43-70页 |
| 3.1 材料与方法 | 第43-51页 |
| 3.1.1 植物材料的处理 | 第43页 |
| 3.1.2 总RNA提取及纯化 | 第43-44页 |
| 3.1.3 cDNA第一链合成 | 第44-45页 |
| 3.1.4 扩增GmMATE75结构基因 | 第45页 |
| 3.1.5 目的片段的回收与TA克隆 | 第45-46页 |
| 3.1.6 转化大肠杆菌感受态细胞 | 第46页 |
| 3.1.7 质粒酶切检测 | 第46页 |
| 3.1.8 构建入门载体pENTR2B-GmMATE | 第46-47页 |
| 3.1.9 LR反应建植物表达载体pK2GW7-GmMATE | 第47-48页 |
| 3.1.10 农杆菌转化法转化野生型烟草 | 第48页 |
| 3.1.11 GmMATE75转基因型烟草的培养及检测 | 第48页 |
| 3.1.12 烟草的铝处理 | 第48-49页 |
| 3.1.13 烟草的根伸长率测定 | 第49页 |
| 3.1.14 烟草的多糖含量测定 | 第49页 |
| 3.1.15 烟草的过氧化氢含量测定 | 第49-50页 |
| 3.1.16 烟草的丙二醛含量测定 | 第50页 |
| 3.1.17 烟草的柠檬酸含量测定 | 第50页 |
| 3.1.18 烟草的过氧化氢酶活性测定 | 第50-51页 |
| 3.1.19 烟草的超氧化物歧化酶活性测定 | 第51页 |
| 3.1.20 烟草的过氧化物酶活性测定 | 第51页 |
| 3.2 实验结果 | 第51-66页 |
| 3.2.1 GmMATE75基因的扩增 | 第51-53页 |
| 3.2.2 GmMATE75基因的扩增 | 第53页 |
| 3.2.3 入门载体pENTR2B-GmMATE75的构建 | 第53-55页 |
| 3.2.4 植物表达载体pK2GW7-GmMATE75的构建 | 第55-56页 |
| 3.2.5 GmMATE75转基因烟草的获取 | 第56-57页 |
| 3.2.6 GmMATE75转基因烟草的检测 | 第57-58页 |
| 3.2.7 铝处理后烟草的生理特性分析 | 第58-66页 |
| 3.3 本章小结 | 第66-68页 |
| 3.4 讨论 | 第68-70页 |
| 第四章 丹波黑大豆中GmbHLH30转录因子对GmMATE75基因的调控 | 第70-82页 |
| 4.1 材料和方法 | 第70-74页 |
| 4.1.1 植物材料的处理 | 第70页 |
| 4.1.2 总DNA提取 | 第70页 |
| 4.1.3 引物合成 | 第70-71页 |
| 4.1.4 PCR扩增GmMATE75基因启动子片段 | 第71页 |
| 4.1.5 目的片段的回收与TA克隆 | 第71页 |
| 4.1.6 转化大肠杆菌感受态细胞 | 第71页 |
| 4.1.7 质粒酶切检测 | 第71-72页 |
| 4.1.8 构建入门载体pENTR2B-GmMATE75P | 第72-73页 |
| 4.1.9 LR反应构建植物表达载体pHGWL7-GmMATE75P | 第73页 |
| 4.1.10 转化农杆菌 | 第73页 |
| 4.1.11 GmMATE75P基因的瞬时表达 | 第73-74页 |
| 4.1.12 瞬时表达烟草叶片荧光素酶活性测定 | 第74页 |
| 4.2 实验结果 | 第74-79页 |
| 4.2.1 GmMATE75P基因片段分析 | 第74-75页 |
| 4.2.2 GmMATE75P基因的扩增 | 第75-76页 |
| 4.2.3 入门载体pENTR2B-GmMATE75P的构建 | 第76-78页 |
| 4.2.4 植物表达载体pHGWL7-GmMATE75P的构建 | 第78页 |
| 4.2.5 荧光素酶活性测定及分析 | 第78-79页 |
| 4.3 本章小结 | 第79-81页 |
| 4.4 讨论 | 第81-82页 |
| 第五章 总结及展望 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-89页 |
| 附录 A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第89页 |
