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蓝莓果实成熟相关miRNA及其靶标的鉴定与VcMIR156基因的遗传转化

中文摘要第4-6页
abstract第6-7页
英文缩略表第9-13页
第1章 引言第13-21页
    1.1 蓝莓研究的意义第13页
    1.2 miRNA的概括第13-14页
    1.3 植物miRNA生物合成第14-15页
    1.4 miRNA的预测及鉴定第15-16页
    1.5 miRNA二代测序第16页
    1.6 植物miRNA靶基因的预测和鉴定第16-17页
    1.7 植物花青苷的代谢途径第17-18页
    1.8 miRNA对果实发育和成熟的调控第18页
    1.9 蓝莓miRNA研究现状第18-19页
    1.10 蓝莓组织培养和遗传转化研究现状第19-20页
    1.11 本研究的目的和意义第20-21页
第2章 蓝莓miRNA及其靶基因的挖掘第21-56页
    2.1 实验材料第21页
    2.2 实验药品第21-22页
    2.3 主要仪器设备第22页
    2.4 实验方法第22-27页
        2.4.1 sRNA测序和降解组测序文库的构建第22-23页
        2.4.2 sRNA测序数据的初步分析第23页
        2.4.3 蓝莓已知miRNA及其前体的系统发育分析第23页
        2.4.4 蓝莓miRNA在WF和BF两个文库中差异表达分析第23页
        2.4.5 降解组数据分析第23-24页
        2.4.6 实时定量荧光PCR第24-27页
        2.4.7 RLM-5’RACE第27页
    2.5 结果与分析第27-52页
        2.5.1 蓝莓sRNA测序和降解组测序基本数据分析第27-35页
        2.5.2 蓝莓miRNA的鉴定第35-36页
        2.5.3 蓝莓miRNA系统进化分析第36-39页
        2.5.4 蓝莓miRNA在果实成熟过程中表达模式第39-43页
        2.5.5 RNA的提取第43-45页
        2.5.6 蓝莓miRNA靶标的鉴定第45-49页
        2.5.7 蓝莓miRNA及其靶标在蓝莓果实发育过程中表达模式的动态分析第49-52页
    2.6 讨论第52-56页
        2.6.1 参与果实发育的miRNA及其靶标第52-53页
        2.6.2 蓝莓果实成熟中miRNA的调控网络第53-56页
第3章 蓝莓VcMIR156的遗传转化第56-74页
    3.1 实验材料第56-57页
        3.1.1 材料第56页
        3.1.2 菌株第56-57页
    3.2 实验药品第57页
    3.3 主要仪器第57-58页
    3.4 主要培养基第58-59页
    3.5 实验方法第59-65页
        3.5.1 拟南芥杂交第59页
        3.5.2 拟南芥sRNA的提取第59页
        3.5.3 蓝莓总RNA提取方法第59-60页
        3.5.4 Northernbloting第60-62页
        3.5.5 蓝莓的组培第62页
        3.5.6 VcMIR156的遗传转化第62-63页
        3.5.7 蓝莓DNA的提取第63-64页
        3.5.8 PCR反应第64页
        3.5.9 qRT-PCR第64-65页
    3.6 结果与分析第65-72页
        3.6.1 蓝莓MIR156基因(VcMIR156)的生物学功能鉴定第65-68页
        3.6.2 农杆菌介导蓝莓的遗传转化第68-70页
        3.6.3 转基因蓝莓pre-miRNA的过表达第70-72页
    3.7 讨论第72-74页
第4章 结论第74-75页
参考文献第75-84页
作者简介及科研成果第84-85页
致谢第85页

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