中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
英文缩略词 | 第8-12页 |
第1章 前言 | 第12-21页 |
1.1 间充质干细胞成神经分化 | 第12-17页 |
1.1.1 间充质干细胞 | 第12-13页 |
1.1.2 脐带间充质干细胞 | 第13-14页 |
1.1.3 成神经分化 | 第14-17页 |
1.2 基质硬度调控干细胞成神经分化 | 第17-19页 |
1.2.1 基质硬度 | 第17页 |
1.2.2 软基质调控细胞成神经分化 | 第17-18页 |
1.2.3 软基质调控细胞成神经分化的机制 | 第18-19页 |
1.3 基质硬度调控干细胞分化中BMPR的作用 | 第19-21页 |
1.3.1 BMPR在基质硬度调控干细胞分化 | 第19-20页 |
1.3.2 BMPR信号通路的cross-talk | 第20-21页 |
第2章 材料与方法 | 第21-33页 |
2.1 实验材料 | 第21-24页 |
2.1.1 主要仪器和设备 | 第21-22页 |
2.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
2.1.3 主要试剂的配制 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-33页 |
2.2.1 hUC-MSCs的原代培养 | 第24页 |
2.2.2 hUC-MSCs的传代 | 第24-25页 |
2.2.3 hUC-MSCs的复苏与冻存 | 第25页 |
2.2.4 聚丙烯酰胺水凝胶的制备 | 第25-26页 |
2.2.5 水凝胶的交联 | 第26页 |
2.2.6 水凝胶上细胞培养 | 第26页 |
2.2.7 实时定量PCR检测标记基因的表达 | 第26-29页 |
2.2.8 表面标记物的免疫荧光染色鉴定 | 第29-30页 |
2.2.9 Western blot检测BMPR表达情况 | 第30-32页 |
2.2.10 钙离子荧光探针检测 | 第32页 |
2.2.11 统计学分析 | 第32-33页 |
第3章 实验结果 | 第33-47页 |
3.1 HUC-MSCS的培养与鉴定 | 第33-34页 |
3.1.1 hUC-MSCs的原代培养 | 第33-34页 |
3.1.2 hUC-MSCs的鉴定 | 第34页 |
3.2 基质硬度的制备 | 第34-36页 |
3.2.1 聚丙烯酰胺水凝胶的制作 | 第34-35页 |
3.2.2 聚丙烯酰胺水凝胶的交联 | 第35-36页 |
3.3 基质硬度对HUC-MSCS形态的影响 | 第36-38页 |
3.3.1 基质硬度影响细胞形态 | 第36页 |
3.3.2 基质硬度影响细胞长宽比 | 第36-37页 |
3.3.3 基质硬度影响细胞面积 | 第37-38页 |
3.4 基质硬度诱导HUC-MSCS向神经方向分化 | 第38-40页 |
3.4.1 qPCR检测神经标志物在mRNA水平的表达 | 第38-39页 |
3.4.2 Western Blot检测神经标志物在蛋白水平的表达 | 第39-40页 |
3.5 基质硬度上HUC-MSCS的BMPR的表达水平 | 第40-42页 |
3.5.1 qPCR检测BMPR在mRNA水平的表达 | 第40-41页 |
3.5.2 Western blot检测BMPR在蛋白水平的表达 | 第41-42页 |
3.6 BMPR抑制剂对基质硬度HUC-MSCS神经分化的影响 | 第42-45页 |
3.6.1 Western Blot检测BMPR抑制剂浓度 | 第42-43页 |
3.6.2 加入抑制剂后基质硬度上BMPR在mRNA水平的表达 | 第43页 |
3.6.3 加入抑制剂后基质硬度上BMPR在蛋白水平的表达 | 第43-44页 |
3.6.4 加入抑制剂后BMPR下游蛋白的表达变化 | 第44-45页 |
3.7 钙离子通道信号检测 | 第45-47页 |
第4章 讨论 | 第47-50页 |
第5章 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-59页 |
作者简介及在学期间的科研成果 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |