| 中文摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 英文缩写词表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 材料与方法 | 第12-32页 |
| 1 细胞系与质粒 | 第12页 |
| 2 主要试剂药品 | 第12-13页 |
| 3 实验设备 | 第13-14页 |
| 4 主要实验试剂的配制 | 第14-16页 |
| 5 方法 | 第16-32页 |
| 5.1 目的基因序列合成 | 第16-17页 |
| 5.2 目的基因扩增纯化 | 第17-18页 |
| 5.3 目的基因扩增产物纯化 | 第18-19页 |
| 5.4 目的基因酶切 | 第19-20页 |
| 5.5 酶切产物纯化 | 第20-21页 |
| 5.6 酶切产物与入门载体连接 | 第21页 |
| 5.7 转化大肠杆菌(转化用DH5a) | 第21页 |
| 5.8 菌落PCR | 第21-22页 |
| 5.9 质粒提取 | 第22页 |
| 5.10 测序 | 第22-23页 |
| 5.11 无内毒素质粒大提 | 第23-24页 |
| 5.12 CHO细胞的复苏 | 第24页 |
| 5.13 CHO细胞传代 | 第24页 |
| 5.14 细胞冻存 | 第24页 |
| 5.15 重组质粒转染CHO细胞 | 第24-25页 |
| 5.16 SDS-PAGE电泳实验 | 第25-28页 |
| 5.17 his-tag蛋白验证(WesternBlot)实验 | 第28-29页 |
| 5.18 CD200R的Ni-NTA纯化 | 第29-30页 |
| 5.19 纯化得到的蛋白样品处理 | 第30页 |
| 5.20 SDS-PAGE电泳和SimpleWestern检测 | 第30页 |
| 5.21 浓缩后蛋白浓度测量(BCA法) | 第30-31页 |
| 5.22 重组CD200R蛋白的高效液相色谱和质谱检测(MALDI-TOF分析) | 第31-32页 |
| 结果 | 第32-45页 |
| 1 CD200R基因合成结果 | 第32-34页 |
| 2 表达载体pSecTag2A质粒图谱(5159bp) | 第34-35页 |
| 3 CD200R基因扩增结果 | 第35页 |
| 4 产物酶切后经PCR电泳结果 | 第35-36页 |
| 5 菌落悬液PCR扩增结果 | 第36-37页 |
| 6 质粒提取结果 | 第37页 |
| 7 重组质粒测序结果 | 第37-38页 |
| 8 微量分光光度计检测无内毒素质粒DNA浓度 | 第38页 |
| 9 CHO细胞转染结果 | 第38-39页 |
| 10 SDS-PAGE检测结果 | 第39页 |
| 11 WesternBlot结果 | 第39-41页 |
| 12 重组蛋白的镍柱纯化结果 | 第41-42页 |
| 13 蛋白纯化后SDS-PAGE检测结果 | 第42页 |
| 14 SimpleWestern检测结果 | 第42-43页 |
| 15 浓缩后蛋白含量BCA检测 | 第43-44页 |
| 16 高效液相色谱-质谱分析结果 | 第44-45页 |
| 讨论 | 第45-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 文献综述 | 第52-62页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 作者简介及攻读学位期间取得的科研成果 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
